紫外可见分光光度计怎么由吸光度计算含量?
由朗伯比尔(Lambert-Beer)定律可以得到:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,则光被吸收的就越多。用公式表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。
含量测定时所用波长通常选择被测物质的最大吸收波长以避免其他物质的干扰。根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1
A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2
∴C2=(A2/A1)*C1
由于标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)
故m2=(A2/A1)*m1
由此可计算出溶液中物质的含量m2。
由朗伯比尔(Lambert-Beer)定律可以得到:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,则光被吸收的就越多。用公式表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。
含量测定时所用波长通常选择被测物质的最大吸收波长以避免其他物质的干扰。根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2
∴C2=(A2/A1)*C1
由于标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)
故m2=(A2/A1)*m1
由此可计算出溶液中物质的含量m2。
根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。
如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征
常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:
A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。
扩展资料:
在分光光度分析中,比尔定律是一个有限的定律,其成立条件是待测物为均一的稀溶液、气体等,无溶质、溶剂及悬浊物引起的散射;入射光为单色平行光。
导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多,但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色性不纯所造成的;化学方面主要是由于溶液本身化学变化造成的。
比尔定律在有化学因素影响时不成立。解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。离解是偏离朗伯-比尔定律的主要化学因素。溶液浓度的改变,离解程度也会发生变化,吸光度与浓度的比例关系便发生变化,导致偏离朗伯-比尔定律。
溶液中有色质点的聚合与缔合,形成新的化合物或互变异构等化学变化以及某些有色物质在光照下的化学分解、自身的氧化还原、干扰离子和显色剂的作用等,都对遵守朗伯-比尔定律产生不良影响。
来自出射狭缝的光,其光谱带宽度大于吸收光谱带时,则投射在试样上的光就有非吸收。这不仅会导致灵敏度的下降,而且使校正曲线弯向横坐标轴,偏离朗伯-比尔定律。非吸收光越强,对测定灵敏度影响就越严重。并且随着被测试样浓度的增加,非吸收光的影响增大。当吸收很小时,非吸收光的影响可忽略不计。
参考资料来源:百度百科——朗伯比尔定律
我们可以根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。
在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下
A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2
∴C2=(A2/A1)*C1
因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)
故m2=(A2/A1)*m1
所以溶液中物质的含量m2。
由朗伯比尔(Lambert-Beer)定律可以得到:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,则光被吸收的就越多。用公式表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。
含量测定时所用波长通常选择被测物质的最大吸收波长以避免其他物质的干扰。根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2
∴C2=(A2/A1)*C1
由于标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)
故m2=(A2/A1)*m1
由此可计算出溶液中物质的含量m2。
根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱。溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多。
如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L(A为吸光度,C为溶液浓度,L为液层厚度)。E是物质在一定波长下的特征
常数,与对光吸收的灵敏度呈正相关。该公式适用于有色溶液和均匀非散射的吸光物质(如:固、液、气)。在进行含量测定的时候,我们往往选择被测物质的最大吸收波长来作为使用波长,以防止外界干扰。于是,我们可以根据公式可以计算测定管中物质的含量,过程如下:
A1=E1*C1*L1 A2=E2*C2*L2
A1/(E1*C1)=A2/(E2*C2)
由于标准液和待测液中的物质相同,故E1=E2∴C2=(A2/A1)*C1因为标准液和待测液的体积相等,物质含量m=C*V*M(M为相对分子质量,V为体积)故m2=(A2/A1)*m1所以溶液中物质的含量m2。
扩展资料
朗伯比尔定律适用范围
(1) 入射光为平行单色光且垂直照射
(2) 吸光物质为均匀非散射体系
(3) 吸光质点之间无相互作用
(4)辐射与物质之间的作用仅限于光吸收,无荧光和光化学现象发生
(5)适用范围:吸光度在0.2~0.8之间
参考资料来源:百度百科——朗伯比尔定律
分光光度计是怎么使用的
分光光度计使用方法:1、可见分光光度计开机,开机前,检查电源插座是否接上。2、按“GO TOλ”键,输入设定bai波长;四个比色皿,其中R位置放置参比试样,其余三个放入待测试样。将比色皿放入样品池内的比色皿架中,盖上样品池盖。3、将参比试样推入光路,按“ABS%”键,使仪器自动调零和置满度...
分光光度计是怎么使用的?
分光光度计使用方法:(1)仪器预热。打开样品室盖(光门自动关闭)。开启电源,指示灯亮,仪器预热20 min。选择开关置于“T”旋钮,使数字显示为“00.0”。(2)旋动波长手轮,把所需波长对准刻度线。(3)将装有溶液的比色皿放置比色架中,令参比溶液置于光路。(4)盖上样品室盖,调节透光率...
使用分光光度计应注意哪些问题
测定:轻轻拉动比色皿座架拉杆,使有色溶液进入光路,此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A,读数后,打开比色皿暗箱盖。关机:实验完毕,切断电源,将比色皿取出洗净,并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。2、分光光度计注意事项 (1)防止光电管疲劳:不测定时必须将比色皿暗箱盖打开,使光路切断...
