高效液相色谱分离原理
高效液相色谱是一种分离技术，主要基于液体流动相与液体固定相之间的分配平衡。两种方法，液—液分配色谱法(Liquid-liquid Partition Chromatography, LLPC)和化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography, GPC)，都涉及试样在两相间的分配。LLPC和GPC的关键区别在于流动相对分离顺序的影响，LLPC流动相对K值的影响较大，而GPC中流动相的影响较小。LLPC分为正相和反相，正相流动相极性小于固定液，反相则相反。
LLPC的一个挑战是，尽管要求流动相与固定相极性差异明显，但固定液仍可能在流动相中有微量溶解，以及流动相通过色谱柱时的冲击可能导致固定液流失。为克服这些缺点，化学键合固定相在70年代末期发展，如今应用广泛。相比之下，液—固色谱法（如硅胶、氧化铝等吸附剂）利用物质的吸附作用进行分离，溶质分子与吸附剂表面活性中心的竞争吸附影响分离结果。
离子交换色谱法(ION-EXCHANGE Chromatography)则基于离子交换树脂上的离子与流动相中相应离子的可逆交换。例如，阴离子交换剂会与带负电的溶质离子交换，形成具有不同亲和力的离子对，从而实现分离。离子对色谱法则是通过形成疏水型离子对，控制溶质离子的保留行为，特别适用于复杂混合物如生化试样的分离，如核酸、核苷和药物等。
离子色谱法使用离子交换树脂和电解质溶液，通常配合电导检测器，通过抑制柱消除背景离子影响。空间排阻色谱法(Steric Exclusion Chromatography)则利用凝胶作为固定相，分离依据分子大小而非相互作用力，大分子受阻，小分子保留值大，最先和最后出现在色谱图上。
扩展资料
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
高校液相色谱分离原理是什么?
分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离，分离过程是一个分配平衡过程。高效液相色谱主要有4种，下面分别描述一下。1、液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂，它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强，K值越大保留时间越长。2、液-液分配色谱。顾名思义，它...
高效液相色谱法的分离原理是什么?
（2）分离：将样品通过色谱柱进行分离，色谱柱中的固定相和流动相之间存在相互作用力，使得各组分能够按照不同的速度移动并实现分离。（3）检测：对分离后的各组分进行检测，常见的检测器有紫外-可见光谱仪、荧光检测器和电导检测器等。（4）数据处理：记录检测结果并进行处理，得到各组分的含量和分布情况...
高效液相色谱法( HPLC)的原理是什么?
1. 高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于化学分析和生物化学领域的分析技术，主要依赖于样品中各组分在固定相（通常为填充有固体颗粒的色谱柱）和流动相（液体溶剂）之间的相互作用来实现分离。2. HPLC的基本步骤包括样品的制备、进样、分离、检测和数据处理。样品的制备涉及将待测样品转化为适合于色...
反相高效液相色谱法的分离机理是什么?
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）使用亲水性的固定相和疏水性的移动相，利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离。一、基本原理：1.疏水性固定相：反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料，如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链，使分析物在移动相中具有亲水性，与固定相表面发生疏水作...
高效液相色谱的原理
因此，不同溶质在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现溶质的分离。高效液相色谱的分离效果受到多种因素的影响，如固定相的种类、流动相的组成和流速、柱温等。固定相的种类直接影响溶质与固定相之间的相互作用力，从而影响溶质的分离效果。流动相的组成和流速则会影响溶质在固定相和流动相之间的分配系数...
高效液相色谱法原理
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测。2、高效液相色谱法有“四高一广”的特点：（1）高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大...
高效液相色谱法的原理是什么?
混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。按两相状态分类：气体为流动相的色谱称为气相色谱（GC）G-S & G-L；液体为流动相的色谱称液相色谱（LC）L-S 和L-L。
高效液相色谱法的原理
原理：流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，服从于高效液相色谱计算公式：式中，cs—溶质在固定相中浓度；cm—溶质在流动相中的浓度； Vs—固定相的体积；Vm—流动相的体...
高效液相色谱的分离原理
会造成固定液流失。上世纪70年代末发展的化学键合固定相（见后），可克服上述缺点。 流动相为液体，固定相为吸附剂（如硅胶、氧化铝等）。这是根据物质吸附作用的不同来进行分离的。其作用机制是：当试样进入色谱柱时，溶质分子 (X) 和溶剂分子(S)对吸附剂表面活性中心发生竞争吸附（...
高效液相色谱仪(HPLC)原理及应用
液相色谱的分离机制包括了丰富的类型，如液固吸附色谱、液液分配色谱、离子交换色谱、离子对色谱和分子排阻色谱，每种方法都针对特定的分离需求设计，如液固吸附色谱利用固体吸附剂，液液分配色谱则通过两种不溶液体间的分配差异进行分离，而离子交换色谱则依赖离子的亲和性差异。HPLC的精密结构与核心组件 一...
乜云瑞欣： 不同色谱柱的分离机制是不同的.比如反相柱C4/C18是根据物质的疏水性不同分离的 凝胶柱是根据分子大小不同分离的 离子柱是根据带电性质、数量不同分离的 等等
当涂县18628317280： 高效液相色谱法的原理是什么? - ？
乜云瑞欣：[答案] 转载自分析测试百科网:“高效液相色谱仪结构及原理”高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填...
当涂县18628317280： 高效液相色谱分离原理有哪些呢? ？
乜云瑞欣： 高效液相色谱分离原理编辑高效液相色谱液-液分配(Liquid-liquidPartitionChromatography)及化学键合相色谱(ChemicallyBondedPhaseChromatography)流动相和固定相都是液体
当涂县18628317280： 高效液相色谱分析法的原理是什么? - ？
乜云瑞欣： 用一句话概括叫:相似相溶. 具体的是这样描述:由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统,然后输出,经流量与压力测量之后,导入进样器.被测物由进样器注入,并随流动相通过色谱柱,在柱上进行分离后进入检测器,检测信号由数据处理设备采集与处理,并记录色谱图.废液流入废液瓶
当涂县18628317280： 液相色谱法的分离原理是什么? - ？
乜云瑞欣： 液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC).反相色谱法一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、异丙醇、乙腈、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调...
当涂县18628317280： HPLC原理是什么 - ？
乜云瑞欣： (通常用的最多的是第二种,即分配平衡,)色谱分离原理 高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法. 1.液固色谱法 使用固体吸附剂,被分离...
当涂县18628317280： 高效液相色谱仪的原理谁知道? - ？
乜云瑞欣： 高效液相色谱仪的系统组成、工作原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成.储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来.
当涂县18628317280： 高效液相色谱的原理是什么? ？
乜云瑞欣： 在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低
当涂县18628317280： 高效液相色谱法是如何实现高效和高速分离的 - ？
乜云瑞欣： 高效液相色谱法是利用物质在载体和固定相中的分配系数的差别来高效和高速分离被测物质的.
当涂县18628317280： 高效液相的原理,最好详细点 - ？
乜云瑞欣： 高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9'107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使...
