一个物理学的实验
加热冰块,用温度计测量温度,发现冰块熔化时,温度一直是0摄氏度
带有抗性基因的大肠杆菌的培养和分离》
[实验原理]
细菌是单细胞的原核生物。大肠杆菌在基因工程技术中被广泛的应用,由于它本身具有原核的表达元件,因此它是质粒最常用的运载体,它也是基因工程中常用的受体细胞。
利用大肠杆菌进行外源DNA的复制与扩增
利用工程菌中所具有的抗性基因质粒,在选择性培养基(固体和液体)中进行选择性培养,使获得抗性的大肠杆菌工程菌在选择性培养基中大量繁殖,最终获得随大肠杆菌同时扩增的质粒。
[实验目的]
1. 掌握带有抗性基因质粒的工程菌的培养和分离方法。
2. 掌握固体培养基和液体培养基的配制方法和培养方法。
[实验步骤]
1、实验前准备
(1)三角瓶与平板
分别取200ml三角瓶两个,玻璃培养皿2个,分别刷干净并晾干。
(2)LB培养液
2、无菌操作中的灭菌和消毒
(1)无菌技术:①对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;②将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;③为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰旁进行;④避免已灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
(2)消毒方法:①日常生活经常用到的是煮沸消毒法;②对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法;③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒;④实验操作者的双手使用酒精进行消毒。
(3)灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅;③表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。
(4)比较消毒和灭菌:
比较项 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭
消毒 较为温和 部分生活状态的微生物 不能
灭菌 强烈 全部微生物 能
(5)注意事项:①实验中用的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易造成污染。灭菌后,通常在60~80℃烘箱中除去灭菌时的水分;②物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是有利于锅内温度升高,随后关闭排气阀继续加热,加热结束切断热源后,要使温度自然降低,气压务必降至零时打开锅盖,其目的是防止容器中的液体暴沸;③在用任何器皿转接时,瓶塞和封口膜只能夹在手上,不许放在台面上,接种时要在酒精灯火焰旁操作;④培养基一定不能沾在三角瓶口、试管管口和培养皿壁上,否则容易污染;⑤接种时要胆大心细,动作快捷,这是减少污染的关键;⑥接种后,培养皿必须倒放(盖在下方)在恒温培养箱中,如正放则水蒸气在盖上凝成水滴,滴到接种后的培养基表面,水流扩散会使菌落扩散,就很难形成单菌落了
3、试剂配制
(1)LB培养液
10 g Tryptone(蛋白胨),5 g Yeast Extract(酵母浸粉),10 g NaCl(氯化钠),双蒸水定容至1000mL,高压灭菌后4℃保存。(按需配制)
(2)LB平板培养基
在LB液体培养基中加入琼脂粉10,高压灭菌,冷却至45℃左右时倒平皿,4℃保存。(每个平板需要20-25ml培养液)
(3)LA平板培养基(LB带有氨苄抗性的平板培养基)
待LB液体培养基冷却至45℃左右加入Amp (100μg/mL),摇匀后倒平皿,4℃保存。
4、菌体的接种
(1)从固体培养基中挑取单菌落。在挑取单菌落前,需要将接菌环放置于酒精灯上灼烧,用以灭菌,待接种环冷却后,选取大小适中,形状规则的单菌落挑取。将接菌环插入加有氨苄抗性的液体培养基中,然后取出接菌环在酒精灯火焰上灼烧灭菌,准备接种下一个菌体样品。
(2)接种后的液体培养基三角瓶在酒精灯处烧下,灭菌并封住瓶口放置于恒温振荡培养箱中,37℃,100rpm/min,培养12h或过夜。
(3)将过夜培养后的菌液,将蘸有菌液的接种环在准备好的固体培养基平板划板。划好平板后放置于37℃培养箱中倒置培养12小时或过夜(主要防止培养过程中产生的水珠滴至培养基上,引起杂菌的滋生)。
5、菌种的保存
(1)菌种保存前准备。准备50%甘油放置于干净的瓶中灭菌待用。准备1.5mlEP管并同时灭菌备用。
(2)将液体培养基过夜培养的菌体,按照1:100倍加入含有抗生素的新培养基中放置进行培养,大约培养2-3个小时,OD约为0.4-0.6(将培养瓶放置于手掌处,看不到掌纹即可)。
