如何测葡萄糖的含量？

如何测定葡萄中的葡萄糖含量~

　　葡萄糖氧化酶法。
　　1．原理
　　葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质，该有色物质在625 nm波长下与葡萄糖浓度成正比。通过侧定蓝色物质的吸光度值可计算样品中葡萄糖的含量。
　　2．仪器
　　①实验室常用设备。
　　②722型分光光度计。
　　3．试剂
　　除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。
　　①三氯乙酸(40％)：称取4．0 g三氯乙酸，用水溶解并稀释至100 mL。
　　②无水乙醇。
　　③2 mol·L-1NaOH溶液：称取8 g NaOH，用水溶解并稀释至100 mL。④1％邻联甲苯胺溶液：称取0．1 g邻联甲苯胺溶解于10 mL无水乙醇中，倒人棕色瓶中，4℃冰箱保存。
　　⑤乙酸缓冲液(pH5．O)：称取14．28 g乙酸钠(CH。COONa．3H20)溶于水中，加入2．7mL冰乙酸，使pH为5．O，用水定容至1L。
　　⑥葡萄糖氧化酶溶液：称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma公司)用水溶解，使酶含量为100U／mL。4℃冰箱保存一周。
　　⑦过氧化物酶溶液：0．010 g辣根过氧化物酶溶于10 mL7J(~，4℃冰箱保存一周。
　　⑧酶溶液：取100 mL乙酸缓冲液，分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各l mL，混匀。4℃冰箱可保存7周。
　　⑨酶空白液：取100 mI。乙酸缓冲液，分别加人邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各l mL，混匀。4℃冰箱保存1周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶)
　　⑩葡萄糖标准液：将葡萄糖标准品(纯度大于99％)于80℃干燥至恒量。精确称取O·050 g，用水移人100 mL容量瓶中，定容至刻度线。此标准液相当于浓度为0．5 mg．mI。_。。
　　4．操作步骤
　　①样品处理
　　a．固体样品：称取0．5～5 g已粉碎的样品于锥形瓶中，加入50 mL水后沸水浴15 min。冷却后，转移至100 mL容量瓶中并用水定容至刻度，反复摇动混匀样品，过滤，弃初始几滴滤液。收集滤液，如果滤液澄清，可直接用于测定或稀释后用于测定。如果滤液浑浊，吸取20mL滤液转移至另一容量瓶中，加人无水乙醇至刻度。混合后静置至少30 min，过滤，滤液用于测定。
　　b·液体样品或少糖、淀粉等碳水化合物水解液：吸取2～10 mL样品或水解液，加入4倍
　　量无水乙醇(使乙醇最终浓度为80％，以沉淀不溶性多糖和部分蛋白质)，混合。静置至少30
　　min，过滤后滤液定容备用(如果过滤后滤液仍浑浊，或样液体积过少，可于3 000 r／min离心15
　　min，上清液备用)。
　　c．新鲜牛乳等样品：吸取0．5～2 mL样品，用水稀释，加入3 mL 40％三氯乙酸溶液(用于沉淀蛋白质)，用水定容至100 mL，过滤。吸取5 mL滤液，用2 m01．L一，NaOH调节pH至中性，用水定容至i0 mL，备用。
　　②测定
　　a-标准空白管的制备：在试管中加入0．5 mL水和5 mL酶溶液。
　　b·标准管的制备：5支试管中先分别加入葡萄糖标准液0．1、0．2、0．3、0．4、0．5 mL，再分别加入水0．4、0．3、0．2、0．1．0．0 mL，最后各加入酶溶液5 mL。
　　c·样品空白管的制备：在试管中加人0．5 mI。样品提取液和5 mI。酶空白液。
　　d·样品测定管的制备：在试管中加人0．5 mL样品提取液和5 mL酶溶液。
　　将上述各试管中溶液混合后于37℃水浴反应15 rain，625nm测定吸光度值。(注意：反应时间应严格控制，因葡萄糖与酶溶液的成色反应与反应时间密切相关，
　　5．计算
　　根据吸光度值求出葡萄糖标准曲线的回归方程，采用插入法求出测定管中葡萄糖含量，再根据稀释定容体积和称样量，计算出样品中葡萄糖含量。
　　6．说明
　　①此法适用于谷类、乳类、饮料、酒类等食品样品和血液样品。检出量为0．02 mg。
　　②此方法中的酶溶液只能和葡萄糖反应，特异性强，灵敏度高。
　　③如果样品提取液为无色，不需做样品空白。有色样品或样品提取液浑浊，则应做样品空白以减少干扰。

