做植物组织培养培养基定容时水加多了,分装,灭菌后,培养基凝固,这样的培养基接种后会不会有什么影响?
主要跟你灭菌的温度和时间有关
时间不能太长,一般12分钟就行了!
灭菌温度过高容易使糖类物质碳化!
植物组织培养的流程:
第一步,将采来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,如用适当的刷子等刷洗。把材料切割成适当大小,即灭菌容器能放入为宜。置自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而宜。易漂浮或细小的材料,可装入纱布袋内冲洗。
流水冲洗在污染严重时特别有用。洗时可加入洗衣粉清洗,然后再用自来水冲净洗衣粉水。洗衣粉可除去轻度附着在植物表面的污物,除去脂质性的物质,便于灭菌液的直接接触。当然,最理想的清洗物质是表面活性物质—吐温。
第二步是对材料的表面浸润灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、无菌水、手表等。用70%酒精浸10~30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸湿的作用,加之70%酒精穿透力强,也很易杀伤植物细胞,所以浸润时间不能过长。
有一些特殊的材料,如果实、花蕾、包有苞片、苞叶等的孕穗,多层鳞片的休眠芽等等,以及主要取用内部的材料,则可只用70%酒精处理稍长的时间。处理完的材料在无菌条件下,待酒精蒸发后再剥除外层,取用内部材料。
第三步是用灭菌剂处理。表面灭菌剂的种类较多,可根据情况选取1~2种使用见表。第四步是用无菌水涮洗,涮洗要每次3min左右,视采用的消毒液种类,涮洗3~10次左右。
无菌水涮洗作用是免除消毒剂杀伤植物细胞的副作用注意:①酒精渗透性强,幼嫩材料易在酒精中失绿,所以浸泡时间要短,防止酒精杀死植物细胞。②老熟材料,特别是种子等可以在酒精中浸泡时间长一些,如种子可以浸泡5分钟。③升汞的渗透力弱,一般浸泡10分钟左右,对植物材料的杀伤力不大。④漂白粉容易导致植物材料失绿,所以对于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入浓度为0.08~0.12%的吐温20或80(一种湿润剂),可以降低植物材料表面的张力,达到更好的消毒效果。
扩展资料培养材料采集:
要根据培养目的适当选取材料,选择原则:易于诱导、带菌少。要选取植物组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料,不要取有伤口的或有病虫的材料。另一方面要在晴天,最好是中午或下午取材料,决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合作用、呼吸作用旺盛的组织,有自身消毒作用,这种组织一般是无菌的。
培养材料的消毒:
从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基,便会造成培养基污染。因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作手续接到培养基上。
参考资料:植物组织培养_百度百科
植物组织培养用什么培养基植物组织培养除了MS培养基
用于植物组织培养的培养基MS是最优的了 其它培养基也有用的 但较少。B5培养基:B5培养基的主要特点是含有较低的铵,这是因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用.经过试验发现,有些植物的愈伤组织和悬浮培养物在MS培养基上生长得比B5培养基上要好,而另一些植物,在B5培养基上更适宜.N6培养基:N6...
植物组织培养液体培养基的成分
植物组织培养液体培养基的成分 植物组织培养基的成分主要是水,蔗糖,矿质营养-无机盐,植物激素和琼脂等.通常属于固态培养基.动物细胞培养液是液态培养基,主要成分是水,糖类-葡萄糖,无机盐,生长因子和动物血清等.动物血清可以提供现在还不知道的必不可少的营养物质.另外它们的无机盐的成分浓度等不一样.
组培植物的培养基
组织培养的基质。由细胞生长发育所必需的各种无机盐(大量的微量元素)、有机营养物(氨基酸和糖类)、生物活性物质(维生素类)、植物生长调节物质(、细胞分裂素、等)、天然提取物(椰子乳和酵母提取物等)和水所组成。也可在培养基中加入琼脂使之成为凝胶态的固体培养基。培养基的成分随培养物和培养...
植物组培需要哪些培养基
植物组培常用培养基如下 MS(Murashige & Skoog)培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度,对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有利。MS固体培养基可用来诱导愈伤组织,或用于胚、茎段、茎尖及花药培养,它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。B5培养基的主要...
植物组织培养
植物组织培养是一种在实验室环境下对植物组织或细胞进行繁殖和培育的技术。该技术的主要流程包括外植体的选取、脱分化形成愈伤组织、细胞分裂和分化以及试管苗的培育等步骤。植物组织培养利用特定的培养基、光照、温度和湿度等环境,使植物细胞或组织在人工条件下不断增殖,并培育出完整的植株。这一过程通常在...
植物组织培养,中分化培养基和诱导培养基都是固体培养基吗?
