怎么用elisa法测定大鼠nf-kb
蛋白指标检测以WB最具说服力，除非是细胞培养液及体液中蛋白检测才会采用ELISA
具体还是得看elisa试剂盒说明书
ELISA试剂盒说明：
1．检测原理：采用双抗体夹心ABC-ELISA法
2．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
3．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
4．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
5．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
elisa法是什么意思(ELISA的含义是什么)
定性检测结果是判断受检标本中是否含有待检测抗原或抗体，做出有或无的简单回答，分别用阴性、阳性表示，阳性表示该标本在该检测系统当中有反应，阴性表示无反应，定量检测操作步骤复杂，影响反应的因素较多。elisa属于什么技术 elisa法就是酶联免疫吸附测定法的简称。elisa法可用于检测大分子抗原和特异性抗体...
简介ELISA方法的主要原理、试验步骤、结果判定方法。
(1)基本原理：把抗原在不损坏其免疫活性的条件下预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品和酶标记物按一定程序反应形成复合物，并加入酶作用的底物;反应终止时，根据定性或定量分析有色产物的量来确定待检样品中的抗体的含量。(2)试验步骤：抗原包被→洗涤封闭→加待检血清（同时设立阴阳性对照...
简述分别用ELISA的哪种方法检测乙肝两对半?
表面抗原和E抗原采用的是双抗体夹心法。表面抗体是双抗原夹心法。E抗体和核心抗体是竞争抑制法或间接法。乙肝两对半：检测血清中有无乙肝病毒5种抗原、抗体的简称，也叫乙肝五项，共为两对半,即乙肝病毒表面抗原(HBsAg,旧称澳抗)、表面抗体(抗-HBs或HBsAb)为一对、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、e抗体(抗-...
指出ELISA有哪几种常用方法?各种方法在操作上有什么异同?应用有什么异 ...
双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响,已被列为这类试剂的一项考核指标。双抗体夹心法适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,但不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。2.双抗原夹心法测抗体反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测...
elisa有几种类型,原理是什么
间接法常用于检测抗体，将已知的抗原固著于塑胶孔盘上，完成后洗去多余的抗原，重复两次。洗去多余未键结二次抗体，加入酶底物使酶呈色，藉仪器测定塑胶盘中的吸光值，以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制，一般用于检测小分子抗原，将具有专一性的...
求助ELISA测定抗体效价方法
我用的是间接ELISA，以下copy自我的毕业论文：将抗原用包被液稀释至约10 ?g\/mL；分别将阳性血清和阴性血清用TBS倍比稀释，稀释梯度从1：200，1：400至1：204800，二抗用的是HRP标记的羊抗兔IgG(1:5000稀释) 。酶标仪测定450nm处各个孔的吸光度(A450)，计算阳性血清与阴性血清的吸光度之比(P\/N)...
怎么样正确的进行ELISA试剂盒的检测
在执行ELISA试剂盒检测时，正确的操作至关重要。以下是对ELISA试剂盒说明书内容的改写，旨在提高内容质量、条理清晰，并确保语义不变。--- 一、结合物的制备 1. **戊二醛交联法**：戊二醛是双功能团试剂，能有效链接酶与蛋白质的氨基，常用于标记碱性磷酸酶。该方法分为一步法和两步法。一步法简便，...
elisa法的基本原理是什么?简述其在生化分析中的应用
elisa法的基本原理：它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂） ②酶标记的抗原或抗体（标记物）③酶作用的底物（显色剂）测量时，抗原（抗体）...
ELISA有些什么方法?各有啥优缺点?
5.最新ELISA技术：基于细胞法（cell-based ELISA）：是一种新的定性蛋白检测技术，将细胞直接在微孔板里培养，待检测时，不需抽提蛋白和裂解细胞，便可直接测量微孔板里蛋白经刺激或抑制作用后的变化。优势：无需裂解细胞，所以目标蛋白损失最少，可测定完整细胞、黏附细胞、还有非粘附细胞。缺点：不能...
