下图为一段2280bp的目的基因与pet-28a表达载体，试述如何进行该重组基因的筛选鉴定
这个是多少的maker？
你的目的片段没有起始密码子，显然要利用pET-28a的ATG密码子，因此表达的外源蛋白将融合进一段pET-28a序列所编码的肽段，这段肽段为36肽：MetGlySerSerHisHisHisHisHisHisSerSerGlyLeuValProArgGlySerHisMetAlaSerMetThrGlyGlyGlnGlnMetGlyArgGlySer（GluPhe）【其中括号内两个氨基酸为EcoRI识别序列所编码】，表达蛋白的其它氨基酸残基则由你的外源片段上EcoRI识别位点后至终止密码子之间的碱基所编码，这样你表达的外源蛋白的一级序列就出来了，那么算分子量就是全部氨基酸残基的分子量之和了。
1先将这个载体转入合适的大肠杆菌感受态中（用于克隆的可以用DH5阿尔法，用于表达蛋白的可以用BL21）然后在含有抗生素的平板上筛选阳性菌落（抗性的选择根据载体上的抗性基因来选，你那个看起来不清楚，好像是Kan抗性）将平板上长出的菌落挑出来做菌落PCR，引物根据目的基因来确定）选几个PCR阳性的菌接到含有抗性的液体培养基中生长，收集菌体提质粒做酶切鉴定（根据目的基因序列来选内切酶）。一般酶切正确就没问题了，将酶切鉴定对的菌选一到二个送测序公司测序（根据目的基因序列及载体序列来选测序引物，一般测序最多能测800bp,所以你要想把目的基因测通得选4个引物测），然后进行序列比对，序列比对正确就鉴定完毕。电泳检测，相差2000多bp，通过电泳迁移速度可以判断
如果知道插入片段的序列，可以PCR扩增检测
如果插入片段有相应的酶切位点，可以进行酶切（单酶切或双酶切）后电泳检测
方法很多的
求一4000元左右的款笔记本电脑
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我想买一个固态硬盘不知道哪个牌子的好呀?
哪里都可以买到，英特尔的比较好，价格贵点，然后三星，西部数据，金士顿的，主要看你要装什么样的，接口不同，形状和价位不一样 SATA接口的，应用广泛，不管台机笔记本都可以用 M.2接口，要特定的主板接口才可以装，不管是台机还是笔记本 NVME 协议M.2 2280接口 PCIe 固态硬盘SSD 1.2T\/1.6T PCI-...
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想换一个手机,换什么型号呢?帮帮忙啊
值得一提的是,iPhone 内建位置感知器,只要将手机旋转,系统会自动将 虽然iPhone 不是 3G 手机,但它支援无线网路(WLAN 802.11b\/g),可以在无线网路热点连线上网,而手机内建的软体能让网路浏览更为方便。iPhone 内建 Mac OSX 上的浏览器「Safari」与 E-mail 程式「Mail」,介面与电脑版也极为相似,可完整显示 ...
兄弟们我这配置能一起组装吗?注意一下硬盘和内存条
可以一起安装 技嘉B450M GAMING 有4个SATA接口（可以安装图片上4块 西部数据黑盘）1个M.2 2280支持NVME协议（安装惠普那个固态硬盘）2个PCI-E X1，可通过单独购买扩展卡，扩展更多SATA接口
谁能给我几张非常漂亮的人物图?
我相册里的
已知AB两地相距240千米,某经销商每天要用汽车将x吨保鲜品一次性由A运...
（2）依据题意得出：y 汽=240×2x+240\/60×5x+200，=500x+200；y 火=240×1.6x+240\/100×5x+2280，=396x+2280．若y 汽＞y 火，得出500x+200＞396x+2280．∴x＞20；（3）上周货运量x=（17+20+19+22+22+23+24）÷7=21＞20，从平均数分析，建议预定火车费用较省．从折线图走势...
辟雪愈伤： SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点是CCC↓GGG,由图可知基因D中含有2个SmaⅠ的酶切位点.若图中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,则基因D就突变为基因d,且基因d只有一个SmaⅠ的酶切位点.杂合子的基因型为Dd,从杂合子中分离出如图的DNA片段,即基因D,而基因D会被SmaⅠ切割形成三个片段,其长度分别为537bp、790bp、661bp,所以产物中不同长度的DNA片段共有3种. 故选:B.