植物组织培养采用固体培养基,一般采用浅层震荡培养。便于观察培养物,移动方便,固体培养可以避免液体培养产生玻璃花趋向。分化培养基和诱导培养基的作用:诱导培养基添加必要的成分使组织切块或细胞形成愈伤组织,分化培养基指把促使愈伤组织细胞恢复全能性,可以进行正常的根茎叶的形成。诱导培养基添加必要的...
植物组织培养需要更换培养基吗
需要更换 1、根据培养阶段更换培养基。如愈伤组织诱导培养基、继代培养基、筛选、静息、分化、生根壮苗等。2、根据培养物生长状态更换。如有些外植体在培养过程中会产生毒害自身的物质、培养基营养不充足了等情况,需要定期更换培养基,以免影响培养物生长状态。3、发生染菌时视情况更换培养基。如染细菌,...
植物组织培养技术培养基组成
(1)植物组织培养技术依据的原理是植物细胞具有全能性,其培养基的主要成分有:大量元素、微量元素、有机物、植物激素和琼脂等.类型有:MS培养基、发芽培养基和生根培养基.配制好的培养基要进行 高压蒸汽灭菌.(2)菊花组织培养接种时:始终在酒精灯火焰旁进行,对接种工具要用火焰灼烧法灭菌.(3)...
植物组织培养基的成分
植物组织培养:1.培养基固体 培养基成分蔗糖、氨基酸、维生素、水、矿物质 2.植物组培的培养基中特有植物激素 动物细胞培养的培养基中特有动物血清。
植物组织培养基的组成成分有哪几种类型
植物组织培养培养基的五类成分 1.无机营养物 无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐...
全葛天麻: 会有影响
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养为什么不可用液体培养基? - ?
全葛天麻: 看你做什么组培了. 做植物细胞原生质培养的,也是用液体培养基的. 后期的无土栽培也是用液体培养基的. 像楼上说的,如果只是用作分化的培养,包括愈伤组织的培养,可能还是用固体培养的好,以前做的都没有用过液体,但是不排除一定不能用.
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养配置ms培养基的时候,激素(热稳定的)是加在琼脂前还是后,是在什么时候调节ph的 - ?
全葛天麻:[答案] 加在之前. 顺序是:少量蒸馏水→MS→激素→蔗糖→加水至体积线下100ml左右→调pH→加水定容到所需体积→加热至冒气泡→加琼脂→在加热至澄清(可不沸腾,只要澄清即可)→分装→灭菌 其他的有什么问题,可以再追问我的.我是做植物组培...
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养皿内有很多水珠是什么原因 - ?
全葛天麻: 一种原因是由于培养基较热时就密封盖板,导致水蒸气在盖板上凝结.另一种是由于组培室内温度偏高,培养基中水分蒸发导致.
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养中,pH值起什么作用作用,过高过低有什么后果 - ?
全葛天麻: 你应是个初学者,这些是组培最基本基础知识,pH就是酸碱度,过高或者过低,都会引起植物组织生长不良,另pH值,过高或过低,会造成培养基(琼脂或卡拉胶)过硬或过软(不能凝结),都会影响植物生长.
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养注意事项有哪些? - ?
全葛天麻: 植物组织培养包含的内容很多,看你的问题因该是宽泛的,一般来说应该注意 1、培养材料的选择,需要选择生长较好的材料 2、植物材料的灭菌,要根据不同的材料来确定,材料允许的话,可以设计实验取得最佳的灭菌处理 3、培养基的配置.要根据不同的材料,不同的物种,选择合适的培养基,最好有一组实验取得.做培养基的过程中注意调剂培养基的PH值,有些高温分解的激素要过滤灭菌等. 4、培养条件的选择,包括光照、温度、湿度等. 5、接种.注意灭菌,最好有超净工作台. 总的来说,组织培养需要较强的动手能力
富拉尔基区17871627208: 有关植物组织培养的问题 - ?
全葛天麻: 1.可以,不过得进行高压灭菌,才能防止染菌. 2.不行,整个的操作过程需要在无菌的条件下进行,自来水中有细菌等微生物,得用无菌水. 3.镊子,培养皿等一般在化学仪器试剂店里能买到.
富拉尔基区17871627208: MS培养基的配制与灭菌 - ?
全葛天麻: 植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基.MS培养基的配制包括以下步骤.培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或...
富拉尔基区17871627208: 植物组织培养技术在实验过程中要注意哪些条件? - ?
全葛天麻: 首先是外质体的灭菌.时间既不能太长也不能太短.太长会伤害植物组织,太短灭菌不完全.其次,操作用具要彻底灭菌.接种前接种人也要彻底灭菌.再次,培养基浓度要适宜...
富拉尔基区17871627208: 怎样做组织培养的培养基 - ?
全葛天麻: 通常做植物组培用到的基本培养基为MS培养基,成分我就不一一讲了,近二十种,分为大量元素、微量元素、铁盐、有机成分.只做一次的话就把药品按量添加在一起,经常做的话可以把各大类元素按20倍或200倍的量配制成母液,然后用移...