sw480细胞转染求助
HCT116，SW480，SW620这三个细胞是很难转染的，
将同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因第10号染色体转染人类肿瘤细胞系（HCT116和SW480）,用siRNA作为阴性对照或者采用非目标锁定对照
西南大学,高效率转染SW480人结直肠癌细胞，2020-4-28发表文章已见刊，转染经验分享
发表文章转染条件
A、HCT-116, SW480, HT-29人结直肠癌细胞
B、AURKA质粒DNA
C、转染细胞融合度50%
D、96孔板每孔使用0.5μg质粒DNA
6孔每孔使用10 ug质粒DNA
E、Advanced DNA RNA转染试剂
(注意：本实验中用到的细胞密度、转染质粒DNA用量不适用于LIPO3000/2000)
发表文章部分内容
Overexpression of AURKA Plasmid for AURKA overexpression was obtained from VectorBuilder. Details about plasmid containing the AURKA gene can be found at https://www.vectorbuilder.cn/vector/VB190802-1063ncc. html. colon cancer cells (HCT-116, SW480, HT-29) were seeded at 50% confluency for 24 h in six-well and 96-well plates. Plasmid (10 ug per-well for six-well and 0.5 μg per-well for 96 plates) and the Advanced DNA RNA transfection（zeta life,USA) reagent were mixed in equal proportionsand added to the cell culture medium for 6 h. DOX (1 μg/ml) was added to induce the expression of AURKA. After addition of DOX and PAL for 36 h, cell viability was measured by MTT and apoptosis was detected by。
您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物。
我当时考虑到两方面，1.转染试剂的效果2.转染试剂的价格
后来我选择了RFect转染试剂，首先，毒性很低并且转染性能卓越，其次，价格也在符合我的心理价位
想买便宜点
武宏氨苄： 人结肠癌细胞SW480是从结肠癌中分离得到的细胞系.是原发性结直肠癌细胞.该细胞在ras基因的第12个密码子发生突变,因而也可用于ras基因密码子突变PCR检测的阳性对照.SW620是从一个51岁男性白人组织中分离得到. 由A.Leibovitz等从一个淋巴结建株. 细胞系主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成. 它仅合成少量癌胚抗原(CEA)且在裸鼠中有高度的致瘤性. 是结肠癌转染至淋巴结后得到的细胞.
察布查尔锡伯自治县18353523159： 翻译 Human colon cancer cell lines HCT116 and SW480 were transfected with phosphatase and tensin - ？
武宏氨苄： 将同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因第10号染色体转染人类肿瘤细胞系(HCT116和SW480),用siRNA作为阴性对照或者采用非目标锁定对照
察布查尔锡伯自治县18353523159： 瞬转的细胞是否可以用于做COIP ?一般是用稳转的细胞做的? - ？
武宏氨苄： 可以做了 又不用表达个几十天的
察布查尔锡伯自治县18353523159： 求助做SiRNA质粒转染,效率低转染后细胞状态差 - ？
武宏氨苄： 做SiRNA质粒转染,效率低转染后细胞状态差 实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题.我觉得只要是注意以下2点就可以了:1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套.2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的.无论是小提还是大提我们都是用的日常型的,并没有刻意用转染级的,因为转染量大,去内毒素的操作太麻烦,损失太大.
察布查尔锡伯自治县18353523159： 【求助】如何去处质粒中的污染 - ？
武宏氨苄： 做细胞转染后仅六个小时,发现培养皿整个的非常浑浊,肉眼看有点像有白色沉淀,镜下已经看不到细胞,非常污浊,看不清楚.请教这是什么东西啊,我估计是我的质粒污染了,如何去除质粒中的污染啊,转染之前我用乙醇沉淀过的.请大家...
察布查尔锡伯自治县18353523159： 脂质体转染荧光效率很低 求助 - ？
武宏氨苄： 是有这么一个说法,质粒的Bp比较大会影响转染效率,但是我转染用的质粒长度也很大,都5k,效果也还行;你这样吧,复苏一管代数比较低的细胞试一试;或者悬浮转染~
察布查尔锡伯自治县18353523159： 结肠癌细胞株sw620用什么培养基 - ？
武宏氨苄： 你好,DENE培养基种类有很多种啊一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等
察布查尔锡伯自治县18353523159： HT - 29人结肠癌细胞来源? - ？
武宏氨苄： 选用胎牛血清上皮细胞均为原代或 2 次传代 .上海雅吉生物科技有限公司可以提供
察布查尔锡伯自治县18353523159： 2006年中国耕地面积是多少?最新的!!!!!! ？
武宏氨苄： 中国耕地总面积为1.282亿公顷,人均耕地面积为0.101公顷,居世界第四.
察布查尔锡伯自治县18353523159： 环状RNA实验求助 RNase R - ？
武宏氨苄： backsplicejunction位点一端互补配对,本文带大家一起探讨circRNA功能验证策略:对3freeRNA以及genomeDNA同时进行PCR扩增,而探针序列设计是验证成功至关重要的环节,也可针对内含子区域序列设计siRNA.DNAfree,建议探针尽可能...
