为什么制备固定化酶不宜用包埋法
包埋法适合固定化细胞。
由于酶的体积比较小(相对),包埋法中使用的载体所形成的孔道要比酶的体积要大,所以如果用包埋法的话酶很难固定在载体内,容易从包埋材料中漏出!
固定化酶的制备方法有物理法和化学法两大类。物理方法包括物理吸附法、包埋法等。物理法固定酶的优点在于酶不参加化学反应,整体结构保持不变,酶的催化活性得到很好保留。但是,由于包埋物或半透膜具有一定的空间或立体阻碍作用,因此对一些反应不适用。化学法包括结合法、交联法。结合法又分为离子结合法和共价结合法。是将酶通过化学键连接到天然的或合成的高分子载体上,使用偶联剂通过酶表面的基团将酶交联起来,而形成相对分子量更大、不溶性的固定化酶的方法.其中吸附法和共价键法又可统称为载体结合法。 吸附法利用各种吸附剂将酶或含酶菌体吸附在其表面上而使酶固定的方法。通常有物理吸附法和离子吸附法。常用吸附剂有活性炭、氧化铝、硅藻土、多孔陶瓷、多孔玻璃等。采用吸附法固定酶,其操作简便、条件温和,不会引起酶变性或失活,且载体廉价易得,可反复使用。载体结合法最常用的是共价结合法,即酶蛋白的非必需基团通过共价键和载体形成不可逆的连接。在温和的条件下能偶联的蛋白质基团包括:氨基、羧基、半胱氨酸的巯基、组氨酸的咪唑基、酪氨酸的酚基、丝氨酸和苏氨酸的羟基。参加和载体共价结合的基团,不能是酶表现活力所必需的基团。以中国首先采用的双功能团试剂“对位-β-硫酸酯乙砜基苯胺”偶联载体和酶为例,载体结合的步骤如下页反应式。此法曾先后用于3′-核糖核酸酶、5′-磷酸二酯酶和葡萄糖淀粉酶等的固定化。此外酶通过物理吸附或离子吸附于载体制备固定化酶也是常用的方法。交联法依靠双功能团试剂使酶分子之间发生交联凝集成网状结构,使之不溶于水从而形成固定化酶。常采用的双功能团试剂有戊二醛、顺丁烯二酸酐等。酶蛋白的游离氨基、酚基、咪唑基及巯基均可参与交联反应。包埋法 酶被裹在凝胶的细格子中或被半透性的聚合物膜包围而成为格子型和微胶囊型两种。包埋法制备固定化酶除包埋水溶性酶外还常包埋细胞,制成固定化细胞,例如可用明胶及戊二醛包埋具有青霉素酰化酶活力的菌体,可连续水解帤基青霉素,工业生产6-氨基青霉烷酸。酶经过固定化后,比较能耐受温度及pH的变化,最适pH往往稍有移位,对底物专一性没有任何改变,实际使用效率提高几十倍(如5′-磷酸二酯酶的工业应用)甚至几百倍(如青霉素酰化酶的工业应用)。 特点 吸附 共价链接 包埋 膜限制 制备 简单 难 难 简单 费用 低 高 中等 高 结合力 易变 强 弱 强 损失 有 无 有 无 适用性 广 有选择性 广 非常广 运转问题 高 低 高 高 基质效应 有 有 有 无 溶解度 无 无 有 有 抗微生物特性 无 无 有 有
1,酶的体积比较小,包埋法中使用的载体所形成的孔道要比酶的体积要大,所以如果用包埋法的话酶很难固定在载体内,容易从包埋材料中漏出。
2,包埋法适合固定化细胞。
3,固定化酶是用物理的或化学的方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的微囊体中制成的.酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用.便于运输和贮存,有利于自动化生产。
想具体了解一下固定化酶技术。朋友们帮帮忙。小女子不胜感激!
固定化酶的制备方法有物理法和化学法两大类。物理方法包括物理吸附法、包埋法等。物理法固定酶的优点在于酶不参加化学反应,整体结构保持不变,酶的催化活性得到很好保留。但是,由于包埋物或半透膜具有一定的空间或立体阻碍作用,因此对一些反应不适用。化学法是将酶通过化学键连接到天然的或合成的高分子载体...
