Tris-HCl和PBS缓冲液的区别和用途是什么?
两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。
PBS
溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。
Tris
受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种酶反应。
Tris-HCl和PBS缓冲液都是生物化学实验中常用的缓冲液,它们之间有一些区别和特定的用途。
Tris-HCl缓冲液是由三羟甲基氨基甲烷(Tris)和盐酸配置而成的。它的pH缓冲范围一般在pH6.8-8.8之间,适用于分子克隆和细胞培养等实验。Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。例如,它被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,以及低离子强度特点用于线虫核纤层蛋白中间纤维的形成等。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,同时也是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。
PBS缓冲液则是一种pH7.4的磷酸盐缓冲液,与人体血液等渗,所以一般用于分子克隆及细胞培养实验。与Tris-HCl不同,PBS的pH值是固定的,不会随着温度的变化而变化。PBS缓冲液对实验中的一些生物化学反应影响很小,因此在许多生物化学实验中被广泛使用。
Tris-HCl和PBS缓冲液的主要区别在于它们的成分和用途上。Tris-HCl缓冲液具有更多的用途,而PBS缓冲液则更常用于生物化学实验中。在选择使用缓冲液时,需要根据实验的具体条件和需求进行选择。
Tris-HCl和PBS缓冲液在生物化学实验中都是常用的缓冲液,它们在成分、pH缓冲范围和用途上存在一些差异。
成分:Tris-HCl缓冲液由三羟甲基氨基甲烷(Tris)和盐酸配置而成。而PBS缓冲液则是一种pH7.4的磷酸盐缓冲液,与人体血液等渗。
pH缓冲范围:Tris-HCl的pH缓冲范围通常在pH6.8-8.8之间,这使得它在分子克隆和细胞培养等实验中非常有用。而PBS的pH值是固定的,为7.4,并且不会因为温度的变化而变化。这种稳定性使得PBS在某些对pH敏感的生物化学反应中非常有用。
用途:Tris-HCl缓冲液被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,它也被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,以及低离子强度特点用于线虫核纤层蛋白中间纤维的形成等。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。而PBS缓冲液主要用于分子克隆及细胞培养实验,它对实验中的一些生物化学反应影响很小,因此在许多生物化学实验中被广泛使用。
Tris-HCl和PBS缓冲液的主要区别在于它们的成分、pH缓冲范围和用途。Tris-HCl的pH缓冲范围较宽,主要用于分子克隆、细胞培养、蛋白质晶体生长等实验;而PBS的pH值稳定,主要用于对pH敏感的生物化学反应、分子克隆及细胞培养实验等。在具体实验中应根据实验需求和条件来选择使用哪种缓冲液。
两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。
PBS
溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。
Tris
受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种酶反应。
两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。 PBS 溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。 Tris 受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种酶反应。
RNA提取试剂盒的制作
9 i) @ a' \\& w+ c p* g4、 提取缓冲液(DEPC水处理):2% CTAB(蛋白质变性剂).2% PVPK 30(去除多酚类物质)10 0m M Tris-HCL (Ph8.0)25 m M EDTA(金属鳌合剂)2.0 M NaCL(去除多糖和CTAB)配法:2 g CTAB, 2 g PVP, 10 mL 1 mol\/L tris, 5mL 500 mM EDTA, 11.7gNaCL,定容到100mL。
琦和平坦: 两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的.PBS溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等.Tris受缓冲液的浓度和使用温度的影响.可以参与多种酶反应.
盐山县17189084563: PBS和Tris - HCl的区别和联系 用途 谢!?
琦和平坦: PBS是pH7.4的磷酸盐缓冲液,PH是固定的,与人体血液等渗,所以一般用于分子克隆及细胞培养实验. Tris-HCl是用三羟甲基氨基甲烷和盐酸配置,然后可以调节PH,各PH段都有用到,我们做蛋白实验用的较多的是PH6.8和PH8.8的,一般实...
