薄层色谱法,样品为什么不出斑点

作者&投稿:淡贡 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
薄层色谱法斑点拖尾的原因~

拖尾现象产生之原因及解决方法:
1、点样量太多,展开剂不能全部负载。
解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。
2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。
解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。
3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,常观察到斑点拖尾。
解决方法:在层析K值在10-3~10-8的碱性化合物时,展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。
4、吸附剂pH的影响。 由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。
解决方法:换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH,如加入酸或碱等。
5、吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等),使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。
解决方法:采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。

扩展资料:
薄层色谱法的优点:
它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍。
它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
参考资料:百度百科-薄层色谱法

  分离效果降低,可能会分不开,也可能会产生拖尾。
  色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。

TLC不出斑点,无非是这样几种原因:量太少、没有展开(或者展开过头都集中到前沿了)、显色方法不对,等等。如果你的对照正常,那么后两个原因就可以排除,第一个原因的可能性最大。
一般第一次展开显色的时候,同一个样品可以点上几个不同量的点,判断需要点多少的量最合适。

拖尾现象产生之原因及解决方法:

1、点样量太多,展开剂不能全部负载。

解决方法:寻出合适之点样量后,再进行层析。

2、展开剂pH值偏高。如以中性展开剂层析酸性物质时,常形成斑点拖尾。

解决方法:在展开剂中加入酸,使解离受到抑制,即可防止斑点拖尾。

3、展开剂的pH值偏低。如以中性展开剂层析生物碱和其它弱碱时,常观察到斑点拖尾。

解决方法:在层析K值在10-3~10-8的碱性化合物时,展开剂应调至碱性(如加入吡啶、二乙胺等)。

4、吸附剂pH的影响。 由于化合物与薄层上的酸、碱成盐而产生拖尾现象。

解决方法:换用pH合适的吸附剂或调整展开剂的pH,如加入酸或碱等。

5、吸附剂和展开剂中痕迹量的金属离子(如Ca2+、Mg2+等),使层析后的斑点形成拖尾。特别是被展开的化合物具有-COOH及酚-OH等基团时。

解决方法:采用纯净的酸来洗涤和处理吸附剂。展开剂可用精制的方法来除去金属离子。

扩展资料:

薄层色谱法的优点:

它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍。

它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。

样品如果没有共轭结构的话就紫外线下就不会显色

你的待测物本身有颜色么?用不用加显色剂?


气相色谱法鉴别适宜的制剂样品为含有什么成分的制剂
气相色谱法鉴别适宜的制剂样品为含有挥发油、挥发性成分、不挥发性成分可分解或制成挥发性衍生物成分的制剂。根据查阅相关资料显示,气相色谱法是利用气体作流动相的色层分离分析方法。气相色谱法具有效能高、灵敏度高、选择性强、分析速度快、应用广泛、操作简便等特点。适用于易挥发有机化合物的定性、定量...

色谱法是测量什么物质的
色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。色谱法的应用可以根据目的分为制备性色谱和分析性色谱两大类。制备性色谱的目的是分离...

色谱法分几类,各自有什么作用?
色谱又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品)与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。其他分类方法色谱法的分类方法很多,最初的分类是根据流动相的状态将色谱法分成四大类。

薄层色谱法点样应注意些什么?
4. 粘附样品:在抠掉的小孔中涂抹少许淀粉浆糊,然后将点加有酒样或标准溶液的滤纸片粘附在小孔上。希望这些信息对你有所帮助!

薄层色谱法是什么
Rf= a\/b, TLC只是定性, 而不是定量的, 除非用层析板分离, 再抠出样品并称重。薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或...

薄层色谱法的主要依据和原理是什么?
薄层色谱法(Thin-layer Chromatography,简称TLC)是一种基于分配原理的分离技术,用于分析和鉴定化合物混合物中的成分。其主要依据和原理如下:1. 分配原理:薄层色谱法基于分配原理,即样品中的化合物在涂有固定相(固定在薄层平板上)的表面上,与流动相(溶剂)之间的相互分配行为。化合物会以不同的...

薄层色谱实验记录的内容应该包括什么?
薄层色谱(TLC)是一种用于分离和分析化合物的常用技术,实验记录对于保留实验过程和结果的准确性至关重要。一个完整的薄层色谱实验记录应该包括以下内容:1. 实验目的和背景 阐述实验的目的和意义,解释为什么选择薄层色谱以及预期的结果。介绍样品及其性质,以及所使用的溶剂和载体。2. 实验条件和步骤 描述...

