高效液相色谱法中峰面积和什么线性相关

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求助:关于高效液相色谱法含量计算公式的理解~

  关于高效液相色谱法含量计算公式的理解
  含量方法学认证主要考察以下几个性质:
  1专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应。
  考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照,包括流动相、辅料空白、溶剂空白、其他成分(多组分产品)空白、如果方法有衍生还应包括衍生空白等等。
  2精密度:查看方法多次测定是否能够得到相同的结果。
  考察方法:重复性试验,应包括仪器精密度(对照多次进样查看偏差),方法精密度(多次测定同一样品查看结果,该测定应包含全部试验过程,即配制多个供试品溶液),中间精密度(不同人员不同时间不同仪器,最好试剂和实验室也更换,测定同一样品,查看结果偏差)。RSD应小于2%
  3准确度:测得结果与实际量间是否一致。
  考察方法:通过回收率试验来确定,应包含3个浓度至少9个样品的测定结果,测定时应采取对照品(或原料)加辅料等其他干扰,计算回收率和结果偏差。视方法而定一般回收率应在95~105%,RSD小于2%
  4线性:在线性范围内,测得峰面积与被测物质的量是否能够呈线性关系。
  考察方法:线性试验,应取至少5个浓度点,绘制标准曲线,计算线性相关系数,液相色谱法中一般认为R=0.9999以上才能算呈线性。
  5定量限:当物质达到定量限浓度以上时,该方法可以对该物质进行定量检测。
  考察方法:当被测物峰高:信号噪音=10:1时,当前浓度即为定量限。如果想做更加可靠的实验,应在定量限处考察精密度和回收率。
  6耐用性:方法对实验环境的耐受程度。即当实验条件发生细微变化时,方法仍然能够保持测定的准确。
  考察方法:通过几项实验来确定:溶液稳定性(相同溶液在几小时内多次进样查看结果),色谱条件变化(应包括柱温、流速、色谱柱批次、检测波长等条件的轻微变化)。

线性与范围一般都是同时做出来的。范围是考查在某一个浓度或峰高(面积)情况下进行样品分析是准确的。而准确的概念就是要成线性,换句话说,在这个范围内,你的样品面积要与浓度成正比,即符合朗伯比尔定律(紫外检测器,其它检测器也是相近的规律)。这样,在这个范围内浓度与面积成正比,分析结果才是准确的。

样品的浓度。

两者呈正比关系,就是浓度越高,峰面积越大。比如下图就是一个线性关系图,纵轴是峰面积,横轴是浓度。




从江县15988497925: 做高效液相色谱时用峰面积和用峰高那个计算含量高?为什么? -
郯娇益心: 柱效不同,峰高相差较大,不同极性的物质,峰型差的也会很多,但这些不同往往对峰面积为的影响不大,对峰高影响很大,所以用峰面积比用峰高好

从江县15988497925: 求助:关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 -
郯娇益心: 关于高效液相色谱法含量计算公式的理解 含量方法学认证主要考察以下几个性质: 1专属性:查看被测物质与被测结果间是否正确且唯一对应. 考察方法:将处被测成分外的其他物质均做空白干扰对照,包括流动相、辅料空白、溶剂空白、...

从江县15988497925: 高效液相色谱法检测含量时峰面积一般是什么单位啊 -
郯娇益心: 峰面积是不需要单位的,在进行含量测定计算结果时,供试品的峰面积和对照品的峰面积分别作为分子和分母,有没有单位无关紧要,不影响含量测定结果的计算.

从江县15988497925: 液相色谱峰面积与什么有关 -
郯娇益心: 峰面积与样品量、仪器衰减、量程等因素有关.你上“色谱世界”网站全看看吧,这个网站在色谱方面非常专业.

从江县15988497925: 高效液相色谱仪标准曲线怎么做 -
郯娇益心: 在色谱中,峰面积和浓度是成正比的.标准曲线就是一条横轴是浓度,纵轴是峰面积的曲线.做标准曲线首先你的有标准物质,然后有一个曲线的浓度范围. 比如说,标准物质X,浓度是0.1mg/ml-2mg/ml.配制样品的时候,取X适量,配制成...

从江县15988497925: 高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么呢? -
郯娇益心:[答案] 峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确 峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min,AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确 峰面积比代...

从江县15988497925: 高效液相中 什么是峰面积归一化法?什么是峰面积归一化法? -
郯娇益心:[答案] 不知道什么叫高效液相 但是 峰面积归一法好像知道 恩 就是把峰面面积取做一 然后对应区间的面积是一个概率 即区间面积与总峰面面积之比 好像就这样 见笑了 好像没说清楚 ...

从江县15988497925: 高效液相色谱图中峰高、峰面积、峰面积比都是代表什么呢?谢谢! -
郯娇益心: 峰高指待测组分从柱后洗脱出最大浓度时检测器输出的信号值,单位一般为mAU,AU或mV,也可代表相对含量,但不如峰面积准确 峰面积指峰高与保留时间的积分值,单位一般相应为mAU*min, AU*min或mV*min,代表相对含量比较准确 峰面积比代表各物质的相对百分含量,单位一般为% 不知回答得满不满意

从江县15988497925: 高效液相色谱法的计算公式 -
郯娇益心: [编辑本段]测定方法定量测定时,可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法.但用归一法或内标法测定杂质总量时,须采用峰面积法. 面积归一化法测定供试品(或经衍生化处理的供试品)中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因...

从江县15988497925: 高效液相色谱仪做有关物质的检验时自身对照为何峰面积不成比例? -
郯娇益心: HPLC自身对照法做有关物质是最常用的方法,峰面积不成比例是指你的自身对照主峰与供试品主峰间的比例吗? 这种情况也很多见,主要看供试品浓度的设计是否超载,如果浓度过大,造成超载则跟自身对照不成线性,但是这并不影响你的定量计算,因为自身对照法的优点就是缩小了对照与杂质见的线性范围,也就是说自身对照的浓度及更低浓度物质间的线性范围.如果你要使呈线性,最简单的方法是减小供试品浓度

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