徐水县19319455788： 目的基因与标记基因的关系 - ？
辟雪愈伤： 1.目的基因:把需要研究的基因称为目的基因 2.标记基因:方便检测目的基因是否成功导入或表达的基因.
徐水县19319455788： 如何设计高效的植物sgRNA进行基因编辑 - ？
辟雪愈伤： 如何设计高效的植物sgRNA进行基因编辑 1、目的基因的获取 (1)目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因. (2)获取方法:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因.2、基因表达载体的构建 (...
徐水县19319455788： 有一段长度约为1000bp的DNA序列,如何证明其中的PRD区(大约第60 - 100bp)表达的蛋白与特定蛋白有作用? - ？
辟雪愈伤： 传统的方法是设计截短体突变.你可以设计2对引物,分别是(A)1-60bp(B),(C)100-1000bp(D)的引物,其中B引物与第二段序列初始有所重叠,C引物与第一段序列末尾有所重叠.先利用2对引物分别PCR得到2个片段,再以产物为模板,A,D引物进行PCR,得到缺失60-100bp序列的目的基因.随后进行蛋白质相互作用的验证(酵母双杂交,PULL-DOWN,CO-IP等,或者SPR等),证实在缺失了该段序列后,相互作用无法发生.你要证实的目的序列较小,难以单独表达目的蛋白(才10几个氨基酸),如果目的序列较大的话,可以单独表达这一段,进行相互作用的验证.
徐水县19319455788： ...(2)过程③往往通过PCR获得,此过程须添加引物,所以设计引物时一定要有一段已知___的脱氧核苷酸序列.(3)过程④顺利进行的前提之一是需要在目... - ？
辟雪愈伤：[答案] (1)由于基因的选择性表达,人生长激素基因只在垂体细胞中表达,不在其他细胞内表达,因此只能从垂体细胞提取人生长激素mRNA. (2)PCR技术设计引物时一定要有一段已知人生长激素基因的脱氧核苷酸序列. (3)分析图解可知,质粒上存在...
徐水县19319455788： 图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列 - ？
辟雪愈伤： (1)一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接.(2)限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG,其切割产生的是平末端.图1中DNA片段含有两个SmaⅠ酶切位点,被SmaⅠ酶完全切割后出现三个长度的片段,分别...
徐水县19319455788： 根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下: 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用... - ？
辟雪愈伤：[答案] (1)切割产生的DNA片段末端与EcoRI切割产生的相同 (2)E·coli (3)mRNA 单链DNA PCR(聚合酶链式反应) (4)动植物病毒 λ噬菌体的衍生物 (5)未处理的大肠杆菌吸收质...
徐水县19319455788： 基因探针指( ) A.与目的基因互补的特定单链DNA B.目的基因片段的特定DNA C.与目的基因相同的特定双链DNA D.某一个完整的目的基因 - ？
辟雪愈伤： A 基因探针就是一段与目的基因或DNA互补的特异核苷酸序列.基因探针通过分子杂交与目的基因结合,能从浩翰的基因组中把目的基因显示出来.
徐水县19319455788： 目的基因与标记基因产物 - ？
辟雪愈伤： 看你的描述,表达的应该不是融合基因.标记基因的产物不会影响到目的基因产物的表达.因为做瞬时表达的时候,会用空载体或是不加诱导剂的处理作对照,最后电泳的时候标记基因的产物和其他蛋白一样在实验组和对照组之间没有差异,有差异的带才是目的基因的产物.回补充问题:目的基因与标记基因的产物当然是混在一起的,表达所用的菌株自身的代谢产物也混在里面,这些不影响,你要检测的是目的蛋白,是在这个混合物里面的差异蛋白.如果你讲的是转基因的话,标记基因在转基因受体里面根本不会表达,因为质粒上标记基因的启动子应该是原核生物的启动子,受体一般都是真核生物,目的基因也要连上启动子才可以表达.
徐水县19319455788： 利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示).图中引物a、b为单链DNA样品片段,它是子链合成延伸的基础.请回答有关问题... - ？
辟雪愈伤：[答案] (1)A过程为变性过程,目的是使DNA分子解旋.(2)由于变性的温度是94℃,延伸温度为72℃,故PCR中所需要的酶是热稳定性DNA聚合酶(Taq酶).(3)从理论上推测,一个样品DNA分子经n次循环合成的DNA分子为2n个,而...