毛细管固定化酶反应器制备方法
1、采用戊二醛键合的方法将神经氨酸酶固定在毛细管内壁,该固定化酶微反应器可连续使用1个月以上。2、酶的活性没有明显降低,大大增强了酶的稳定性,从而很大程度地降低了酶的用量。3、且分离时,酶微反应器固定在毛细管出口端,缩短了样品分离的有效长度,大大提高了分离效率。
包埋法制备固定化酶的外形特点
1. 包埋法的优点:反应条件温和,很少改变酶结构但是又较牢固的固定化方法。 包埋法的缺点:只有小分子底物和产物可以通过高聚物网架扩散,对那些底物和产物是大 2. 吸附法的优点:操作简单,可供选择的载体类型多,吸附过程可同时达到纯化和固化的目的,固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。 吸附法的缺点:...
戊二醛交联固定化酶的原理
戊二醛交联固定化酶的原理为学会交联法制备固定化酶的操作技术。制备固定化酶的方法很多,利用双功能试剂或多功能试剂在酶分子间,酶分子与惰性蛋白间,或酶分子与载体间进行交联反应,以共价键制备固定化酶的方法称为交联法,本实验即采用这种方法。交联剂为戊二醛,载体为甲壳素。
什么是固定化酶?有何优点
所谓固定化酶,是指在一定的空间范围内起催化作用,并能反复和连续使用的酶。通常酶催化反应都是在水溶液中进行的,而固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法处理,使之成为不溶于水的,但仍具有酶活性的状态。酶固定化后一般稳定性增加,易从反应系统中分离,且易于控制,能反复多次使用。便于运输和...
什么是固定化酶?酶固定化的方法有哪些
固定化酶是借助于物理和化学的方法吧酶束缚在一定的空间内并仍具有催化活性的酶制剂。 制备方法有:1、吸附法 是酶分子吸附于水不溶性的载体上,有物理吸附法及离子交换剂吸附法。 2、共价结合法 将酶通过花些反应以共价结合与载体的固定化方法......
1、简述酶工程的研究内容? 2、什么是固定化酶? 3、固定化酶和固定化...
固定化酶:固定化酶(immobilized enzyme),是用物理或化学方法处理水溶性的酶使之变成不溶于水或固定于固相载体的但仍具有酶活性的酶衍生物。固定化酶和固定化细胞的特点和优点各是什么?怎样制备 固定化酶的特点和优点:(1)同一批固定化酶能在工艺流程中重复多次地使用;(2)固定化后,和反应物...
把酶固定化有什么好处和用处?固定酶的方法有那些?
在生物反应器及操作方式上有较大的选择余地,除分批釜式反应外,可考虑用膜式反应器进行连续操作。在应用固定化酶为催化剂时,更可采用各种固定床和流化床的连续操作反应器。沿革 古代人类虽不知道酶的存在,但是自古以来就知道利用植物和微生物的酶来催化反应生产各种食品。如利用麦芽中的麦芽糖酶来制...
固定化酶是由谁提出来的,它具有什么样的意义? 狂帮帮忙啊………_百度...
固定化酶的制备方法有物理法和化学法两大类.物理方法包括物理吸附法、包埋法等.物理法固定酶的优点在于酶不参加化学反应,整体结构保持不变,酶的催化活性得到很好保留.但是,由于包埋物或半透膜具有一定的空间或立体阻碍作用,因此对一些反应不适用.化学法是将酶通过化学键连接到天然的或合成的高分子载体上,...
为什么固定化酶要洗去戊二醛
1、戊二醛具有较强的杀菌性和毒性,对固定化酶的活性和稳定性产生负面影响。2、戊二醛在制备固定化酶的过程中被用作交联剂,以固定酶和载体,过量的戊二醛残留会导致固定化酶活性下降。
边质伏立: 因为酶很小,是很容易从包埋材料中漏出来的
库车县15384497048: (2013•安庆二模)如图为制备固定化酵母细胞用于葡萄酒生产的流程图,请回答:(1)本实验采用的包埋法,而制备固定化酶则不宜用此方法,原因是_____... - ?
边质伏立:[答案] (1)固定化酵母细胞采用包埋法,酶分子很小,容易从包埋材料中漏出,不宜用此方法;CaCl2溶液处理让Ca2+与海藻酸钠反应形成不溶于水的海藻酸钙凝胶.(2)制备果醋的菌种是醋酸菌,属于好氧型细菌,需要持续通入无...
