血清同工酶电泳与蛋白质电泳有何区别与联系

简述血清蛋白电泳的基本操作过程有哪些~

　　【 操作步骤】
　　1. 点样 将醋酸纤维薄膜 (2.5cm×8cm) 一条，浸于巴比妥缓冲液，待完全浸透后，取出轻轻夹于滤纸中，吸去多余的溶液，再于薄膜的无光泽面的一端 2.0cm 处，用小玻片蘸取少许血清，垂直印于膜上，待血清渗入薄膜后，以无光泽面向下，两端用数层浸湿的滤纸 ( 或纱布 ) 贴紧，加盖，平衡 2 ～ 3min ，然后通电。
　　2. 通电 一般电压用 110 ～ 140V ，电流约 0.4 ～ 0.6mA / cm ，时间 45 ～ 60min 。
　　3. 染色 关闭电源后立即将膜取出，放入染色液中浸染 2 ～ 3min ，然后移入漂洗液中漂洗数次，至蛋白条带清晰，背景无色为止。
　　4. 定量 取试管 6 支，编号依次为 0 (空白)、 A 、 α1 、 α2 、 β 、 γ ，将电泳图谱亦按 A 、 α1 、 α2 、 β 、 γ 蛋白区带剪开，分别装入相应号码试管中。再在图谱两端无蛋白部位剪一条宽约 α1 带的空白带放入空白管中。各管中加 0.4mol/L NaOH 4ml ，振摇数次，使染料色泽浸出， 30min 后，在 620nm 波长下进行比色，以空白管校正零点，读取清蛋白及 α1 、 α2 、 β 及 γ 球蛋白各管的吸光度。

生化标记主要包括同工酶和等位酶标记。同工酶是指一个以上基因座位编码的酶的不同形式，而等位酶是指由一个基因座位的不同等位基因编码的酶的不同分子形式。

DNA电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳，电泳的驱动力靠DNA骨架本身的负电荷。

蛋白质电泳（一般指SDS-PAGE）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。

所以相同点就是样品都是带负电荷的，从负极向正极移动，移动的距离都和样品的分子量有关。而且这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时，可以考虑换用琼脂糖凝胶，因为该体系孔径大。相反，如果需要精确到各位数碱基的DNA电泳也可以使用聚丙烯酰胺凝胶系统，因为使用该系统可以将相差一个碱基的两条DNA链分开。

不同点首先是样品不同。这个就不用多说了。其次是结果的观察方法不同。DNA电泳普遍使用EB做染料，在紫外灯下观察；而蛋白电泳使用的考马斯亮蓝染色，还需要经过脱色步骤，不过观察起来比较简单。还有就是胶体系的差别，DNA电泳通常是一胶跑到底，而蛋白质电泳则会有分离胶和浓缩胶之区别。

先说这么多，有不明白的你再问好了～

回答补充：
电泳中样品移动的本质确实是样品所携带的电荷。但是，区分这些条带直接可以用分子量而无需使用电荷数，是因为这些样品的电荷/分子量比都是恒定的了。以DNA分子为例，它在电泳中的移动是靠其骨架中磷酸所携带的负电荷来实现的，而这个磷酸分子又是每一个核苷酸中都有的，所以DNA分子所携带的负电荷数是由其核苷酸总数决定的。而且，DNA分子中核苷酸的组成动辄成百上千，在如此大的分子量面前，讨论单个核苷酸之间分子量的差别就显得毫无意义。这样，DNA分子中负电荷的量就可以用DNA的分子量来代替，反过来，DNA的分子量也就可以用DNA分子所携带的电荷来代替（一句话，DNA分子的电荷/分子量比是恒定的）。

这在蛋白电泳中（特别是SDS-PAGE中）是一样的。在SDS-PAGE中，SDS将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上，使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例，剩下的就和核酸电泳一样了。

至于为什么核酸的横着跑，蛋白竖着跑，个人认为最大的问题是蛋白制胶的过程导致的。蛋白制胶由于使用了两种不同的凝胶系统，所以需要一个水平的分界面。这个分界面在配胶的过程中是依靠异丙醇在重力作用下的压力下形成的。所以，一并就竖着跑了～～

