多顺反子表达元件——一次满足你N个愿望
在分子克隆领域，如何同时表达多个基因？常规的克隆如获得开放读码框（ORF）并表达已被广泛研究，但若要同时表达多个基因，常规方法存在局限性。为解决这一问题，多顺反子表达元件成为理想选择。
多顺反子表达元件包括IRES元件和2A多肽元件，它们能够将多个基因串联表达于同一转录本中。IRES元件允许核糖体在mRNA内部的任意位置结合，从而实现不依赖帽子结构的翻译起始。而2A多肽元件通过自切割机制，将两个基因表达产物分离，显著提高串联基因表达效率。
然而，多顺反子元件并非完美无缺。IRES元件的较大块头以及后基因表达强度下降是其主要缺陷。相比之下，2A多肽元件在短小、高效和等量表达方面展现出优势，但前一个蛋白的C端会连接一小段外源多肽，后一个蛋白N端会多一个脯氨酸，这可能影响蛋白质功能。此外，不同2A多肽在不同物种或细胞类型中的切割效率存在差异，使用时需谨慎。
多顺反子元件在生物研究中具有广泛的应用。例如，在制作iPS细胞时，通过多顺反子整合多个转录因子，简化转染过程，提高获得干细胞克隆的几率。在监测蛋白表达时，将靶蛋白与荧光蛋白隔开，通过检测荧光强度间接了解靶蛋白状态。此外，利用多顺反子元件构建的强表达筛选载体，通过抗生素筛选，筛选出表达足够高的细胞克隆。
综上所述，多顺反子表达元件为同时表达多个基因提供了有效途径，其在生物研究和生物技术领域展现出广泛的应用潜力。在选择和应用多顺反子元件时，需充分考虑其优点与局限性，以达到最佳实验效果。
原核微生物和真核微生物遗传物质的异同不要只说一个有
原核微生物和真核微生物的遗传物质在结构和调控机制上存在显著差异。首先，原核生物常常表现为多顺反子，它们的基因组中存在5'帽子和3'尾巴的结构，以及顺式作用元件和反式作用因子，这些元素控制着基因的启动和表达。它们的基因通常在多个位置同时开始，通过终止子来结束转录过程。相比之下，真核生物主要...
IRES和P2A二者有什么不同?该如何选择?
在2A序列上添加GSG或SGSG可提高剪切效率，促进基因表达。2A肽翻译效率高，接近90%，前后蛋白表达水平差异在2倍左右，适合串联表达多个蛋白。IRES的大小超过500nt，元件较大，约占据0.6kb的序列空间。这在使用有限克隆能力的含IRES病毒载体或多个IRES用于多顺反子质粒时可能受限。IRES翻译效率较低，通常...
顺反子的其转录产物分类
顺反子DNA转录后得到基因转录产物mRNA，通常分为单顺反子和多顺反子。 单顺反子（monocistron）：真核基因转录产物为单顺反子，即一个基因编码一条多肽链或RNA链，每个基因转录有各自的调节元件。真核生物mRNA（细胞质中的）一般由5'端帽子结构、5'端不翻译区、翻译区（编码区）、3'端不翻译区...
多顺反子和单顺反子的区别
比如C.elegans；单顺反子是真核生物基因转录产物，所以主要存在于真核生物中。3、特点不同：多顺反子转录形成的一簇mRNA可以编码多个多肽链；单顺反子转录形成的一条mRNA模板只含有一个翻译起始点和一个终止点，因而一个基因编码一条多肽链或RNA链，每个基因转录有各自的调节元件。
一文解读:质粒载体及各个组成元件
WPRE是一段顺式作用的RNA元件，为转录后调控序列，放在多聚腺苷酸化信号之前可显著增加mRNA的表达水平和翻译效率，进而增强基因的表达，并且WPRE插入病毒载体中还可以大大提升病毒包装的滴度。6. IRES序列 IRES元件非常有用，通常在双顺反子载体中应用最多。完整观察一个质粒图谱 Ps：如有错误或者疑问，...
单顺反子的介绍
单顺反子（monocistron）：真核基因转录产物为单顺反子，即一条mRNA模板只含有一个翻译起始点和一个终止点，因而一个基因编码一条多肽链或RNA链（真核生物基因也有转录为一条mRNA,但产生多种肽链结构的情况，这是由于外显子组合具有一定灵活性），每个基因转录有各自的调节元件。
一文解读:质粒载体及各个组成元件
调控元件如Kozak序列（真核mRNA的翻译启动器）和poly(A)尾（真核mRNA稳定序列），遵循特定的规则和信号序列。WPRE序列是顺式调控元件，提升基因表达效率和病毒包装效果，而IRES序列在双顺反子载体中帮助核糖体重新启动翻译。质粒图谱中常见的其他元素还包括pUC ori（复制起始）、PBS（引物结合）、RRE（增强...
抗体表达CHO细胞株构建策略与优化
表达载体的设计需要适应表达系统， 以增加抗体的表达， 增加细胞稳定性， 提高转录， 分泌， 选择， 整合的效率。（1）多种表达载体形式 单顺反子载体， 多启动子表达载体， 以及IRES或Furin-2A元件介导的多顺反子载体等。（2）表达载体元件选择 启动子与增强子：CMV启动子、 SV40启动子、 EF-1α...
