转座子标签技术的应用实例

作者&投稿:尹秋 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
什么是转座子?转座子标签法转移基因的原理是什么?~


转座子是存在于质粒上的一段可以编码转座酶基因的DNA序列 他上面带有某种筛选标记,比如抗性基因,他可以在整个基因组的任意位置插入,导致该位置的原有基因因插入转座子而发生插入突变,然后通过筛选标记,对突变后的菌株进行筛选,就能得到相应的、在整个基因中的不同位置的转座突变体。是一种很有效、快速、高通量、全基因组水平的突变技术,可以通过检测插入位点,对相关基因进行功能研究。

1938年细胞遗传学家McClintock首先在玉米中发现了可自主移动的DNA片段,并命名为转座子,后来又陆续在细菌、酵母、果蝇、金鱼草和拟南芥等其他植物中发现了内源转座子。说明转座子广泛存在于从原核细菌到真核的高等动植株的细胞中。转座子分为两类:逆转座子(Ⅰ类因子)和转座子(Ⅱ类因子)。逆转座子首先在动物和酵母菌基因组中发现,但许多证据已表明它们几乎存在于苔藓、石松、蕨类、裸子植物和被子植物等所有植物的基因组中,并且是植物基因组中一个很大的组成部分。逆转座子的增殖以RNA为中介,且拷贝数较多。研究表明,逆转座子在很大程度上是侵略性的,通常情况下逆转座子被严格控制,但在胁迫条件下,逆转座子可被激活。果蝇和酵母的逆转座子在正常的生命周期中就具活性,烟草逆转座子Tntl也可在拟南芥中转座;1999年Sato等人利用Hirchick建立的水稻逆转座子Tos17基因敲除体系分离了6个水稻knl-型同源异型框基因,发现了引起水稻植株矮化的突变基因OSH15。Ⅱ类因子(即通常所说的转座子)只通过由DNA到DNA的方式增殖,包括细菌的插入序列(insertion sequence);复合转座成分(composite transopson);Tn转座家族(Tn family);可转移噬体(transposable phages);酵母的Ty(transposable element in yeast);果蝇的copia等转座子成分及高等植物的转座子。目前研究得比较清楚且应用较多的是玉米的Ac/Ds、Spm/dSpm和金鱼草的Tam3转座子。植物的转座子,其结构类似于细菌的复合成分,以Ac/Ds为例,Ac全长4.5kb,两端为11bp反向重复序列,Ds的大小为0.4-4kb,一般认为Ds是Ac缺失的结果,Ac单独存在便可引起突变,但变异不稳定,Ds在有Ac存在的条件下,才会引起插入突变。




转座子研究进展
例如,转座子被应用于基因组进化研究,如发现的Alu因子在人类进化中具有重要作用。此外,转座子标签法已成为植物基因研究的有效工具,用于克隆突变基因。转座子还影响基因同义密码子的选择,并在哺乳动物基因功能研究中展现出了前景。

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转座子的研究进展
LTRs反转录转座子是具有两侧长正向重复末端序列的片段,中间部分序列包含了一个或几个ORFs(开放性阅读框架,能编码TEs复制、转座所必需的蛋白质),它包括有Gypsy Ty3家族、Copia Ty1家族和Pao因子等。不含长末端重复的TEs有时称为反转座子,能编码反转录酶但缺乏整合酶,包括有I、F、G、Jockey和Doc...

笔记本电脑散热问题
有些游戏,像GTA4,战地3什么的,极品16什么的需要处理大量的数据进行分析,需要CPU的计算,所以温度就会很高。这温度正常的。我玩使命召唤8 处理器,显卡温度都是80度左右。 如果觉得高,可以买个抽风散热器,去淘宝一下,很多有用的,能降低20度左右。转发 ...

我的电脑怎么了???
电脑刚开机时风扇是会高速旋转一会,这时如果风扇缺油了会很响,进了系统后声音就小得多了。在排除了风扇因没上紧导致的震动和有物体碰到扇叶而产生的响声后,最有可能的就是缺油引起的了,加油方法很简单,首先把风扇从座子上取下(废话),然后看看风扇背面(少数在前面)是不是粘有一块圆形的塑料...

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怀宁县13518251775: 已知一个物种的基因组,怎么克隆目的基因 -
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怀宁县13518251775: 如何利用转座子序列信息获得完整的目基因? -
红待络欣: 转座子是染色体上一段可移动的DNA片段,它可从染色体的一个位置跳到另一个位置.当转座子跳跃而插入到某个功能基因时,就会引起该基因的失活,并诱导产生突变型,而当转座子再次转座或切离这一位点时,失活基因的功能又可得一恢复...

怀宁县13518251775: 转座子标记在研究生物基因组中有什么用
红待络欣: 转座子是存在于质粒上的一段可以编码转座酶基因的DNA序列 他上面带有某种筛选标记,比如抗性基因,他可以在整个基因组的任意位置插入,导致该位置的原有基因因插入转座子而发生插入突变,然后通过筛选标记,对突变后的菌株进行筛选,就能得到相应的、在整个基因中的不同位置的转座突变体.是一种很有效、快速、高通量、全基因组水平的突变技术,可以通过检测插入位点,对相关基因进行功能研究.

怀宁县13518251775: Tol2转座子系统在转基因动物中的应用有哪些呢?
红待络欣: 首先构建以Tol2转座子为基础的enhancertrap载体,报告基因选用GFP或RFP,最小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼

怀宁县13518251775: 在原核生物中如何利用转座子研究基因功能? -
红待络欣: 1转座因子或转座子是一类在很多后生动物中(包括线虫、昆虫和人)发现的可移动的遗传因子. 一段DNA顺序可以从原位上单独复制或断裂下来,环化后插入另一位点,并对其后的基因起调控作用,此过程称转座.这段序列称跳跃基因或转...

怀宁县13518251775: 真核生物中存在哪些类型的转座子 -
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怀宁县13518251775: 真核生物中转座子的两大类型,各自的转座方式及生物学意义. -
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怀宁县13518251775: 物流信息技术中的电子标签的含义,作用,目前典型的使用案例? -
红待络欣: 电子标签在现代物流中正发挥越来越大的作用.与传统出库方式相比,利用电子标签拣货可以实现无纸化作业,大大提高作业效率和准确率,使用户的出库时间大大...

怀宁县13518251775: ①RFID将是改变未来的5大颠覆性技术之一 是否正确?说明理由: ②列出3种你了解的RFID应用实例! -
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