活性氧ROS荧光探针

作者&投稿:栾定 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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探索活性氧世界:三种荧光探针的卓越功能


1. DCFH荧光探针(货号:HCQ000679)


DCFH,即2',7'-二氯二氢荧光素,以其卓越的性质成为了ROS检测的明星探针。当它在细胞内遭遇ROS的氧化,会转化为亮绿色的2',7'-二氯荧光素,展现出极高的荧光强度。这种脂溶性和透膜性的特性使其成为细胞内ROS监测的得力助手。


图1. DCFH的化学结构揭示了其神奇转变


2. 二氢罗丹明123(货号:HCM0016B)


二氢罗丹明123(DHR 123)是一款敏感的荧光探针,对过氧化物和过氧亚硝酸盐等ROS具有卓越的响应。在被ROS激活为高荧光的罗丹明123之前,它保持着静默。通过500nm和536nm的荧光光谱,或者500nm的吸收光谱,可以精准追踪其氧化过程。


图2. DHR 123的荧光光谱揭示了其活性转变的信号


3. DCFH-DA探针(货号:SS1967)


DCFH-DA,2,7-二氯荧光素二乙酸酯,作为一款多功能探针,不仅能检测ROS,还能追踪NO,是评估细胞整体氧化应激的重要工具。在百万至二千万/毫升的细胞浓度下,它提供了一种直观的测量手段。


应用实例:揭示H358细胞的动态变化


在实际应用中,如图3所示,DCFH-DA帮助我们观察H358细胞在不同处理下的ROS生成。对照组的细胞在未受干预时,而阳性对照则经历不同浓度的H2O2刺激。通过对比,我们看到了细胞在不同化合物作用下IC50值的明显变化,这为我们提供了深入理解细胞抗氧化防御机制的窗口。


共聚焦显微镜下,DCFH-DA的荧光成像让每一个细节都清晰可见。




为什么活性氧的氧化性大于氧气
活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)是指一类高度活泼的氧化性分子,包括超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(·OH)等。这些分子的氧化性大于氧气,主要原因有以下几点:1. 活性氧分子具有未成对电子,因此它们具有更强的氧化还原能力。2. 活性氧分子的化学键比氧气更不稳定,因此更...

ros染色完必须立马拍照么
是。ros主要包括活性氧族如超氧阴离子自由基,所以染色完必须立马拍照。ROS染色是活氧检测,组织冰冻切片不能用固定液固定,最好是新鲜组织,ROS阴性细胞仅有较低的荧光强度,ROS阳性细胞有较强的红色荧光。

求助关于用氧化敏感探针DCFH-DA检测细胞内ROS
检查培养在生长培养液或简单缓冲液内的未处理加载细胞(对照)的荧光。在健康细胞内,细胞内酶和\/或天然抗氧化剂会清除这些氧自由基。经过染料加载复原时间后,健康细胞应该表现出低水平的荧光信号,且在整个实验期间相对稳定。然而,逐渐增加(由于自氧化)或降低(由于细胞内染料丧失或光淬灭)也有可能观察...

ros染色原理
在病理条件下,由于活性氧的产生和清除失去了正常平衡,会对组织细胞造成损伤。二氢乙锭(Dihydroethidium, DHE),可自由透过活细胞进入细胞内,并被细胞内的ROS氧化,形成氧化乙锭;氧化乙锭可掺入染色体DNA中,产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。检测ROS水平常用于...

活性氧(reactive oxygen species , ROS)
所以,利导思维对我们有双重的保护作用,一方面使我们的细胞更年轻,使之更能承受活性氧(ROS)的伤害,另一方面,降低了活性氧(ROS)的数量。1 对核酸的氧化损伤 受到氧化损伤后的DNA可能会发生断裂、突变以及对热稳定性改变等,从而严重影响了遗传信息的正常转录、翻译过程。 2 对蛋白质的氧化...

【文献解读】噻氯匹定通过上调氧化应激信号通路诱导斑马鱼胚胎发育毒性...
研究指出,噻氯匹定的使用可能增加糖尿病患者血栓风险,但同时也潜在地引发肝毒性。研究人员利用斑马鱼模型深入探讨了这一问题,发现药物暴露导致了显著的肝脏毒性和发育毒性,其核心机制在于激活了氧化应激和炎症反应链。氧化应激是关键,其通过过量的ROS(活性氧物种)积累,干扰细胞增殖和发育过程。<\/斑马鱼...

