Tris- HCl缓冲液的配制方法？

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要配制20 mM/L的Tris-HCl缓冲液，pH为7.6，需要以下试剂：

• Tris base（摩尔质量121.14 g/mol）

• HCl（浓度为37％，重量/重量）

• 去离子水

配制步骤如下：

1.计算需要的Tris base质量（精确到0.01 g）。20 mM/L的Tris-HCl缓冲液需要0.02 mol/L Tris base。根据摩尔浓度来计算，每升液体中需要0.002414克Tris base [(0.02 mol/L) × (121.14 g/mol) = 2.414 g/L]。

2.用去离子水充分洗涤容器，将200 mL容器置于天平上，将所需的Tris base粉末称量并加入到容器中。

3.用去离子水冲洗烧杯，加入100 mL去离子水并加热至约60℃。

• 加入计算所需的HCl量（精确到0.1 mL）。由于Tris base是弱碱，因此需要酸来调节pH值。根据pH值和酸碱平衡原理，可以计算所需的HCl体积。在这种情况下，pH值为7.6时，HCl的浓度为0.1 M左右。根据体积浓度计算，每升液体中需要10.34 mL HCl [(0.1 mol/L) × (1 L/1000 mL) × (37％酸HCl/1 mol HCl) = 0.0037 g HCl/1 mL H2O]。通过滴加的方式向溶液中加入HCl，边滴边搅拌，每滴约0.2-0.5 mL，一直加到pH值达到7.6左右。

5.加入去离子水至刻度，彻底混合，得到20 mM/L Tris-HCl pH7.6溶液200 mL。

注意：在配制缓冲液时，应严格遵循卫生操作规范和实验室安全措施，穿戴适当的个人防护设备。另外，浓度为37％的HCl对皮肤和黏膜有刺激性，应当小心使用，并确保在通风良好的环境下操作。

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