霉菌的载片培养分为五个步骤

作者&投稿:贠魏 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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霉菌的载片培养的五个步骤分别是配置培养基、培养小室准备及灭菌、琼脂薄片制作、取菌接种、加盖玻片。

1、配置培育基

依据原料用量配置土豆培育基。配置时,先急火煮沸,在温火加热20min,若有浑浊消失,则需过滤,然后定容。包扎土豆培育基,甘油等其他用品。灭菌后取出备用。

2、培育小室预备及灭菌

在培育皿底部铺一张略小于皿底的圆形滤纸片,滤纸片上依次放上“U”形载玻片搁架、载玻片、盖玻片(四片),盖上皿盖,牛皮纸包扎,于121℃灭菌30min烘干备用。

3、琼脂薄片制作

将略微冷却的培育基,倒在培育皿中,做成薄平板。培育基应当要倒得薄而匀称。留意无菌操作。用解剖刀将琼脂薄平板切成边长不大于 1cm 的琼脂薄片用解剖刀将琼脂薄片移至小室载玻片上。

4、取菌接种

用接种环挑取少量待观看的霉菌孢子,接种于固体培育基边缘, 以便于霉菌生长。 接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻碰几下即可。 接种量要少, 以免培育后菌丝过于稠密而影响观看。

5、加盖玻片

用无菌镊子将皿内的盖玻片盖在琼脂薄层上, 用镊子轻压盖玻片, 使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近,但不能压扁。 盖玻片不能紧贴载玻片,要彼此留有小缝隙, 一是为了通气,二是使各部分结构平行排列, 易于观看。

霉菌的载片

1、霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子很容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是:

(a)细胞不变形。

(b)具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间。

(c)溶液本身呈蓝色,有一定染色效果。

这种霉菌制片不易干燥, 能防止孢子飞散, 用树胶封固后可制成永久标本长期保存。

2、此外还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。

此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性,将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上,然后将长菌的玻璃纸剪取一小片,贴放在载玻片上用显微镜观察。




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