可溶性有机氮的测定方法?
克氏定氮法
于有机式样中假如硫酸和硫酸钾,加硒或铜催化.N定量转化成NH4HSO4或者(NH4)2SO4,然后在
上述煮液中假如浓NAOH,析出NH3导入标准HCL.用标NAOH返滴
或直接用H3BO3吸收氨气,用标HCL吸收
一、材料:各种干燥、过筛(60~80目)的植物样品。
二、仪器设备:消化管; 微量凯氏定氮蒸馏装;三角烧瓶;微量滴定管; 量筒;容量瓶;烧杯;移液管等。
三、植物样品中氮元素含量检测实验:
1、样品提取分离:准确称取烘至恒重的样品0.1000g~0.5000g(依样品含氮量而定,含氮1~3mg宜),置10ml离心管中,加入5ml5%三氯乙酸,90℃水浴中浸提15min,不时搅拌。
取出后用少量蒸馏水冲洗玻棒,待溶液冷却后,4000rpm离心15min,上清液弃去。并用5%三氯乙酸洗沉淀2~3次,离心,弃去上清液,最后用蒸馏水将沉淀无损地洗入铺有滤纸的漏斗上,去掉滤液后,将沉淀和滤纸在50℃下烘干,用于蛋白氮的测定。
2、样品的消化:取4支消化管编号。1号管直接放入称好的材料用于测定总氮,2号管放入上述烘干的滤纸和沉淀,用于蛋白氮的测定,3号管放入同样滤纸一张、4号管不加任何样品作为空白对照,注意将样品放入消化管底部。
向各消化管加浓硫酸5ml,混合催化剂0.3g~0.5g,将样品浸泡数h或放置过夜后,在管口盖一小漏斗,放在远红外消煮炉上加热消化。开始时温度可稍低,以防止内容物上升至管口。泡沫多时,可从小漏斗加入2~3滴无水乙醇。
到管口出现白色雾状物时,泡沫已不再产生;此时可逐渐升温,使内容物达到微沸。直到消化液变为清澈透明为止。
消化过程中,若在消化管上部发现有黑色颗粒时,应小心地转动消化管,用消化液将它冲洗下来,以保证样品消化完全。消化过程约需2~3h。
3、定容消化完毕待溶液冷却后,沿管壁仔细加入10ml左右无氨蒸馏水,以冲洗管壁,再将消化液小心转入100ml容量瓶中。以无氨水少量多次冲洗消化管,洗涤液并入容量瓶。冷却后用无氨水定容至刻度,混匀备用。
4、蒸馏及滴定 以下几步进行:
A、仪器的洗涤:先经一般洗涤后,还要用水蒸气洗涤。可按下列方法进行蒸气洗涤。先在蒸气发生器中加入2/3体积的蒸馏水(事先加入几滴浓硫酸,使其酸化,加入甲基红指示剂,并加入少许沸石或毛细玻璃管以防止爆沸)。
打开漏斗下的夹子,用电炉或酒精炉加热至沸腾,使水蒸气通入仪器的各个部分,以达到清洗的目的。在冷凝管下端放置一个三角瓶接收冷凝水。然后关紧漏斗下的夹子,继续用蒸气洗涤5min。
冲洗完毕,夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管,蒸馏瓶中的废液由于减压而倒吸进入收集器,打开收集器下端的活塞排除废液。
如此清洗2~3次,再在冷凝管下端换放一个盛有硼酸-指示剂混合液的三角瓶,使冷凝管下口完全浸没在液面以下0.5cm处,蒸馏1~2min,观察三瓶内的溶液是否变色。
如不变色,表示蒸馏装置内部已洗干净。移去三角瓶,再蒸馏1~2min,用蒸馏水冲洗冷凝管下口,关闭电炉,仪器即可供测定样品使用。
B、标准硫酸铵测定为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术,并检验实验的准确性,找出系统误差,常用已知浓度的标准硫酸铵测试三次。
在三角瓶中加入20ml硼酸-指示剂混合液,将此三角瓶承接在冷凝管下端,并使冷凝管的出口浸入溶液中。注意在加样前务必打开收集器活塞,以免三角瓶内液体倒吸。准确吸取2ml硫酸铵标准溶液,加到漏斗中。
四、结果计算:
