丙二醛测定
植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应,反应产物为粉红色的3,5,5一三甲基恶唑2,4一二酮(Trimet—nine).该物质在539nm波长下有吸收峰.由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应,并在该波长处有吸收,为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响,在丙二醛含量测定时,同时测定600nm下的吸光度,利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量.
植物组织丙二醛含量测定
植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化,如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等.这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化.近来大量研究表明,植物在逆境胁迫或衰老过程中,细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累.活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用,造成细胞膜系统的损伤,严重时会导致植物细胞死亡.活性氧包括含氧自由基.自由基是具有未配对价电子的原子或原子团.生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等.植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶,抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂.
丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一,它的产生还能加剧膜的损伤.因此,丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度,也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱.所以在植物衰老生理和抗性生理研究中,丙二醛含量是一个常用指标.
[材料、仪器、药品]
1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品,即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照.
2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱.
3．药品：(1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液；(2) 石英砂；(3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸,先用少量蒸馏水溶解,然后定容到100ml；(4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸,用5％三氯乙酸溶解,定容至100ml,即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液.
[方法]
1．丙二醛的提取：取0.5g样品,加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液,加入少量石英砂,在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆,转移到5ml刻度离心试管,将研钵用缓冲液洗净,清洗也移入离心管中,最后用缓冲液定容至5ml.在4500转/min离心10min.上清液即为丙二醛提取液.
2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中,加入0.5％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml,于沸水浴上加热10min,迅速冷却.于4500转/min离心10min.取上清液于532、600nm波长下,以蒸馏水为空白调透光率100%,测定吸光度.
3．结果计算：
(A532—A600) ×V1×V
1.55×10-1×W×V2
丙二醛含量（nmol/g）=
式中：A为吸光度；V1为反应液总量(5m1)；V为提取液总量(5ml)；V2为反应液中的提取液数量(2ml)；W为植物样品重量(0.5g)；1.55×10-1为丙二醛的微摩尔吸光系数（在1升溶液中含有1µmol丙二醛时的吸光度）.
4．注意事项：
(1) 0.0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适,若高于此浓度,其反应液的非专一性吸收偏高；
(2) MDA—TBA显色反应的加热时间,最好控制沸水浴10~15min之间.时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降；
(3) 如用MDA作为植物衰老指标,首先应检验被测试材料提取液是否能与TBA反应形成532nm处的吸收峰.否则只测定532、600nm两处A值,计算结果与实际情况不符,测得的高A值是一个假象；
(4) 在有糖类物质干扰条件下(如深度衰老时),吸光度的增大,不再是由于脂质过氧化产物MDA含量的升高,而是水溶性碳水化合物的增加,由此改变了提取液成分,不能再用532nm、600nm两处A值计算MDA含量,可测定510、532、560nm处的A值,用A532一(A510—A560)/2的值来代表丙二醛与TBA反应液的吸光值.
TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:①在酸性条件下与蛋白质形成不溶性盐.②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变，暴露出较多的疏水性基团，使之聚集沉淀.③随着蛋白质分子量的增大，其结构复杂性与致密性越大，TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去，在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构发生酸水解而形成碎片，而且随时间的延长这一作用愈加明显；
在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时，对于分子质量大的蛋白质，要慎重选择TCA.对小分子量蛋白质的浓缩，采用TCA时也有两点需要注意:一是用TCA沉淀后，尽量用丙酮彻底抽提TCA;二是样品处理后要尽快进行电泳分析，以免发生聚集及断裂，造成结果分析的不准确。
测定意义：
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平。
测定原理：
MDA与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在532nm有最大吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量；同时测定600nm下的吸光度，利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。
自己在家怎么测甲醛
可以借助快速自测室内甲醛浓度的，甲醛自测盒。进行检测。
比较胆固醇氧化酶法,磷硫铁法邻苯二甲醛法测定胆固醇的优缺点
1、比较胆固醇氧化酶法。优点：操作简单、不受干扰，且灵敏度较高，适用于血清、血浆、尿液等多种检测样品中胆固醇的测定。缺点：该方法需要使用呼吸酶来作催化剂，较高浓度的胆固醇甚至会受到呼吸酶的抑制，引起误差。2、磷硫铁法。优点：测定胆固醇的灵敏度较高、稳定性也比较好，对各种样品的干扰较小...
