PCR反应原理是什么？
PCR（聚合酶链式反应，Polymerase Chain Reaction）是一种常用的分子生物学技术，其目的是在体外复制特定的DNA片段，从而使之数量显著增加。PCR反应的原理可以分为以下几个步骤：
初始化（Denaturation）：PCR反应的第一步通常在较高的温度下进行（通常约94-95°C），在这个温度下，双链DNA会解链成为两条单链。
退火（Annealing）：在降低的温度下（通常约50-65°C），特异的引物（primer）会结合（退火）到目标DNA的互补序列上。每个引物都设计成与目标DNA的一侧（上游或下游）相匹配。
延伸（Extension/Elongation）：在较高的温度下（通常约72°C，这是一般用于PCR的Taq DNA聚合酶的最佳活性温度），DNA聚合酶从引物开始沿着模板链合成新的DNA链。在这个过程中，每个单链DNA都复制成为两个双链DNA。
这些步骤在一个PCR反应中会进行多轮（通常30-40轮），每轮都会使目标DNA片段的数量翻倍。这样，经过数轮PCR，你就可以从一个非常小的样本中获取大量的目标DNA片段。
PCR是现代生物学和医学的重要工具，被广泛用于基因克隆、基因编辑、疾病诊断（包括对某病毒的检测）和法医学等领域。
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变性：加热使模板DNA在高温下（94℃左右）双链间的氢键断裂而形成两条单链。
退火；使溶液温度降至50~60℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合。
延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸（dNTP），按5'一3’方向复制出互补DNA。
扩展资料
PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg离子）。
引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。
模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制。
缓冲液的成分最为复杂，除水外一般包括四个有效成分：缓冲体系，一般使用HEPES或MOPS缓冲体系；一价阳离子，一般采用钾离子，但在特殊情况下也可使用铵根离子。
二价阳离子，即镁离子，根据反应体系确定，除特殊情况外不需调整；辅助成分，常见的有DMSO、甘油等，主要用来保持酶的活性和帮助DNA解除缠绕结构。
参考资料来源：百度百科-PCR技术
参考资料来源：百度百科-聚合酶链式反应
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