DNA电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳，电泳的驱动力靠DNA骨架本身的负电荷。
蛋白质电泳（一般指SDS-PAGE）一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。
所以相同点就是样品都是带负电荷的，从负极向正极移动，移动的距离都和样品的分子量有关。而且这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时，可以考虑换用琼脂糖凝胶，因为该体系孔径大。相反，如果需要精确到各位数碱基的DNA电泳也可以使用聚丙烯酰胺凝胶系统，因为使用该系统可以将相差一个碱基的两条DNA链分开。
不同点首先是样品不同。这个就不用多说了。其次是结果的观察方法不同。DNA电泳普遍使用EB做染料，在紫外灯下观察；而蛋白电泳使用的考马斯亮蓝染色，还需要经过脱色步骤，不过观察起来比较简单。还有就是胶体系的差别，DNA电泳通常是一胶跑到底，而蛋白质电泳则会有分离胶和浓缩胶之区别。
先说这么多，有不明白的你再问好了～
回答补充：
电泳中样品移动的本质确实是样品所携带的电荷。但是，区分这些条带直接可以用分子量而无需使用电荷数，是因为这些样品的电荷/分子量比都是恒定的了。以DNA分子为例，它在电泳中的移动是靠其骨架中磷酸所携带的负电荷来实现的，而这个磷酸分子又是每一个核苷酸中都有的，所以DNA分子所携带的负电荷数是由其核苷酸总数决定的。而且，DNA分子中核苷酸的组成动辄成百上千，在如此大的分子量面前，讨论单个核苷酸之间分子量的差别就显得毫无意义。这样，DNA分子中负电荷的量就可以用DNA的分子量来代替，反过来，DNA的分子量也就可以用DNA分子所携带的电荷来代替（一句话，DNA分子的电荷/分子量比是恒定的）。
这在蛋白电泳中（特别是SDS-PAGE中）是一样的。在SDS-PAGE中，SDS将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上，使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例，剩下的就和核酸电泳一样了。
至于为什么核酸的横着跑，蛋白竖着跑，个人认为最大的问题是蛋白制胶的过程导致的。蛋白制胶由于使用了两种不同的凝胶系统，所以需要一个水平的分界面。这个分界面在配胶的过程中是依靠异丙醇在重力作用下的压力下形成的。所以，一并就竖着跑了～～

首先，同工酶电泳本质上就是蛋白质电泳，和普通蛋白质电泳一样是利用蛋白质分子的电性，粒子大小等特性将不同种类蛋白分离。
区别在于，同工酶电泳因为电泳的是酶，可以利用酶催化底物反应的原理在电泳结束后进行染色，在染色液中加入底物和酶活性所需的因子，通过酶促反应生成有色物，显示酶带。
而普通的蛋白电泳染色只能靠考马斯亮蓝之类通用的染料显现条带

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高碑店市19863598322： 血清同工酶电泳与蛋白质电泳有何区别与联系 - ？
占吉安内： 首先,同工酶电泳本质上就是蛋白质电泳,和普通蛋白质电泳一样是利用蛋白质分子的电性,粒子大小等特性将不同种类蛋白分离. 区别在于,同工酶电泳因为电泳的是酶,可以利用酶催化底物反应的原理在电泳结束后进行染色,在染色液中加入底物和酶活性所需的因子,通过酶促反应生成有色物,显示酶带. 而普通的蛋白电泳染色只能靠考马斯亮蓝之类通用的染料显现条带

高碑店市19863598322： LD电泳和普通蛋白质电泳的区别. - ？
占吉安内： LD同工酶琼脂糖凝胶电泳1.原理:LD同工酶在一定的电泳条件下在支持物上被分离后,以乳酸钠为底物,NAD+作受氢体,LD催化乳酸脱氢生成丙酮酸,同时使NAD+还原成NADH,NADH将氢传递给酚嗪二甲酯硫酸盐(PMS),PMS又将氢传递...