库车县15384497048: ...呈白色,则说明海藻酸浓度___(过低/过高).(6)此固定酵母细胞的方法是___,固定化酵母细胞的优点是___.(7)制备固定化酶则不宜用此方法,原因... - ?
边质伏立:[答案] (1)酵母菌在缺水状态下处于休眠状态.活化加入水使得酵母菌恢复正常的生活状态. (2)实验成败的关键是配制海藻酸钠溶... 固定化酵母细胞的优点是成本低、操作容易. (7)制备固定化酶则不宜用包埋法,是因为酶较小,容易从包埋材料中漏出. 故...
库车县15384497048: ...(4)观察形成凝胶珠的颜色和形状,如果颜色过浅,说明___,如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明___.(5)制备固定化酶不宜用包埋法,为什么... - ?
边质伏立:[答案] (1)酵母菌在缺水状态下处于休眠状态.活化加入水使得酵母菌恢复正常的生活状态,酵母细胞活化时体积会增大,则活化前应选择足够大的容器,以避免酵母菌溢出容器外.(2)实验成败的关键是配制海藻酸钠溶液,形成凝...
库车县15384497048: 制备固定化酵母细胞的实验步骤如下:酵母细胞的活化→配制CaCl 2 溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液 - ?
边质伏立: (1)缺水 正常的生活 体积增大 (2)配制海藻酸钠溶液 (3)少 (4)固定化酵母细胞数目较少 海藻酸钠浓度偏高,制作失败 (5)酶分子很小,容易从包埋材料中漏出
库车县15384497048: ...2 溶液中形成的凝胶珠颜色过浅,说明____.若凝胶珠不是圆形或椭圆形,其主要原因是____. (3)本实验所用的固定化技术是包埋法,而制备固定化酶则... - ?
边质伏立:[答案] (1)防止高温杀死酵母菌(2)固定化酵母细胞数目较少.海藻酸钠溶液浓度过高(3)酶分子很小,容易从包埋材料中漏出(4)能多次重复利用降低生产成本 本题考查微生物的培养和利用相关知识.在制备固定化酵母细胞采用的是包埋法,制备过程中...
库车县15384497048: 哪种酶固定方法不用包埋细胞 - ?
边质伏立:[答案] 包埋法适合固定化细胞. 由于酶的体积比较小(相对),包埋法中使用的载体所形成的孔道要比酶的体积要大,所以如果用包埋法的话酶很难固定在载体内,容易从包埋材料中漏出!
库车县15384497048: 书上说固定化细胞适合包埋法,而固定化酶适合物理吸附法或者是化学结合法,但是说酶有时候也可以用包埋法,为什么呢?酶怎么用包埋法呢? - ?
边质伏立:[答案] 小分子当然也可以用包埋法,只是效果不太好而已.
库车县15384497048: 下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是()A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固 - ?
边质伏立: A、固定化技术包括包埋法、物理吸附法和化学结合法(交联法),由于细胞相对于酶来说更大,难以被吸附或结合,因此多采用包埋法,A正确; B、某些反应产物可能与酶结合,致使酶的结构产生变化,从而改变酶的催化活性,B错误; C、固定化酶实质上是将相应酶固定在不溶于水的载体上,实现酶的反复利用,并提高酶稳定性,酶的各项特性(如高效性、专一性和作用条件的温和性)依然保持,C错误; D、固定化细胞在多步酶促反应中发挥连续催化作用,但如果反应底物是大分子物质,则难以自由通过细胞膜,从而限制固定化细胞的催化反应,D错误. 故选:A.
库车县15384497048: 固定化酶的方法? - ?
边质伏立: 固定化酶是借助于物理和化学的方法吧酶束缚在一定的空间内并仍具有催化活性的酶制剂. 制备方法有:1、吸附法 是酶分子吸附于水不溶性的载体上,有物理吸附法及离子交换剂吸附法. 2、共价结合法 将酶通过花些反应以共价结合与载体的固定化方法. 3、交联法 用多功能试剂与酶蛋白分子进行交联的一种方法.其基本原理是酶分子中有力的氨基、酚基及咪唑基均可与多功能试剂之间形成共价键,得到三相的交联网状结构. 4、包埋法 是将酶物理包埋在高聚物内的方法.