请问real-time方法在检测细胞的凋亡过程中，大概需要花费多少钱呢？
Real-time PCR中文译作“实时聚合酶链反应”，是一种最新发展的定量PCR技术。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物，一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据，建立实时扩增曲线，准确地确定CT值，从而根据CT值确定起始DNA拷贝数，做到了真正意义上的DNA定量，较以往常用的终点定量的方法更加准确。根据所使用的技术不同，荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。Real-time PCR所采用的专用PCR仪能够自动在每个循环的特定阶段对反应体系的荧光强度进行检测，实时的记录荧光强度的改变，从而对样品的浓度进行精确的定量。
RT-PCR是Reverse transcription PCR的简称，中文译作“逆转录聚合酶链反应”，是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。
Real time RT-PCR是将Real time-PCR的方法用于RT-PCR中，目的也是为了对样品浓度进行精确控制。
RT-PCR和Real time-PCR是没有必然联系的，两种技术可以一起使用，就是Real time RT-PCR；也可以单独使用。就是名称有点绕，逆转录PCR先出现，所以占用了RT-PCR这个简写，等Real time-PCR技术出现后，本来按照惯例，简写也是RT-PCR，但为了与逆转录PCR相区别，还是写成Real time-PCR。
Q-PCR就是定量的PCR，这其中包含real-time PCR
real-time PCR指的是用可以实时检测信号的机器来做PCR，最常用的是roche的light cycler和applied biosystems的机器，一般就是在PCR反应中加dye或者probe，每一个cycle都读一下荧光强度
Q-PCR还可以用其他的方法做，大部分其实都算作semi-quantitative，比如用普通的PCR机器做，保证在PCR的反应的线性区域的时候停止反应，这个时候得到的DNA的量应该是比较能够定量的（也经常有人添加含反射性元素P32的dCTP到反应中，敏感度比一般的PCR高）
至于RT PCR，就是指reverse transcription的PCR，就是从RNA得到cDNA以后进行的PCR，跟real time没有什么直接关系
至于absolute，其实就是在做Q-PCR的时候做一个已知浓度的DNA/RNA/cDNA的standard curve，然后根据未知浓度的样品PCR的结果在这个strandard curve的位置来估计未知样品的浓度
花多少钱主要看你实验所需的用量和是否能一下就搞定
用SYBR的话，一个200次的试剂大概一千多，
而Taqman探针的试剂稍稍贵点，而且得自己设计探针（探针弄弄少少也要一千多）
一两天就行。只要循环三十到四十次，出现倍增就行了。试剂的话用现成的试剂盒就行了，这个价格网上都有，主要是你自己的引物，得你自己准备好。这个要是有现成的就便宜了
1200
...biosystems quantstudio64 6 7 flex real-tim
1、在 控制面板，卸载程序，里面找到apple software update，右键单击选择修复，修复后重新安装官网上下的itunes安装包。2、如果是首次安装iTunes，用WINRAR把iTunes 的安装包解压，单独安装解压出来的AppleSoftwareUpdate.msi，然后再通过Apple Software Update安装iTunes。
情书里面一首歌曲的名字~
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STM32开发 -- RTC详解(上)
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批处理复制文件至指定文件夹,并自动重命名。
F:\\合并\\黑色\\*.*') do (move %%i F:\\合并\\%%~ni黑%%~xi)for \/f %%i in ('dir \/s \/b F:\\合并\\透明\\*.*') do (move %%i F:\\合并\\%%~ni透%%~xi)rd F:\\合并\\黑色\\rd F:\\合并\\透明\\上面只考虑了主图里没有子文件夹，副图里只有两个子文件夹。 如果与实际不符请说明 ...
bat命令、全一点的、给加分
delims= 表示vivtim.txt中的内容是一空格来分隔的。我想看到这里你也一定明白这victim.txt里的内容是什么样的了。应该根据%%i %%j %%k表示的对象来排列,一般就是 ip password username。 代码雏形: --- cut here then save as a batchfile(I call it main.bat ) --- @echo off @if "%1"=="" goto...
