【黄毛黄侧耳的生物学特性和驯化栽培】在玉米的栽培作物驯化过程中

~ 　　对黄毛黄侧耳（Phyllotopsis nidulans）的生物学特性及其驯化栽培进行研究，结果表明：菌丝生长的最适温度为25 ℃，最适pH为6，试验范围内最适碳源为果糖，最适氮源为蛋白胨，碳氮比对菌丝生长影响不明显；在分别以硬杂木屑、玉米芯和两者混合主料的培养料上均能形成子实体，在木屑和玉米芯混合的培养料上生物转化率最高。
　　黄毛黄侧耳； 生物学特性； 驯化； 栽培； 生物转化率
　　黄毛黄侧耳（Phyllotopsis nidulans），别名黄毛侧耳，隶属于担子菌门（Basidiomycota）、层菌纲（Agaricomycetes）、伞菌目（Agariales）、口蘑科（Tricholomataceae）、黄侧耳属（Phyllotopsis）［1］。主要在中国、日本、北美洲、俄罗斯（远东地区）、英国、芬兰、印度和格鲁吉亚有分布；中国主要分布在黑龙江、吉林、甘肃、新疆、青海、西藏、广西、广东、四川、山西等省区［2-7］，主要生长于蒙古栎、阔叶树倒木和针叶树上，群生或丛生，引起木材白色腐朽，黄毛黄侧耳子实体菌盖宽2～7 cm，扁半球形或肾形，黄色至黄褐色，有粗毛，边缘波状，内卷或反卷。菌褶橘黄色，稍稀，近直生至延生。菌肉白色至淡黄色，薄，无菌柄［8］。NOZAKI等［9］研究表明，黄毛黄侧耳提取物对工业染料有脱色作用。国内外对该真菌的报道多是对其分布及形态学的描述，据文献记载该种可以食用［10］，但野生菌市场中很少有售，未见有对其驯化和生物学特性的相关报道。
　　1 材料与方法
　　1.1菌株
　　由黑龙江省丰林国家级自然保护区野生的黄毛黄侧耳（P. nidulans）的子实体分离得到，由吉林农业大学食药用菌工程研究中心图力古尔教授鉴定。
　　1.2培养基质
　　菌种保藏及测试用培养基（改良PDA培养基）： 200 g马铃薯，20 g葡萄糖，3 g磷酸二氢钾，1.5 g硫酸镁，20 g琼脂，加蒸馏水定容至1 L。
　　马铃薯葡萄糖琼脂培养基：200 g马铃薯， 20 g葡萄糖，20 g琼脂，加蒸馏水定容至1 L。
　　栽培培养料配方：
　　配方1： 78%硬杂木屑，20%麦麸，1%石灰，1%石膏；
　　配方2： 78%玉米芯，20%麦麸，1%石灰，1%石膏；
　　配方3： 39%硬杂木屑，39%玉米芯，20%麦麸，1%石灰，1%石膏。
　　1.3方法
　　在进行温度、pH、氮源、碳源、碳氮比等对黄毛黄侧耳菌丝生长影响的试验中，每种处理10个重复，接种后25 ℃恒温（温度试验除外）黑暗条件下培养10 d，测量第5～10 天的菌丝日生长长度，计算菌丝生长速度。
　　1.3.1温度对菌丝生长的影响
　　改良PDA培养基，pH 值为6，0.1 MPa蒸汽灭菌0.5 h。用打孔器在平皿上取直径0.5 cm的菌种块，接种在改良PDA培养基平板中央。温度梯度为5、15、17、19、21、23、25、27、29、31和35 ℃。
　　1.3.2pH对菌丝生长的影响
　　接种方法同1.3.1。pH梯度为5、5.5、6、 6.5、7、7.5、8、8.5。用1 mol/L的NaOH和HCl调节pH。
　　1.3.3氮源对菌丝生长速度的影响
　　接种方法同1.3.1。在配好的无氮源培养基（20 g/L葡萄糖、20 g/L琼脂，pH=6）中，分别用硝酸铵、尿素、谷氨酸、蛋白胨、酵母膏、硝酸钾、氯化铵、硝酸钠作为氮源，纯氮用量为0.2％。
　　1.3.4碳源对菌丝生长速度的影响
　　在配好的无碳源培养基中（2 g蛋白胨、 20 g/L琼脂，pH=6）中，分别以淀粉、葡萄糖、玉米粉、蔗糖、麦芽糖、果糖、乳糖作为碳源，纯碳用量为0.2％。
　　1.3.5碳氮比对菌丝生长速度的影响
　　用不加入马铃薯的琼脂葡萄糖培养基，葡萄糖用量不变的情况下调节蛋白胨加入量，碳氮比梯度分别为10∶1、15∶1、20∶1、25∶1、30∶1、35∶1、40∶1。
　　1.3.6栽培试验
　　按配方1、2、3配好栽培培养料后，调节含水量在60%左右，采用17 cm×33 cm聚丙烯袋分装，平均每袋干料重450 g，121 ℃灭菌1.5 h，冷却后接种，置于25 ℃恒温培养箱内培养。观察并记录菌丝生长等情况。原基形成后在袋子上划口，于(23±1) ℃、湿度为85%～95%条件下进行出菇管理。计算生物学转化率。
　　生物学转化率=（子实体鲜重/培养料干重）×100%
　　金宇昌，等：黄毛黄侧耳的生物学特性和驯化栽培
　　2 结果与分析
　　2.1温度对菌丝生长速度的影响
　　菌丝生长受温度影响明显，最适温度为25～29 ℃，5 ℃和35 ℃菌丝生长缓慢（表1）。
　　2.2pH对菌丝生长速度的影响
　　菌丝在pH 5～8.5的培养基中均可生长，当pH 5～6.5时菌丝浓密、粗壮，pH 7～8.5次之，当pH大于7时菌丝长势明显较差（表2）
　　2.3氮源对菌丝生长速度的影响
　　不同的氮源菌丝生长速度不同，除尿素外，菌丝在其他氮源的培养基中均能生长。为硝酸铵和氯化铵时，菌丝生长速度快，但较稀疏。为蛋白胨时，菌丝浓密、健壮（表3）。
　　2.4碳源对菌丝生长速度的影响
　　菌丝在供试碳源中均能生长，乳糖中生长缓慢，果糖中生长速度最快，菌丝也较其他碳源粗壮。在供试碳源中，菌丝生长的最适碳源为果糖（表4）。
　　不同小写英文字母表示在P＜0.05水平上差异显著; +++：菌丝长势浓密健壮；++：生长较浓密；+：生长稀疏
　　Different lower case letters represent a significant difference at P＜ 0.05. *+++: Very dense; ++: moderately dense; +: diffuse

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