7.多关联双亲染色体片段代换系(CSSL)群体的代谢组分析

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代谢组学分析结合高级遗传群体是研究植物代谢组学的有力工具。然而，水稻（ Oryza sativa ）代谢组的遗传分析主要是利用自然资源或单个双亲群体进行的。本文以三个具有共同轮回遗传背景的染色体片段代换系群体的剑叶为材料，对水稻的代谢多样性进行了分析。通过将ACC10（A/Z）、Minghui 63（M/Z）和Nipponbare（N/Z）基因组片段引进珍汕97构建的多个相互关联的双亲群体，对代谢数量性状位点（mQTL）进行了有效定位。共产生1587个mqtl，其中684、479和722分别来自A/Z、M/Z和N/Z染色体片段代换系群体。我们鉴定了367个mqtl的99个候选基因。此外，通过25个候选基因的联合连锁分析，特异性地产生了1001个mQTL。其中一些候选基因被验证过，如 LOC_Os07g01020 与吡哆醇及其衍生物的体内含量有关和 LOC_Os04g25980 与顺式玉米苷葡糖基转移酶活性相关。我们提出了O-methylapigenin C-pentoside（O-甲基芹菜素C-戊糖苷）新的生物合成途径，并通过精细定位证明 LOC_OS04G11970 编码了该途径的一个组分。我们推测methylated apigenin（甲基化芹菜素）可能会赋予植物抗病性。这项研究证明了使用多个相互关联的群体能够生成大量可验证的mQTL。在功能代谢组学的背景下讨论了这些结果，并讨论了各自代谢物下候选基因的特征。

大量代谢物由植物产生，其中许多是植物与环境相互作用所必需的。例如，水溶性B6组代谢物不仅在植物抗氧化防御中起作用，而且还可以减少重要的人类疾病的发生率，如高血压和糖尿病。同样，据报道，黄酮类等特殊代谢物参与了植物的生物和非生物胁迫耐受性，并对人类的慢性病和某些癌症具有防御的作用。因此，鉴于代谢产物的重要性，有必要进一步研究其在植物中的功能，探讨其对人类的价值。然而，据估计植物界产生了超过200000种代谢物，并且这些代谢物在不同物种中性质和数量存在很大的差异。因此，有必要更有效、更系统地揭示植物的代谢组。
代谢组学代表了实验系统生物学的一个主要工具，因此，它推动了对复杂遗传特征的理解，无论是单独使用还是与其他组学工具结合。近年来，利用多种代谢组学作为工具探索不同物种的代谢多样性以及通过研究种质资源来解释潜在的生物合成和调控途径方面取得了进展。尽管由于不明确的群体结构和有限的群体资源的限制，关联作图更为流行，已在多种物种（包括拟南芥、番茄、小麦和玉米）的单双亲分离群体中中进行了大量自然变异的mQTL分析。尽管有助于开发和高效地进行QTL定位），但在双亲群体中只有两个基因组的组合可能导致QTL定位的等位基因多样性不足。因此，这可能将mQTL的发现限制在双亲所表现出的多样性上。为解决这一问题，提出了玉米嵌套关联作图群体和多种作物的多个高级遗传互交群体作为多亲本群体解决方案。同时，已经证明利用多个双亲种群也可以提高作图的效率。
水稻是世界上最重要的作物之一，为全球人类消费者提供淀粉和许多其他营养物质。mQTL作图或全基因组关联研究结合代谢组学分析（mGWAS）已在水稻中进行，以解析代谢物含量调节的遗传基础。mGWAS分析提出了将水稻的两个主要亚种（籼稻和粳稻）的生物化学多样性归属于野生后代具有高度遗传多样性。鉴于代谢物与作物产量或营养之间的关系，预计mGWAS和mQTL研究将为理解水稻品种的生物化学多样性奠定遗传基础，并促进功能代谢组学方法应用于培育抗逆性增强和营养特性增强的优良品种方面。为了阐明这些重要代谢性状的遗传基础，我们在3个独立的CSSL群体中对281个代谢物进行了代谢谱分析。这些代谢物是由4个亲本产生的，包括2个典型的籼稻品种（明恢63[MH63]和镇山97[ZS97]），一个粳稻品种（Nipponbare[Nip]）和一个野生稻（Oryza rufipogon ACC10），使用ZS97作为共同的轮回背景，其他三个基因型作为独立的供体。结果证明，利用三个相关的CSSL群体可以获得更高的mQTL识别率和更有利于通路的解释。此外，联合连锁分析被证明在绘制某些代谢物图谱方面更为有效。这些联合观察表明，来自不同亲本的群体可能加速代谢产物的基因鉴定和途径阐明。我们随后鉴定和验证吡哆醇（维生素B6的维生素之一）和顺式玉米素O-葡糖苷侧的候选基因。此外，推测了甲基化芹菜素（C-pentoside）产生的生物合成途径。因此，综合结果表明，在鉴定和验证代谢物以及鉴定参与其各自生物合成途径的基因方面，使用这种遗传设计策略能起到很好的促进作用。考虑到候选的代谢物潜在抗病活性，通过代谢分析将为进一步研究特定代谢物提供关键线索。这些研究最终可能试图通过增强植物代谢以确保未来水稻产量中发挥至关重要作用。