甲醛检测仪是如何使用的?
注意：不能接反，否则会产生倒吸，损坏仪器。将仪器放置到在呼吸带高度（0.8-1.5米），用三脚架或高度合适的桌面（以室内空气检测为例）。接好仪器电源，按“定时操作”的方法进行定时定时操作：从左至右四个数码管依次为：第一个是项目区，显示数字1-6依次对应相应的检测项目，1-甲醛、2-苯、...
在网上买个甲醛检测仪测的准吗
1.绿植、芦荟、仙人掌、绿萝等植物对甲醛有着一定的吸收能力，能够通过光合作用将周围的甲醛慢慢地消耗掉。因为是植物，所以非常安全，不会产生其他的有害作用。但是要注意，植物吸收甲醛是有限的，只能作为除甲醛的综合治理方法之一。2.室内除甲醛最常见的方法就开窗通风，而且这种方法几乎没有任何成本。
如何测试甲醛是否超标?
问题一：如何检测室内甲醛是否超标 别甲醛超标的办法就看家里养的鱼养的花，如果鱼和花很容易死，不容易成活，这也海甲醛污染有关。甲醛污染反应主要的症状就是打开房门以后感觉呼吸系统 *** ，还有辣眼睛、眼睛流泪，这是普遍反应。问题二：如何测试室内有没有甲醛，超标不超标？ 测试室内的甲...
甲醛检测方法注意有哪几种
有甲醛检测仪、甲醛测试盒，还有专业的测甲醛公司，都可以选择，一旦发现甲醛超标，就应该立刻做好除醛工作，下面为您推荐几种广受好评的除醛方法，你可以择优选择，希望给您带来帮助。1.开窗通风可以快速的将游离态的甲醛排出到室外，只要当地的空气质量达标，就不会再引入其它污染物，并且使用方便，成...
怎么测试房间里的甲醛含量
1、植物可以去除甲醛，虽然可以去除甲醛，但是其吸收甲醛的量是非常有限的，而且在室内浓度较高时，如果单纯依靠植物吸附甲醛，其用量是非常大的。2、开窗通风是一种用起来极简单的除醛法，净化原理是室内外空气流通置换，能将室内空气中游离的甲醛等有害气体释放到室外，降低室内甲醛浓度。它除醛的...
简述甲醛苯系物氨常用测定方法的原理?
2.试剂法。酚试剂法即MBTH法,即甲醛与酚试剂(3-甲基-2-苯并噻唑腙盐酸盐,μgrn)反应生成嗪,嗪在酸性溶液中被铁离子氧化成蓝色,室温下经15rain后显色,然后比色定量[m]。酚试剂法操作简便,灵敏度高,检出限为0.02mg\/L,较适合测定微量甲醛测定。但脂肪族醛类也有类似的反应,对测定会有干扰,...
甲醛检测属于哪个部门
甲醛测定主要有两种方法，一种是让甲醛与液体试剂反应，根据试剂的变化测定浓度，另一种是使用电子仪器，让甲醛与其中的半导体器件反应，根据电信号的变化获得结果。根据前卫生部发布的GB／T18204.2－2014《公共场所卫生检验方法》，测量室内空气甲醛浓度应采用分光光度法，即第一种方法，需现场采集空气并...
甲醛检测0.14算超标吗?