如何使用薄层色谱法进行定性分析
用薄层色谱法把混合物分离后,色谱带上的各种成分分离出来 1、利用纯物质对照定性。通过已知纯物质的色谱对照,确定未知物质为何物。2、相对保留值法(相对保留值是指组分i与基准物s调整保留值的比值)通过已知物质的相对保留值来比较,确定未知物质是什么东西 3、加入已知物增加峰高法 当未知样品中组分...

薄层色谱法的操作要点是什么?
薄层色谱法的操作要点包括以下几个关键步骤:1. 薄层板的选择:选择合适的薄层板是确保实验成功的基础。薄层板应具有均匀的厚度和平整的表面,无任何花斑或水印等缺陷。常用的固定相包括硅胶、氧化铝和微晶纤维素等,根据样品的特性和分离目标选择合适的固定相。2. 点样操作:点样是薄层色谱中的一个精细...

薄层色谱法点样应注意些什么
3. 点样技术的选择需根据样品的体积、路层类型、分析目的以及展开形式等因素来确定。4. 使用适宜的点样器,如定容的微量吸移管、微量注射器或定体积毛细管点样器。5. 点样的位置可以在装有量尺的特制点样板上确定,或者自行测量。薄层色谱法,或称薄层层析,是一种层析分离技术,利用涂布于支持板上...

晋州市13496403160: 薄层色谱法,样品为什么不出斑点 -
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晋州市13496403160: 薄层色谱展开剂选择的依据是什么?为什么我做出来的薄层分离不出杂质斑点啊 -
诸葛陶坦立:[答案] 选择展开剂时候,要让你的产物点r.f.出现在0.2~0.3左右,这样效果比较好.要以这个标准选择展开剂. 至于不出杂质点,是不是你的显色剂选择有问题,比方说如果使用香兰素显色剂,那么它对含有氧的(羟基、脂类)显色很明显,但是对双苄基化后...

晋州市13496403160: 薄层法检益母草不显斑点,原因何在? -
诸葛陶坦立: 盐酸水苏碱对照品显出斑点吗?如果仅是样品没有斑点,可以考虑下:1、益母草药材质量(益母草药材存放一年以上,水苏碱的含量将大大减少,甚至低于标准规定----据药典注释1990年版);2、柱层析流速.另外,有些品种展开剂用的是无水乙醇.仅供参考 查看原帖>>

晋州市13496403160: 薄层色谱实验中为什么展开剂的液面要低于样品斑点 -
诸葛陶坦立: 如果液面高于斑点就会将样品直接溶解到展开剂中,整个展开剂就污染了.

晋州市13496403160: 用硅胶板跑薄层层析时,为什么跑出来的是一条带而不是斑点?附图(254nm下观察) -
诸葛陶坦立: 随便点一个斑点,过一段时间后,该斑点会扩大成圆饼状(毛细作用,扩散现象) 现在,由于层析作用的影响,而抵消了纵向的扩散作用,但是横向的扩散作用依然存在 所以,一点跑成了一条带

晋州市13496403160: 薄层色谱分析,点板后该怎样分析? -
诸葛陶坦立: 薄层色谱常常用来鉴别试验用,点板后选择合适的展开剂展开,在对照品斑点的位置有对应斑点则证明供试品中含有要检测的物质. 准备TLC板.可直接购买铺好的板,也可以自己使用硅胶制备.使用TLC板时要格外注意防尘,硅胶颗粒较小...

晋州市13496403160: 薄层色谱法点的颜色很淡是为什么 -
诸葛陶坦立: 首先最可能是浓度太低了,可以把物料浓缩一下少放溶剂溶解重新点. 如果很浓了还是淡,那就是这个物质紫外吸收本来就很弱,这个时候就要用其他显色剂显色了,比如碘显色,磷钼酸显色等.

晋州市13496403160: 影响薄层定性分析的因素有哪些 -
诸葛陶坦立: 影响因素: 1、薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱.是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法.它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0....

晋州市13496403160: 薄层色谱基本操作有哪几个关键技术 各项操作应该注意什么 -
诸葛陶坦立: 薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱.是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点.一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离...

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