有机合成ros什么意思
含氧的化学反应性化学物质。活性氧是含氧的化学反应性化学物质。实例包括过氧化物,超氧化物,羟基自由基,单线态氧,和α-氧。ROS是指活性氧自由基,就是氧化性很强的一些含氧化合物及基团。

Nature突破!植物胞外过氧化氢受体首次被发现!
过氧化氢(双氧水,H2O2)作为生物体内最主要的活性氧(ROS)成分,发挥着重要的生物学功能。细胞通过NADPH氧化酶等在胞外产生过氧化氢(eH2O2),并进一步诱导下游信号转导,调控生物的生长、发育及其对外界胁迫的响应。在植物中,胞外过氧化氢在多种生理过程中发挥关键作用,如根系发育、花粉管生长、器官...

ros活性氧是什么活性氧是什么
3、活性氧化学反应活性强、存在寿命短, 如O2 的平均寿命为2μs 、·OH 自由基200 μs 、O-2 自由基5 s 。4、正是由于它们寿命短、反应活性高, 到目前为止除了H2O2 以外,其它活性氧的测定仍然是一项国际性难题, 还没有特别专一有效的方法。5、一般情况下采用的分析方法可大体有化学反应法 、...

Mito Tracker Red CMXRos的标记原理是什么?
原理:用于对活细胞线粒体进行染色,该染料的积累取决于膜电位。定义:MitoTracker Red CMXRos 是一种红色荧光染料,用于对活细胞线粒体进行染色,并且该染料的积累取决于膜电位。乙醛固定后,该染料可稳定保存。荧光染料常用于荧光染料产品的制备,以及增白洗衣粉中的增白剂,指示信号用的各种荧光路标漆,...

秦州区17089675711: 组织中的ros一般用什么方法检测 -
融菁善宁: 活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的.DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH.而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内.细胞内的活...

秦州区17089675711: 细菌抗体测定荧光探针法又叫什么 -
融菁善宁: 流式检测ROS的特异性比较差.一般来说,针对过氧化氢和超氧化物有荧光探针.加到细胞培养液后,细胞摄取.遇到ROS,可以发出荧光,上机检测可以比较各组之间荧光强度的变化从而代表ROS水平的不同.

秦州区17089675711: 线粒体的活性离开细胞的线粒体有活性吗,可以完成什么 -
融菁善宁: 线粒体的活性离开细胞的线粒体有活性 活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的.DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH.而DCFH不能通透细胞膜,从而使探...

秦州区17089675711: 线粒体抗氧化剂和ros清除剂的区别 -
融菁善宁: 线粒体抗氧化剂和ros清除剂的区别活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的.DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DC...

秦州区17089675711: 环氧化酶的COX - 2与DN -
融菁善宁: DN作为糖尿病常见的微血管病变,又称肾小球硬化症.COX-2主要在肾小球致密斑、皮质髓襻升支粗段、足细胞和肾髓质的间质细胞表达,与其他炎性介质共同参与肾小球和肾小管间质结构功能改变,在DN发生中起重要作用. 1. COX-2在糖...

秦州区17089675711: 学校有我们的暂住证么?急急急!!!!!!
融菁善宁: 活性氧检测试剂盒(Reactive oxygen species assay kit) C1300 描述:活性氧(Reactive oxygen species, ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理...

秦州区17089675711: 怎么用流式细胞仪测定ros含量 -
融菁善宁: 根据你的实验需要,选取合适的染料,有对过氧化物相对敏感的,有对超氧化物相对敏感的.染色细胞后上机读取每组的相对荧光强度就好了.

秦州区17089675711: DCFH - DA到底是哪一种 -
融菁善宁: DCFH-DA(2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐)是非标记性的氧化敏感的荧光探针,DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH.而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内.细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF.检测DCF的荧光以判定细胞内活性氧的水平. 我买的是sigma的,满便宜的,大概300上下?记不清了.

秦州区17089675711: 如何检测线粒体内活性氧水平 -
融菁善宁: 放射跟踪是个好方法,但是比较麻烦的感觉.

秦州区17089675711: 常用的荧光探针有什么?
融菁善宁: 常用的荧光探针:FITC,CY-3,ALEAX488,CY-5,ALEAX564生物芯片技术扫描工具编辑一旦荧光标记样品和微阵列反应后,未结合的成分就可洗去,结合到芯片的样品可通过荧光检测装置进行检测

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