我想知道韩国综艺节目情书和X-Man中出现的歌曲
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整点报时程序DELPHI
新建一个顺序，并在窗体中参与以下元件： Timer1: TTimer; Image1: TImage;。。时钟的表盘 Edit1: TEdit; 。。日期框 Label1: TLabel; PopupMenu1: TPopupMenu; 然后在 {$R *。DFM} 下面参与这么一句 {$R CLOCKSOU。RES} <--时钟的声响文件, (注：CLOCKSOU。RES 是先用windows的记事本...
想用delphi编一个闹钟程序?
tim1,tim2,tim3,tim4:real;dtme: TDateTime;timini:tinifile;dtim,textdef,tmfilename:string;implementation {$R *.DFM} {$R LL1.RES} \/\/时钟的发声文件 procedure tform1.tiniwr();begin timini:=TIniFile.Create(tmfilename);with timini do begin WriteString('内容','文字',textdef)...
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依龙醋酸： 现在最常用的real-time试剂是SYBR和Taqman探针 花多少钱主要看你实验所需的用量和是否能一下就搞定 用SYBR的话,一个200次的试剂大概一千多,而Taqman探针的试剂稍稍贵点,而且得自己设计探针(探针弄弄少少也要一千多)
白云矿区18593993478： Real - time PCR为什么不用吸光度法检测 - ？
依龙醋酸： Real-Time PCR结果不齐,建议使用多种方法多次尝试.一般出现不齐是因为加样量不一致,相差少许是由于实验误差. Real-Time PCR 技术,又称实时定量荧光PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个...
白云矿区18593993478： 在real - time PCR中如何检测DNA污染 - ？
依龙醋酸： 既然把DNA叫做污染,那应该是对RNA反转录后进行Real-time了. 你用未进行反转录的RNA作为模板,跑一次检测Real-time.如果没有DNA污染,这次RT是不会得到扩增结果的,因为RNA不能作为普通Taq酶的模板;一旦RNA样品里面有DNA污染,那检测RT出现扩增产物的可能性非常高. 只要RNA作为模板的Real-time PCR得到了扩增结果,那就是存在DNA污染. PCR产物的融解曲线必须做,而且你也必须得知道这对引物二聚体的融解峰,防止引物二聚体误导结果.
白云矿区18593993478： Real - time PCR的原理及优点是什么? - ？
依龙醋酸： real time PCR,即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法,它是在PCR反应体系中加入荧光物质,并通过real time PCR检测系统对PCR反应进程中的荧光信号强度进行实时监测,最终对实验数据进行分析处理的方法.描述 PCR动态进程的曲...
白云矿区18593993478： real - time RT - PCR是什么意思 - ？
依龙醋酸： real-time RT-PCR 实时荧光定量RT-PCR 双语对照词典结果: 网络释义 1. 荧光定量RT-PCR 2. 实时定量RT-PCR 3. 荧光RT-PCR
白云矿区18593993478： real timepcr的意义检测基因表达水平需要多少样本 - ？
依龙醋酸： 细胞按要求培养,抽RNA, 反转录为cDNA. 有细胞计数,测RNA 浓度(分光光度计)等环节. 选择反应物, 待测样本:0hr, P4, L4, P12, L12, P24, L24, P36, L36 九种 阴性对照:即无模板对照, NTC 作为标准的样品:如果有必要...
白云矿区18593993478： 逆转录PCR的逆转录PCR - ？
依龙醋酸： 由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常的PCR.原先的RNA模板被RNA酶H...
白云矿区18593993478： 荧光定量PCR RT - PCR - ？
依龙醋酸： RT可能含义: reverse transcribe 是逆转录,那么相应pcr应该是由rna凡转录cdna过程 real time 实时定量 那么就是荧光定量pcr了
白云矿区18593993478： real - time pcr 能测相同个体不同基因之间的的表达差异吗 - ？
依龙醋酸： 可以放在一起比较,同一组织中有一些特定表达的基因如β-actin、GAPDH之类的,你可以选择合适的一种作为内参基因,同一个样品的cDNA或者RNA进行目的基因(一个或多个)和内参基因RT-PCR后比较你的目的基因和内参基因的Ct值,使用△△Ct法计算出目的基因与内参基因的比例,这样也就可以比较出你的不同目的基因之间的比例