抽穗期旗叶采集自4个亲本系，即ACC10（野参）、MH63（籼稻品种）、Nip（日本品种）和ZS97（籼稻品种），以及利用这些亲本系（a/Z、M/Z和N/Z群体）建立的3个CSSL群体的个体，进行代谢谱分析。利用先前建立的广泛靶向代谢组学方法，在水稻旗叶中检测到281种代谢物（其中82种已被标准物质证实），包括29种氨基酸及其衍生物（AAs）、124种黄酮（Flas）、10种脂质（Lips），23个核苷酸，20个酚酰胺（PAs），30种植物激素及其衍生物（PHs）、36种多酚类（PPs）和9种维生素（Vits）。代谢多样性的主成分分析表明，四个亲本在其代谢组分上表现出重大差异。第一主成分和第二主成分（PC1和PC2）分别解释了总方差的41.7%和33.1%，且这些成分主要由不同的代谢物类别贡献：三个亲本（ACC10、MH63、Nip，与ZS97相比，Nip和ACC10中Flas和AAs的差异最大，而MH63中PPs的差异最大.接下来，我们对三个独立的CSSL群体中281种代谢物的变异系数（CV）进行了评估，结果显示，与A/Z和N/Z群体相比，M/Z系中相对较高的变异（CV为30%-90%）占比较低，表明这些代谢物在M/Z系间的变异较小。此外，与其余两个群体相比，M/Z系具有相对较高的代谢物遗传力。这三个CSSL群体的CV和遗传力的观察结果与MH63和ZS97之间的亲缘关系和M/Z群体的代谢多样性低于其他两个CSSL群体的结果是一致的。

在对不同品系进行代谢物分析之后，我们接下来根据CSSL群体的高密度图进行mQTL分析。共有684、479和722个mQTL分别对应于A/Z、M/Z和N/Z三个群体中的239、216和232个代谢物。去除彼此之间在1 Mb范围内的冗余mQTL，它们构成了1587个非重复位点。我们观察到多个热点的聚集，其中一些热点在不同的种群中是同域的。例如，43、42和54 mQTL被映射到染色体6上的8-12mb区块中，分别占A/Z、M/Z和N/Z群体中6号染色体上映射的mQTL总数的60.6%、45.7%和61.4%。其他热点主要定位在1号、7号和10号染色体上。

考虑到四个亲本系之间的变异是由不同种类的代谢分子引起的，可能不奇怪的是，各个CSSL群体的映射结果也有很大不同。在A/Z群体中，大多数代谢类（除了在N/Z系中最高的Flas；图2A）的mQTL映射更多，当考虑到每个代谢物映射的mQTL平均数时，AAs、PAs、PHs的映射结果可能更好。此外，更多的Flas候选基因是从N/Z系中特性获得的，而更多的AAs、PAs和Vits候选基因是从A/Z谱中获得的。AAs在A/Z群体和Flas在N/Z群体中的优先映射与相应群体中相应代谢物水平的增加变化一致。M/Z总体表现出较少的总mQTL，以及每个代谢物类较少的mQTL，并且在每个代谢物类中映射的映射间隔更宽。

除了分别利用三个定位群体（M/Z、A/Z和N/Z）外，还对整合群体MAN-Z（表明ZS97的染色体片段被MH63、ACC10和Nip的染色体片段所取代）进行了联合连锁分析，以提高定位结果。在此方法下，当与从单个CSSL群体获得的结果相比较时，每个代谢物类别获得更多mQTL，分辨率提高。这种趋势也反应在鉴定的每种代谢物QTLs的数量上，特别是Lips和PHs。例如，12mQTL被映射为来自三个CSSL种群的Lips的最高优势对数（LOD）值9，而54 mQTL被映射为联合种群分析后的最高LOD值19.5。类似地，分别从三个CSSL种群和联合种群mapping了70和140个PHs mQTL。仅通过该方法获得且在三个CSSL群体中的任何一个群体中都不存在的特定定位位点，进一步说明了整合群体能够增强定位性能。

总之，在这项研究中，证明了使用相互关联的双亲群体不仅能够提供更高分辨率的mQTL，而且能够改进上位性相互作用的分析，从而重建O-甲基芹菜素C-戊糖苷的生物合成途径，并认为该代谢物具有抗病活性。
由于初级代谢物的变化可通过同位素追踪，这对次级代谢物代谢来说并不容易，因此本文和Kliebenstein等人的研究中所述的方法可能对于目前植物次生代谢的通路非常有用，从而提高我们对植物代谢的基本认识。最终，更全面的代谢通路将有助于在作物改良。

Chen, J , et al. "Metabolome Analysis of Multi-Connected Biparental Chromosome Segment Substitution Line Populations." Plant physiology 178.2(2018):612.