高碑店市19863598322： 血清蛋白区带电泳是什么样的分析方法呢? ？
占吉安内： 蛋白质区带电泳是血清蛋白的经典分析方法,血清(或尿液)标本中不同性质的蛋白质可明显分开形成不同的区带,通过正常的电流图谱进行比较分析,很容易发现患者电...

高碑店市19863598322： 什么是同工酶?为什么可以用电泳法对同工酶进行分离 - ？
占吉安内： 同工酶是催化的化学反应相同而理化性质、免疫学活性都不同的一组酶. LDH(乳酸脱氢酶)是具有代表性的同工酶,LDH有5型,都由M和H构成,只是比例不同. 电泳的原理是在同一PH的缓冲液中,由于蛋白质分子量和表面所带电荷不同,其等电点也不同,故在电场中移动的速率不同而使蛋白质分离.由于同工酶理化性质、免疫学活性都不同,因此可以用电泳法分离.

高碑店市19863598322： 为什么要用血清而不用血浆作蛋白质电泳??? - ？
占吉安内： 由于血浆脂蛋白表面电荷量大小不同,在电场中,其迁移速率也不同,从而将血浆脂蛋白分为乳糜微粒、β-脂蛋白、前β-脂蛋白和α-脂蛋白等四种. α-脂蛋白中蛋白质含量最高,在电场作用下,电荷量大,分子量小,电泳速度最快,电泳在相当于α1球蛋白的位置. cm的蛋白质含??量很低,98%是不带电荷的脂类,特别是三酯含量最高.在电场中几乎不移动,所以停留在原点.为了取样方便,多以血清代替血浆.正常人空腹血清在一般电泳谱上无乳糜微粒.

高碑店市19863598322： 如何做血清蛋白及蛋白电泳检查? ？
占吉安内： 正常人血清总蛋白(TP)为 60〜80克/升,白蛋白(A)为35〜55克/升,球蛋甶(G)为20〜30 克/升,白蛋白/球蛋白比值为1.5〜2.5.将血清点在醋酸 纤维素薄膜上,通...

高碑店市19863598322： 同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳和分离核酸的电泳有什么差别 - ？
占吉安内： 一般来说分离蛋白质的电泳用的是聚丙烯酰胺凝胶,分离核酸用的是琼脂糖凝胶,但也有用聚丙烯酰胺的,两个介质分离的分子量范围有所不同

高碑店市19863598322： 电泳分类及其用途 - ？
占吉安内： 溶液中带电粒子(离子)在电场中移动的现象.利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术.1937 年瑞典学者 A.W.K.蒂塞利乌斯设计制造了移动界面电泳仪 ,分离了马血清白蛋白的3种球蛋白,创建了电泳技术. 在确...

高碑店市19863598322： 为什么通过电泳技术可以将血清蛋白质分离 - ？
占吉安内： 电泳法是基于蛋白质具有不同的分子量、带有不同的电荷、不同的等电点等特点,将不同蛋白质加以分离,常见的有聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS—PAGE、等电聚焦等,就看楼主你具体选择哪种电泳.不过常见的是基于蛋白分子量的不同,加以分离,蛋白分子量大的话,电泳的时候移动得慢,反之则快,经过一段时间的电泳,分子量不同的蛋白质就分成不同的条带了.

高碑店市19863598322： 血清蛋白电泳(关于血清蛋白电泳的基本详情介绍) ？
占吉安内： 1、血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis,SPE)作为种蛋白质的分析技术.2、蛋白电泳可将血清蛋白分为白蛋白、α?-球蛋白、α?-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带,每个区带含有种或多种蛋白成分,各区带的变化与疾病间有密切关系.3、血清蛋白电泳(serum protein electrophoresis,SPE)作为种蛋白质的分析技术.4、蛋白电泳可将血清蛋白分为白蛋白、α?-球蛋白、α?-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带,每个区带含有种或多种蛋白成分,各区带的变化与疾病间有密切关系.