超标。国家颁布 的 《住宅设计规范》（GB 50096-2011）规定：游离甲醛≤0.08(mg\/m³)。甲醛检测是指通过特定的方法或仪器，对空气、水、食品、衣物、板材、皮革等含有的甲醛做定量检测。白挺或免烫的衣物，尤其是有些牛仔裤、标榜100%防皱防缩的衣裤或全棉免烫衬衫使用乙二醛树脂定型，都含有...
罗熊杞菊：[答案] 刚做完毕业设计正好也有,就跟你分享吧.希望能帮到你. 丙二醛(MDA)含量的测定 ① 测定步骤 称取剪碎的试材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r/min离心10分钟,上清液为...
岳阳市18869687563： 丙二醛的提取与含量测定？
罗熊杞菊： 刚做完毕业设计正好也有,就跟你分享吧.希望能帮到你.丙二醛(MDA)含量的测定① 测定步骤称取剪碎的试材1g,加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂,研磨至匀浆,再加8mlTCA进一步研磨,匀浆在4000r/min离心10分钟,上清液为样品提取液.吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水),加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液,混匀物于沸水浴上反应15min,迅速冷却后再离心.取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度.② 计算 (3-6)式中:C—MDA的浓度, ; A450,A532 和A600—分别代表450、532和600nm波长下的吸光度值.
岳阳市18869687563： 丙二醛的检测方法? - ？
罗熊杞菊： 含有醛基 可与氢氧化铜溶液煮沸反应生成 氧化亚铜砖红色沉淀 或与银氨溶解发生银镜反应
岳阳市18869687563： 丙二醛提取的原理这个是植物细胞膜脂过氧作用的测定实验中的. - ？
罗熊杞菊：[答案] [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应,反应产物为粉红色的3,5,5一三甲基恶唑2,4一二酮(Trimet—nine).该物质在539nm波长下有吸收峰.由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应,并在该...
岳阳市18869687563： 丙二醛用TBA检测为什么要测600nm的值 - ？
罗熊杞菊：[答案] 600nm一般用于排除非特异性吸收,如样本自身的浊度或者颜色所导致吸光值上升,最终要减去丙二醛在酸性和高温条件,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮),在532nm处有最大光吸收,...
岳阳市18869687563： 油脂TBA值测定方法的公式? - ？
罗熊杞菊： 丙二醛含量(nmol/g)==(A532-A600)*V1*V*1.55*1/10*W*V2 A为吸光度;V1为反应液总量(5m1);V为提取液总量(5ml);V2为反应液中的提取液数量(2ml);W为植物样品重量(0.5g);1.55*10-1为丙二醛的微摩尔吸光系数(在1升溶液中含有1µmol丙二醛时的吸光度). 就知道这点了. 顺便问下,你是做油脂的抗氧化吗?TBA值多用于肉类测定,油脂一般测POV值.
岳阳市18869687563： 丙二醛含量测定时使用多少厘米的比色皿 - ？
罗熊杞菊： 一般先用1cm的比色皿.若所测吸光度值太低,则可换2cm的;太高则可换0.5cm的.
岳阳市18869687563： 植物组织中丙二醛的测定实验中,第二次离心的目的何在? - ？
罗熊杞菊：[答案] 答:因为此时已经加入了TBA溶液,并摇匀,且已经过沸水浴加热,上清液中已混有不少杂质,需再次离心才不会干扰显色反应结果.
岳阳市18869687563： 丙二醛用TBA检测为什么要测600nm的值 - ？
罗熊杞菊： 600nm一般用于排除非特异性吸收,如样本自身的浊度或者颜色所导致吸光值上升,最终要减去丙二醛在酸性和高温条件,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3,5,5—三甲基恶唑2,4-二酮),在532nm处有最大光吸收,在...
岳阳市18869687563： 丙二醛提取液要马上测定吗 - ？
罗熊杞菊： 实验六、植物组织丙二醛含量测定植物叶片在...(5)提取液与TBA的混合液为什么要加热?为什么加热时间又不能过长
