如何检测 DNA 甲基化?

作者&投稿:闻金 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
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需要去专门的检测机构或者医院检查。

DNA甲基化(DNA methylation)为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5号碳位共价键结合一个甲基基团。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。

机制 

由于Dnmtl和Dnmt3基因家族没有针对CpG二核苷酸序列的特异性,人们因此提出了DNA甲基化转移酶发现靶位点的机制。

首先,甲基化转移酶并不是同等地接近所有染色体区域。具有染色体重构和DNA螺旋酶活性的蛋白质能调节哺乳动物细胞内DNA甲基化,如SNF2家族2个成员ATRX和Lsh;其次,附件因子(蛋白质、RNA等)能召集DNA甲基化转移酶到特定基因组序列或染色体结构中,如pRB蛋白等能够与Dnmtl作用,在S期晚期将它召集到高度甲基化的异染色质区。

以上内容参考:百度百科-DNA甲基化




新密市15278657129: DNA甲基化的检测方法主要包括哪些? -
通琴尤尼:[答案] 去哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找.1) 基因组整体水平甲基化分析a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法...

新密市15278657129: DNA甲基化的检测方法主要包括哪些? -
通琴尤尼: 参考见解:方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找.1) 基因组整体水平甲基化分析 a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 b) SssI 甲基转移酶法 c) 免疫化学法 d) 氯乙醛法2) 特异性位点的DNA甲基化的检测 a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法 b) 直接测序法

新密市15278657129: DNA甲基化检测有哪些方法?? -
通琴尤尼: DNA甲基化检测: Southern Blot杂交、 Bisulfite Sequencing and McrBC-PCR

新密市15278657129: 如何进行DNA甲基化分析 -
通琴尤尼: 基因甲基化的检测方法主要有以下几种:甲基化特异性的PCR(Methylation-specific PCR,MSP) 用亚硫酸氢盐处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变;随后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物进...

新密市15278657129: 如何检测甲基化的程度? -
通琴尤尼: 先用中亚硫酸盐处理,使DNA中未发生甲基化得胞嘧啶脱氨基转化为尿嘧啶而甲基化的胞嘧啶保持不变,PCR扩增得到所需片段,片段中尿嘧啶全部转化成T,然后对PCR产物测序,并与未处理的序列比较,判断CpG位点是否发生甲基化.我们研究院对甲基化检测很专业,感兴趣的话,可以看看:中关村华康基因研究院

新密市15278657129: 人DNA甲基化转移酶检测步骤请问大家知道具体测其表达水平的步骤吗,急用, -
通琴尤尼:[答案] 把方法告诉你,步骤省略了. 1、Western blotting 2、免疫组化 3、Elisa 4、流式

新密市15278657129: 有谁做过高效液相色谱测DNA的甲基化,请问上样的DNA有什么要求,还有样品需要过滤膜吗, -
通琴尤尼:[答案] 这个我正在做,对dna要求的纯度是比较高,尽量用试剂盒提取吧,有蛋白的话,紫外有吸收峰,影响结果,而且容易堵柱子啊.毕竟进样的时候都是几微克的东西,你稍微有点蛋白或者其他物质,就有可能影响5-甲基胞嘧啶的峰,结果就不准确了.

新密市15278657129: 甲基化的甲基化检测技术 -
通琴尤尼: 曾经是2009年最值得关注的技术.遗传上除了ATGC这四种碱基,人们对第五种碱基-甲基化的胞嘧啶的兴趣也日益增加.甲基化修饰的存在对DNA转录的调控起了重要作用,异常的甲基化往往是许多疾病的起因.既然如此重要,系统绘制甲基...

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