盐山县17189084563: 求助,Tris - HCl和PBS及柠檬酸盐缓冲液的区别和用途 - ?
琦和平坦: 枸橼酸就是柠檬酸,叫法不同而已.没有区别的,只是一些书上习惯用枸橼酸盐缓冲溶液的称谓.当然,柠檬酸缓冲溶液的配制考虑两个因素:指定的PH值是什么?在指定PH值下,柠檬酸及其盐的总浓度是多大.因为PH值不同,则共轭酸碱对的摩尔比是不同的,而PH值相同,摩尔比相同,但总浓度不同时,缓冲能力也是不同的. 这是配制时要确定的两个指标.
盐山县17189084563: 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白 分离胶和浓缩胶中缓冲液的组分,pH值异同?它们与电极缓冲液有区别 - ?
琦和平坦: 分离胶是下层胶,其中的缓冲液为pH8.8的Tris-HCl. 浓缩胶是上层胶,其中的缓冲液为pH6.8的Tris-HCl. 电泳缓冲液为Tris、glycine和SDS配制,只要用规定质量的粉末配制,就不用调pH.
盐山县17189084563: 测肌动球蛋白的表面活性,文献大都采用磷酸盐缓冲液,请问可以用Tris - HCl代替吗? - ?
琦和平坦: 这种测蛋白的表面活性的实验还是按照参考文献走吧,如果没有文献证实是可以取代的,最好不要去替换,因为磷酸盐缓冲液和Tris-HCl的物质组成是有区别的,Tris-HCl缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;同时其温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大. Tris-HCl实际上是三羟甲基氨基甲烷盐酸盐,由于Tris,也就是三羟甲基氨基甲烷,她里面一个氨基,由于氨基也是一个配位基团,因而它有可能取代原来的络合物中的配体,从而使络合物发生变化,影响吸光度,若要知道会不会有这方面的影响,就要查的它们的配合常数.所以,对于科学试验中的方法要经过比较验证以后才能改进,否则的话可能产生错误的结果.
盐山县17189084563: 水饱和酚和Tris - HCl饱和酚有什么不同? - ?
琦和平坦: 水饱和酚和Tris饱和酚( Phenoi Water/Tris-phenol)的区别:一、水饱和酚又叫水平衡酚.水饱和酚的PH小于7,一般是PH为5.0左右,通常与异硫氢酸胍一起使用,用于细胞RNA的提取,在酸性环境中,DNA在酚相,RNA在水相.两者就分...
盐山县17189084563: 在保存或抽取DNA过程中,一般采用什么缓冲液? - ?
琦和平坦: 在基因操作实验中,选择缓冲液的主要原则是考虑DNA的稳定性及缓冲液成分不产生干扰作用.磷酸盐缓冲系统(pKa=7.2)和硼酸系统(pKa=9.24)等虽然也都符合细胞内环境的生理范围,可作DNA的保存液,但在转化实验时,磷酸根离子的种类及数量将与Ca2+产生Ca3(PO4)2沉 淀;在DNA反应时,不同的酶对辅助因子的种类及数量要求不同,有的要求高离子浓度,有的则要求低盐浓度,采用Tris-HCL(pKa=8.0)的缓冲 系统,由于缓冲液是TrisH+/Tris,不存在金属离子的干扰作用,故在提取或保存DNA时,大都采用Tris-HCL系统,而TE缓冲液中的 EDTA更能稳定DNA的活性.
盐山县17189084563: 聚丙烯酰氨凝胶电泳的常见问题 - ?
琦和平坦: ⒈ 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在...
盐山县17189084563: 【求助】PB缓冲溶液与PBS缓冲溶液有什么区别呀 - ?
琦和平坦: PB是磷酸盐缓冲液,PBS是磷酸盐缓冲生理盐水.PB就是磷酸二氢钠和磷酸氢二钠按一定比例混合成的磷酸缓冲液,PBS在PB的基础上还加入NaCl.