CFSE标记活细胞的特点简介
作者&投稿：桓封 （若有异议请与网页底部的电邮联系）
CFSE标记的细胞在体内观察时具有长时效，可持续数周，因此在活体细胞检测实验和荧光电镜观察细胞长期活动的研究中被广泛应用。染料进入细胞后，会在细胞膜、细胞质和细胞核中分布，其中细胞核的荧光强度最强。值得注意的是，CFSE标记过程对细胞的增殖能力没有负面影响，这一点使得这种方法更为安全，因为它避免了使用放射性同位素可能带来的潜在风险。
总的来说，CFSE标记活细胞的方法操作简便，无需担心安全问题，能够提供快速、准确和安全的实验数据，是生物学研究中不可或缺的工具之一。
长兴霍路迪： 一、MTT比色: MTT比色是一种目前被广泛采用的检测细胞生长和存活的方法,其原理是外源性MTT(四唑盐)可被活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原成难溶的蓝紫色结晶物并沉淀在细胞中,而死细胞无此功能,DMSO(二甲基亚砜)能溶解...
滴道区15810232384： 绿色荧光探针cfse为什么 标记的是活细胞 - ？
长兴霍路迪： 该染料是被活细胞主动摄取进入细胞.然后随细胞分裂,每个细胞内的染料数量减半.所以用来作为测量细胞增殖分裂的染料
滴道区15810232384： 噬菌体侵染细菌中,为什么是先标记噬菌体后培养噬菌体,而不是反过来? - ？
长兴霍路迪： 噬菌体属于病毒,不具有细胞结构,不能进行独立的代谢活动,必须寄生在活细胞体内.在本实验中,先培养细菌使其具有放射性,再用噬菌体侵染己标记的细菌,以获得被标记噬菌体.如果反过来则不能获得标记的噬菌体.
滴道区15810232384： (5)若某研究小组计划利用放射性同位素标记法探究甲型H1N1流感病毒的遗传物质是DNA - ？
长兴霍路迪： 这两组细胞是分开的.如果病毒的遗传物质是DNA,那用含同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸为原料培养活细胞的那一组病毒有放射性,另一组没有放射性;如果病毒的遗传物质为RNA,那用含同位素标记的尿嘧啶核糖核苷酸为原料培养的活细胞那一组病毒有放射性,另一组没有放射性.
滴道区15810232384： 细胞培养的特点 - ？
长兴霍路迪： 1、能长期传代,保持活性,便于监控检测结构功能和生命活动. 2、培养条件可以人为的控制便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响 3、可用于各种观察和检测手段研究活细胞的变化(变异、分化).可从细胞水平开展亚细胞结构和代谢分子的表达. 4、研究范围和细胞来源广泛,选择性广. 5、不同代次细胞可长期保存,既可开展同代次不同条件和方法研究,又可观察不同代次的动态变化. 6、耗资少、经济、成本低、可大量培养,利于生物制品的生产.
滴道区15810232384： 如何观察蛋白质在活细胞内的分布和功能 - ？
长兴霍路迪： 如何观察蛋白质在活细胞内的分布和功能 荧光蛋白最常用做监测完整细胞和组织内基因表达及蛋白定位的理想探针标记.广泛应用于转基因动物的研究、融合标记、基因治疗、蛋白在活细胞内功能定位及迁移变化,病原菌侵入活细胞的分子过程等.利用它的荧光特点将该基因转入细胞内稳定表达并监测就能确定目的蛋白在细胞内的分布. 蛋白质的空间分布指的是其空间构象分布,即蛋白的三维结构在空间上的分布.是在分子水平上的,当然检测不到.研究蛋白质构象的方法有x射线衍射法——测定蛋白质晶体结构;荧光偏振法——研究溶液中蛋白构象的方法,常结合荧光探针使用.
滴道区15810232384： 什么是活细胞荧光? - ？
长兴霍路迪：[答案] 没有听说过这个术语,不过应该很好猜测,就是用荧光技术标记活细胞,可以是只有活细胞才能吸收的荧光物质,该物质被活细胞吸收后,该活细胞就发出荧光可用于观测了.而死细胞不吸收就观测不到荧光,可以区分细胞死活.
滴道区15810232384： 蛋白质示踪法用什么标记 - ？
长兴霍路迪： 追踪活细胞中某种蛋白质合成与分泌的过程一般采用同位素示踪技术.其基本步骤是:①将放射性同位素标记的氨基酸(3H-亮氨酸)加到细胞培养基中,在很短时间内使这些与未标记的相应氨基酸化学性质相同的标记分子进入细胞(称为脉冲标记);②除去培养液.
滴道区15810232384： 蛋白质的活细胞内定位有哪些方法 - ？
长兴霍路迪： 1.对活细胞和组织或细胞组织切片进行连续断层扫描,能获得精细的单个细胞或一群细胞或所观察的局部组织的各个层面结构(包括细胞特异结构-如细胞骨架、染色体、细胞器和细胞膜系统,样品的深层结构)和完整的3D图像; 2. 细胞内离子...
滴道区15810232384： 活细胞荧光染色后细胞形态变圆是什么原因 - ？
长兴霍路迪： 不固定直接染色,细胞就会变圆,因为染色液的渗透压和细胞质不一样 可以选择用CFSE染色后,铺板.过夜,等细胞重新贴壁后,再用PI染色,你应该是要看双染的效果,这个比较合适.用荧光显微镜观察的时候可以先观测拍照再固定,避免甲醇影响了细胞状态让它贴的不牢,或者不固定直接拍照,PI染色效果一个小时影响不大.