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这道题你说的太不清楚了 我不知道你所说的葡萄糖是不是已经溶于水还是固体呀 在分析化学中只要将葡糖糖放在干燥箱中干燥 然后用分析天平就能非常准确的测出葡萄糖的含量呀 在实验中都是这样做的 分析天平可以保留到小数点后的四位

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南宫市18281223590： 葡萄糖含量的测定方法? - ？
夏逄洛意： 1、如果糖样中没有别的带醛基的有机物,可以用DNS法测还原糖. 2、如果糖样中有别的带醛基的有机物,可以考虑采用高效液相色谱法(HPLC). 3、其它也有一些方法,比如碘量法等.

南宫市18281223590： 如何测定葡萄糖含量 - ？
夏逄洛意： 可以通过以下方法测量葡萄糖含量: 1、如果糖样中没有别的带醛基的有机物,可以用DNS法测还原糖. 2、如果糖样中有别的带醛基的有机物,可以考虑采用高效液相色谱法(HPLC). 3、其它也有一些方法,比如碘量法等.

南宫市18281223590： 检验葡萄糖的方法 - ？
夏逄洛意：[答案] (1)在试管中加入几毫升10%NaOH溶液,滴加5%的CuSO4溶液4-5 滴,可看到蓝色沉淀现象. (2)立即加入适量的待测溶液,在酒精灯上加热至沸,观察到产生红色沉淀现象,即可证明含有葡萄糖.

南宫市18281223590： 如何测葡萄糖的含量? - ？
夏逄洛意：[答案] 这道题你说的太不清楚了 我不知道你所说的葡萄糖是不是已经溶于水还是固体呀 在分析化学中只要将葡糖糖放在干燥箱中干燥 然后用分析天平就能非常准确的测出葡萄糖的含量呀 在实验中都是这样做的 分析天平可以保留到小数点后的四位

南宫市18281223590： 葡萄糖的检测方法? - ？
夏逄洛意： 浙大哲博化工的普通实验课程采用葡萄糖的还原性来检测,比如它可以还原碱性铜配合物,得到砖红色的物质,也可以用葡萄糖氧化酶试纸,用点化学仪器检测,灵敏度更高,干扰小,常常用来检测血糖尿糖等

南宫市18281223590： 碘量法测定葡萄糖含量实验步骤 - ？
夏逄洛意：[答案] 碘有氧化性,葡萄糖有还原性,二者可发生反应,淀粉遇碘变成蓝色,可用淀粉做指示剂. 1. 1%淀粉溶液的配制 称取1g可溶性淀粉,倒入小烧杯中,先加入10mL蒸馏水调匀,然后加90mL蒸馏水煮沸,边煮边搅,使其呈透明状为止,冷却后转入100...

南宫市18281223590： 葡萄糖含量的测定 方法有哪些啊 越多越好 谢谢哈 - ？
夏逄洛意： 银镜反应[氢氧化二氨合银Ag(NH3)2OH] 与氧气在加热、铜或银催化的条件下反应 婓林试剂 以上是检验的方法,定量的话用分析化学的方法,可以是滴定、光谱等

南宫市18281223590： 如何用分光光度计测葡萄糖浓度,一天内可以测完的,1 - ？
夏逄洛意：[答案] 先用标准葡萄糖试剂(可在试剂门市部买到),用蒸馏水配成已知的标准溶液(一般配0.5%、1%、3%、5%、7%五个浓度的溶液即可),分别在分光光度计上(最好465微米处)测定光密度(吸光度).以光密度为横坐标,浓度(%)为纵坐标,在...