怎样操作可见分光光度计
1.首先获得仪器的初始波长值 当756MC型紫外可见分光光度计开机自检结束后,用钬玻璃作光谱扫描,绘出在透射比T工作状态下的光谱图,用扩展功能FUNC30找出光谱的波谷值(VALLEYS)和波峰值(PEAKS)操作程序为:FUNC一30一ENTER,选择波谷值对波长进行分析。2.对钬玻璃的特征吸收峰进行检测 移去光路中的样...
分光光度计分光光度计怎么调波长
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怎样使用721型可见分光光度计
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区别:1、可见分光光度法事基于物质对可见光的吸收,紫外是基于物质对紫外光的吸收而的。2、光源不同:可见用钨丝灯,紫外用氘灯。3、吸收池不同:可见的吸收池由玻璃制成,紫外的由玻璃制成。4、紫外可见分光光度计测量的范围大些,由于各种不同光波发射的灯管不同,紫外和可见光所用就不同。一般紫外...
723n可见分光光度计怎么使用?求详解
1 .开机 1.1仪器在使用前应预热30分钟。1.2 在第一次使用仪器前,先确认仪器的工作电源,将打印机联接至主机上,检查仪器样品室有无遮挡光路的物品,确认后开启打印机的电源,然后打开主机电源等待仪器初始化。2 .操作 2.1 根据主菜单,输入选择项。(1.光度计模式;2.波长扫描;3.定量分析;4....
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紫外可见分光光度计的公式?
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咎盾复方: 我们可以根据朗伯比尔定律得出:当一束平行单色光通过一定液层厚度的有色溶液时,由于溶质吸收了光能,光的强度就会减弱.溶液浓度越大,液层越厚,入射光越强,光被吸收的就越多.如果用公式表示的话,就可以表示为表示为:A=E*C*L...
辛集市18254227867: 请问(可见分光光度计中的)吸光度的计算公式是什么?怎么计算吸光度?谢谢! - ?
咎盾复方:[答案] 吸光度的计算公式的原理是朗伯-比尔定律 A=lgI0/I=-lgT 其中A为吸光率 T为透光率 I0为入射光强 I为透过光强
辛集市18254227867: 紫外测定含量计算公式 ?
咎盾复方: 紫外测定含量计算公式是A=-log(I/I)=-lgT=kLc,A为吸收度,I为入射的单色光强度,I为透射的单色光强度,T为物质的透射比,k为吸收系数,L为被分析物质的光程,c为物质的浓度.分光光度法是光谱法的重要组成部分,是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法.常用的技术包括紫外-可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法等.
辛集市18254227867: 怎样用紫外可见分光光度计测量物质的透光率 - ?
咎盾复方: 用分光光度计测出物质的吸光度A,利用公式A=log1/T,即可测出透光率T
辛集市18254227867: 紫外可见分光光度计如何使用? - ?
咎盾复方: 原发布者:桶冰块可这 UV2600型紫外分光光度计操作规程一、开机1.打开仪器电源.2.打开电脑,点击UVAnalyst进入光谱分析软件.3.软件将自动搜索仪器端口,点击“联机”,软件与仪器联机成功.二、选择测试模式根据实验需求选择测试...
辛集市18254227867: 什么是色价1个色价是多少? ?
咎盾复方: 色价定义为单位质量原料的提取物的吸光度.是按照GB5525中2.2重铬酸钾溶液比色法执行.其色价是单位质量原料的提取物在1%浓度、以1cm比色皿在其最大吸收峰处的吸光度.计算方法为:Af/100mA为实测试样的吸光度f为稀释倍数m为试样质量.具体操作是准确称取0.1g试样,用适当的溶剂稀释于100ml容量瓶中,(可能需要再稀释至合适浓度),用紫外可见分光光度计于最大波长处,用溶剂作参比液,于1cm比色皿中测定其吸光度.然后计算色价15色价就是说按照上法计算出来的值为15:)
辛集市18254227867: 紫外分光光度法最后测得的是电流还是吸光度紫外分光光度计最后的构造是利用光电效应将光信号转化为电信号,那仪器最后所得到的数据是电流,还是已经... - ?
咎盾复方:[答案] 仪器内部将光信号转化为电信号,这个电信号是电流 这个电流经过一系列电路运算变成数字信号,这个数字信号在仪器内部CPU里进行计算就得到了吸光度值,这也就是用户看到的值.
辛集市18254227867: 752N紫外可见分光光度计上的字母Abs. T% Con. Factor SD 0% OA/100%什么意思? - ?
咎盾复方: 看看下面的对你有用!!!!!紫外可见分光光度计(752N)使用说明 (上海精密科学仪器有限公司) 其基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的.各种不同的物质都具有其各自...
辛集市18254227867: 用紫外分光光度计测定DNA吸光度值,如何计算其拷贝数?
咎盾复方: 1 OD值相当于50μg/mL双螺旋DNA 把你的样品检测OD得x 换算你的DNA分子量(是双链的)M 拷贝数=x*0.05/M*6.23*10(23次方)
辛集市18254227867: 分光光度法对物质进行含量测定的操作步骤和注意事项 - ?
咎盾复方: 一,在测量方法上如果是标准曲线的基体和样品的基体大致相同的情况,用标准曲线法:首先配制一系列浓度的所测物质的标准溶液,用分光光度计测的吸光度A值,作出标准曲线(最好估测所测物质的浓度,使标准曲线包含这个浓度),再...