多顺反子的结构系统
尤其是，该表达系统包含一个多顺反子载体，能够在真核宿主细胞中表达功能抗体，其中载体在5′-3′方向上至少包含下面的可操作连接的元件：在真核细胞可操作的启动子；编码至少抗体轻链可变区的DNA序列；内部核糖体进入位点(IRES）；以及至少一个编码抗体重链的DNA序列。也公开了包含多顺反子表达载体的...
比较原核与真核基因组结构特点。
(2)真核基因组存在大量的重复序列；(3)真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别；(4)真核基因组的转录产物为单顺反子；(5)真核基因是断裂基因，有内含子结构；(6)真核基因组存在大量的顺式作用元件，包括启动子、增强子、沉默...
宋弦益心： 大多数时候成立,但严格来讲不准确.第一是多顺反子,原核生物的mRNA可以表达多个蛋白;第二是Readthrough的情况,到了终止子该停的不停,于是蛋白也可以有长有短.
会东县15862068960： 单顺反子和多顺反子是什么意思?有什么区别? - ？
宋弦益心： 单顺反子(monocistron):真核基因转录产物为单顺反子,即一个基因编码一条多肽链或RNA链,每个基因转录有各自的调节元件. 在原核细胞中,通常是几种不同的mRNA连在一起,相互之问由一段短的不编码蛋白质的间隔序列所隔开,这种mRNA叫做多顺反子mRNA.这样的一条mRNA链含有指导合成几种蛋白质的信息. 参考
会东县15862068960： 基因与顺反子 - ？
宋弦益心： 遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子(cistron). 真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子(single cistron) . 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质,为多顺反子(polycistron)
会东县15862068960： 一个启动子到终止子的序列可以同时表达两个基因吗? 恭请举例说明 - ？
宋弦益心： 可以. 在原核生物中,一般都是多顺反子,就是一个启动子可以启动多个基因. 在真核生物中,一般是单顺反子.但是在融合表达载体中,前面的强启动子可以启动两个融合或者不融合的基因.比如将GFP(绿色荧光报告蛋白)加在基因的N端或者C端,以便于目的基因的检测.
会东县15862068960： 多顺反子的结构系统 - ？
宋弦益心： 此处描述的是一个新型的表达系统,用以从一个单一多顺反子构建体中产生目的多基因产物.尤其是,该表达系统包含一个多顺反子载体,能够在真核宿主细胞中表达功能抗体,其中载体在5′-3′方向上至少包含下面的可操作连接的元件:在真核细胞可操作的启动子;编码至少抗体轻链可变区的DNA序列;内部核糖体进入位点(IRES);以及至少一个编码抗体重链的DNA序列.也公开了包含多顺反子表达载体的哺乳动物细胞,和一种在用多顺反子表达载体转染的哺乳动物细胞中产生功能抗体的方法.
会东县15862068960： 基因八里面的顺式配置、反式配置、顺反子是什么东东?？
宋弦益心： 真核生物才有顺式作用元件和反式作用因子 顺式作用元件:包括启动子,增强子,衰弱子等等,位于基因旁侧的调控基因表达的序列,与反式作用因子相互作用调控基因表达. 反式作用因子:与顺式作用元件核心序列直接或间接识别、结合,与顺式作用元件相互结合参与基因表达调控. 顺反子:是与蛋白质对应的结构基因,分为原核的多顺反子和真核的单顺反子.
会东县15862068960： 一条信使RNA能翻译出几种肽链? - ？
宋弦益心： 一种,不过细菌具有多聚核糖体,可以一次性转录n条肽链,但是全都一样.
会东县15862068960： 原核RNA聚合酶与真核RNA聚合酶转录活性的异同 - ？
宋弦益心： 原核生物中只存在一种RNA聚合酶.转录过程比较简单,一个信号就可以引发基因表达,转录出一个多顺反子mRNA.真核生物中存在三种RNA聚合酶,即RNA聚合酶1、2、3.RNA聚合酶1主要转录核糖体RNA,RNA聚合酶2负责转录编码蛋白的RNA,RNA聚合酶3转录转运RNA(tRNA).转录过程更为复杂,一个基因只能转录单个顺反子mRNA.
会东县15862068960： 多顺反子的基因结构 - ？
宋弦益心： 来自德国科隆大学遗传学系的JoëlSavard、DiethardTautz等人发现拟谷盗(Tribolium,一种昆虫)中的一个分节基因(Segmentationgene,负责昆虫身体分节的基因)能够产生一种可编码多种保守肽的多顺反子mRNA. 昆虫的分节基因是早期...
会东县15862068960： 一条多肽链中可能出现多个起始密码子和多个终止密码子吗? - ？
宋弦益心： 多肽链是氨基酸构成的,上面没有密码子.密码子是位于信使RNA(mRNA)链上的. 真核生物的mRNA属于单顺反子mRNA,一条mRNA链上只有一个起始密码子和一个终止密码子. 原核生物的mRNA属于多顺反子mRNA,一条mRNA上有多个起始密码子和相应的多个终止密码子.