(3)将灭过菌的EP管准备好,将新活化的菌体按照体积比1:1与灭菌过的甘油混合。最后用封口膜封口,放置于-80℃冰箱中备用。
[注意事项]
(1) 注意所有培养基在使用前均需要灭菌处理。
(2) 高压灭菌锅要在教师指导下使用。
(3) 装液体的试剂瓶需要灭菌时不能超过总容量的三分之一,以免沸腾溅出,注意通气。
(4) 酒精灯的使用要在教师指导下进行操作。
(5) 无菌操作台的使用需要在教师指导下进行操作。
(6) 注意紫外线对人体有灼伤,使用前一定要注意个人保护。
关于这个问题,我记得好像也是铅块,就用铅来说吧。我认为大气压力可能是有的。
我认为给出具体数据,可以计算一下大气压力能支持的重量,与实际能挂的重量比较一下,大气压能支持的应该是小于后者的。可忽略不计。
而且我觉得要真正做到让大气压起很大的作用,是很难的。应该那设计到了微观的变化。如果在两个面之间完全没有气体分子,大气压的作用才能完全体现。而如果两个平面中有一些气体分子,由于基本上是微观形变,因此这些分子的形变相比在正常状态下也不会很大,产生的压强也会与大气压相当。这样相当于大气压的有效作用面积会减少。应此大气压不是主要作用。
把表面削平,主要是为了让更多的分子接触,让两表面间更多分子的距离在引力的有效作用距离内。
这个实验可能说明了分子是在运动的,但我认为这个实验最主要的是说明分子间是存在吸引力了。说明固体分子存在运动的最好的实验应该是选两种不同的材料,如煤渣和墙角,应为时间就了,固体分子不停运动,通过相互的扩散运动,最后墙表皮里都有了煤渣。
另外关于你的那个实验,我觉得应该不会分开。
你可以估计理想情况下,大气压力的大小。
实验室用的铅块的下表面积应该最多为10平方厘米,约合10^(-3)平方米
大气压强约为10^5Pa
则相应的大气压力即大约为10^5*10^(-3)=100N
约合10kg左右质量的重物。
你看铅块下面所吊重物的质量又没有这个大就行了,应该是大于的。
原理就是“分子是运动的”。
两个铁块表面靠的很近的时候,由于分子是运动的,铁原子相互进入对方内部,使得两个铁块连在了一起。但是由于进入的铁原子的数目比较少,所以还是很容易分开来的。
如果铁块表面切得很平的话,相互接触后接触面内是没有空气的,那么也就不会是大气压强的作用了。
确实,我上课的时候老师也是用铅块做的实验。
对于你的补充,关于扑克牌,可能静电力的作用更大更主要一点。翻书的问题,我想说的是,当你手迅速的拉起,翻开表面的一页时候,按照我的理解,除了静电力的作用外,两页纸迅速分开,致使中间的需要大量的空气迅速的补充进去,气压有所下降,并且空气的流动也会导致气压的下降,这样就使得下一页纸跟着翻起来了。
对于吸盘的问题,吸盘在被压在玻璃上的时候排出大量的空气,又由于吸盘具有一定的“弹性”,想要恢复原状但又不能将空气吸入(里面多少还是会有一点空气的),而一直保持内外压强不相等的状态,被吸在玻璃墙上。这个主要还是大气压强的问题。
其实为什么做实验要用铅块来做,主要就是铅块效果比较明显(就像橡皮泥一样)。不同的物质都有自己不同的特性,每一种现象都有自己不同与其他现象的特点,对一种现象的解释不一定适合其他类似现象的解释。用一个统一的原理解释某一类现象是不太好的,得具体问题具体分析。
很荒唐吗?一个铁块他的内部是不会有空气的,难道他能成为一个坚硬的铁块是因为内部没有空气,大气压强所致?
关于你的实验,我可以告诉你铅块不会分开
用你的话来说“毕竟是教育部写进教科书里的实验” 应该是不会错的
F=P*V 半球实验他的球很大,所以力很大,马都拉不动。
1毫米粗的管子和1米粗的管子里面装水银,大气压都可以顶起700多mm的汞柱,这跟质量无关
这是我最后一次修改我的答复,你要是钻牛角尖,还是不理解我也没有办法了。
原理我不知道,但我记得当初老师给我们做过这样一个实验,也是为了证明分子是运动的。老师拿了两块铅柱,使横截面对其后相互挤压,然后松手。这时,两铅块结合在了一起,即使一个在上一个在下的话也不会落下来。因为铅块很软,所以挤压时易发生形变,分子也就更容易互相进入到对方内部。
但楼主说的是铁块,不知道此原理还能不能适用。
还有,我认为一楼关于压强的回答是错误的。
用刀削平的铁块是不可能绝对光滑的,它不像玻璃。因此接触后肯定会残留空气,也就不会有大气压强的作用。
而且就算接触面很平且没有空气,那么肯定就会有大气压强的作用,托住铁块不下落,所以他的理解是错误的。
绝对不会是大气压作用。。。我人头担保。。。应该“分子是运动的”作用。。用刀削割表面使表面的分子内能增大一部分分子互相渗透。。所以就产生怎样的现象、、、
马德堡半球实验...半球和半球之间有橡胶套。。防止漏气。。铁块被比规则的削过能够使凹陷的地方吻合想接吗。。这不太可能
你的想法不对,大气压强必须(考点在这,硬记吧)是不同物体之间挤压粘在一起后得到的
而由同一种物质组成的相互挤压,你就可以理解为分子之间的引力,因为无限接近分子,所以就要从微观中下手
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