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珲春市15796745291： 什么是染色体片段置换系? - ？
用殷瑞能： 是以某一亲本为受体,另一亲本为供体,在受体亲本中建立的一套覆 盖供体亲本全基因组的、相互重叠的染色体代换群体.

珲春市15796745291： 我的染色体检查结果是46xy,t(7;11)(q36;q14),这是什么意思?能要孩子吗? - ？
用殷瑞能： 首先,46xy,t(7;11)(q36;q14),意思是男性,46条染色体,7号染色和11号染色体存在片段交换,交换的片段是7号染色体长臂的36位跟11号染色体长臂的14位.这个就是说您本身的染色体是存在异常的,至于对于生育的影响,我也不是很清楚,染色体易位是很容易发生的事情,有些是完全没有影响的,有些是会致病的.如果您本身任何问题都没有的话,那么应该是没有问题的.

珲春市15796745291： 如图是具有甲、乙两种遗传病的家族系谱图,其中一种遗传病的致病基因位于X染色体上,若Ⅱ7不携带致病基因 - ？
用殷瑞能： A、图中Ⅰ的1和2都没有乙病,而其女儿4号有乙病,说明乙病是常染色体隐性遗传病;1于有甲病,儿子6没有甲病,说明甲病是显性遗传病,由题干已知只有一种遗传病的致病基因位于X染色体上,所以甲病是伴X显性遗传病,A正确;B、假...

珲春市15796745291： 普通遗传学试题？
用殷瑞能： 二:1.小,远;2.4,9,4,1/16;3.答案你自己都写了;4.前中期,末期,中期,后期;5.Aa,Aa;6.12;7.DNA,组蛋白,RNA,非组蛋白;8.异交,近交,近交;9. 1/2;10.绿圆,黄圆,黄圆,黄皱;11.数量 三:1.B;2.C;3.B;4.C;5.B;6.D;7.B;8.C;9.C;10.B;11.C;12.C. 因为是测交,所以我只写配子的(仅供参考):ABD=abd=9.23%(单交换) AbD=aBd=4.73%(单交换) ABd=abD=0.77%(双交换) Abd=aBD=33.73%(亲本)

珲春市15796745291： 真核生物进行有性生殖时,通过减数分裂和随机受精使后代C.从双亲各获得一半的DNA - ？
用殷瑞能： DNA除了染色体上有以外,细胞质中也有,受精时精子只提供核DNA,而卵细胞既提供核DNA也提供质DNA,所以受精卵从双亲获得的DNA并不相等.

珲春市15796745291： 突变基因杂合细胞进行有丝分裂时,出现了如图所示的染色体片段交换, - ？
用殷瑞能： [答案] D [解析] 假设正常基因为A,突变基因为a,发生染色体片段互换后,每条染色体的两条姐妹染色单体上分别为A和a基因,有丝分裂后期,姐妹染色单体随机分离,移向两极的基因可能为AA和aa,也可能均为Aa,D正确.

珲春市15796745291： 高中生物遗传学里面的连锁互换到底是什么意思 - ？
用殷瑞能： ①它描述了同源染色体上异位基因的交换是生物变异的主要来源之一,为杂交育种中的选择提供了丰富的材料;②它告诉我们:用于杂交育种的双亲必须是纯合体并能互补,同时目标个体在后代群体中出现的概率也可由交换值推算出来,借以确定育种规模;③它告诉我们,可以通过鉴定一个易于鉴定的性状来选择一个与之连锁但不易鉴定的优良性状. 交换率——指重组配子数(个体数)占总配子数(个体数)的百分率. 影响基因交换率的大小因素主要有:两个非等位的连锁基因在染色体上距离.交换率与两基因的距离成正比,两基因距离愈近,染色体片段发生互换的可能性愈小,杂交后代重组数量愈小;

珲春市15796745291： 关于基因、DNA和染色体三者之间的关系 - ？
用殷瑞能： c.基因是DNA上有遗传效应的DNA片段.染色体由DNA和蛋白质组成

珲春市15796745291： 下列叙述中正确的是()A.非同源染色体之间染色体片段的交叉互换属于染色体变异B.基因自由组合定律 - ？
用殷瑞能： A、同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换属于基因重组,而非同源染色体之间染色体片段的交叉互换属于染色体变异(易位),A正确;B、基因自由组合定律的实质是:产生配子时,等位基因分离,非同源染色体上的非等位基因自由组合,两个“非”缺一不可,B错误;C、基因型为Aa的豌豆经减数分裂产生的配子中A:a=1:1,但雄配子数目远远多于雌配子,C错误;D、色盲是伴X隐性遗传病,男性色盲患者一定会将色盲基因传给女儿,但不一定会传给外孙,D错误. 故选:A.