ELISA实验检测抗体的实验步骤?
（3）加酶标抗抗体,主要根据你的一抗来确定二抗用什么。可用酶标抗人Ig以检测总抗体，但一般多用酶标抗人IgG检测IgG抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗体抗体结合，从而间接地标记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与标本中受检抗体的量正相关。（4）加底物显色 间接法由于采用的酶标二抗是针对一类...
荡隶京必： 操作步骤: (1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原.洗涤除去未结合的抗原及杂质. (2)加稀释的受检血清,保温反应.血清中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物.经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,...
青田县18566073458： ELISA直接法和间接法优缺点 - ？
荡隶京必： 直接法(direct ELISA) 将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要. 优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应. 缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高.间接法(indirect ELISA) 此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量. 优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析.不加酶标记的一级抗体则能保留它最多的免疫反应性. 缺点:交互反应发生的机率较高.
青田县18566073458： 细胞凋亡的早期检测方法有哪些 - ？
荡隶京必： 1、PS(磷脂酰丝氨酸)在胞外膜分布的检测 PS从胞膜内侧转移到外侧现象是在细胞凋亡的早期即可发生标志.AnnexinV是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在胞膜外侧的PS,使用荧光素标记的AnnexinV 蛋白(如Annexin ...
青田县18566073458： 梅联免疫法阴性什么意思 - ？
荡隶京必： 酶联免疫吸附剂测定法,简称酶联免疫法,或者ELISA法. 它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测. 酶联免疫法是化验的一种方法:酶联免疫法,简称ELISA.它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测.步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会).将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内).经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数.由数值来判断结果的阴性或阳性.具体看检查什么项目
青田县18566073458： ELISA测大鼠血清内皮素含量？
荡隶京必： 1.你一共要170个样本?如果这样至少要买170*2=340孔,即4-5个96孔板的试剂盒,因为每张板上还要有8个标准品及复孔.复孔也要算进去的 2.理论上是不可以的,实际上如果你认为你的老鼠情况比较均一,也行. 3.一般是的,根据厂家不同可能会不同,但双抗较常见 4.是的,不用再买 5.进口的较好,我用的是上海麦约尔的VEGF,还行吧,没有买ET,ET是用放免做的. 希望对你有帮助
青田县18566073458： elisa的基本原理 - ？
荡隶京必： ELISA的原理: ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性. 进行检测时,样品中的受检物质(抗原或抗体)...
青田县18566073458： elisa步骤 - ？
荡隶京必： 方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1. 包被:用0.05M PH9,碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜.次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟.2. 加样...
青田县18566073458： 免疫酶组化法与酶联免疫吸附测定二者所用的共氢体有何不同? - ？
荡隶京必： (来自于百度粘贴,自己不会再作答)酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术.其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除.常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体.
青田县18566073458： 简述ELISA法在免疫室的应用 - ？
荡隶京必： ELISA基本原理是抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面;测定时,将待测样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成抗原抗体复合物;反应终止时,固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)与待测标本中待检抗体或抗原的量呈一定比例;经洗涤去除反应液中其他物质,加入底物进行显色,最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量. 临床应用:①双抗体夹心法:用于检测抗原,适用于检测两个或两个以上抗原决定簇的多价抗原;②间接法:用于检测抗体;③竞争法:用于小分子抗原和半抗原的测定,也可以抗体进行测定;④捕获法:用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定.
青田县18566073458： 金属硫蛋白的检测方法 - ？
荡隶京必： 随着对MT研究的进一步深入,建立的MT检测方法较多,但所有这些方法都是建立在MT的理化特性和生物特性以及免疫学特性基础上,主要分以下几大类. 此方法主要是利用巯基(-SH)在汞滴表面产生氧化还原出现的电位变化建立的,以测定...