样品中总氮量(%)=0.010×(V3—V0)×100×14/(W×1000×10)×100×氮的回收率样品中蛋白氮含量(%)=0.0100×(V1-V2-V0)×100×14/(W×5×1000)×100×氮的回收率。
回收率(%)=0.0100×(V-V0)×14/(2.0×0.6×100)×100。
扩展资料:一、药剂空白高的问题:
造成药剂空白高主要原因是过硫酸钾纯度不够。空白高于0.030 ,就需要提纯过硫酸钾。提纯方法就是二次结晶过硫酸钾:
1、(可以同时做两份)在1L的大烧杯中加入约800mL水,50 摄氏度的水浴锅上加热(水浴锅的温度要用温度计检测下是不是正常,以免超过60摄氏度。过硫酸钾在60 摄氏度以上会分解)。
我的经验是先加入90 克过硫酸钾,用一滤纸盖在上面(避免污染),溶解速度慢, 可以边做别的事边提纯,有空就去搅拌几下,全部溶解之后(速度较慢)。
用勺子逐渐向烧杯中加入过硫酸钾,一次不要加太多,溶了再加,直至不管怎样搅拌,隔了近一小时多都不能溶解为止(刚好有一丁点儿不能溶解),这个过程挺漫长。
2.把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却,用一干净的塑料袋包住烧杯口, 并用皮筋扎紧,再放进冰箱里(调到低温度),放置一晚上,重结晶。建议同时用一个1L 的广口瓶放一瓶无氨水在冰箱里冷藏(用于冲洗用)。
3.重结晶一夜后,第二天早上拿出来立即倒掉上清液,重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底,但其实结构很松散,用钢勺什么的弄两下就离散开了,然后再清洗:用冰好的无氨水清洗几遍,尽量不要让下面的结晶流失。
4.二次结晶:清洗后的烧杯里只剩下下面的结晶,向烧杯中加入约400ML 的无氨水,搅拌溶解,这次跟次结晶不同的是向烧杯中慢慢地加入无氨水,一开始可以一次稍多点水 (看结晶的多少),剩下不多时要等久些,加的水也要少,直到有一丁点儿结晶不能溶解为止。
5.然后重复第2步骤(二次结晶)、第3步骤(清洗)。
6.清洗后倒掉上清液,把结晶移入一250ML的烧杯中,然后放入50摄氏度烘箱烘干即可 (烘箱里的温度要用温度计检测是否正常)。烘干箱里不要放入其它物品,以免再次污染。
烘干时间较长,(我的烘了二天三夜)可以晚上放烘干箱里烘,白天放在50 度水浴锅上蒸干一定。完全烘干后的药品跟原来的药品一样松散干燥,搅动会发出清脆的声音。
7 .烘干后的药品从烘箱里拿出要放在干燥器里冷却一小时以上。冷却后用干净的聚乙烯瓶装好盖紧。
8.实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处。
二、总氮取水体积:
因为碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定总氮取水样量为10ML时,测定范围为0.20mg/l7.00mg/l。总氮高于7 mg/l时要适当减少取水样量。
如果取5ML水样再稀释至10ML 进行测定的话,高检出限是14 mg/l。当总氮高于14 mg/l 时取水量就要再减少进行测定。我一般是取2ML水样进行测定。
出水总氮低时可以取5ML水样进行测定。 吸取水样时要取静止一定时间后的上清液。
三、要用新鲜的无氨水:
整个总氮的测定过程中所用的无氨水,包括加药前稀释至10ML 用的无氨水,消解后加的无氨水,以及测定吸光值时参比样用的无氨水,都必须使用同一瓶水。 以免不同无氨水不同带来的误差。
四、密封事项:
比色管盖子用生料带缠好,这样密封性更好,防止氨氮跑出。
生料带对药剂没影响不会影响结果。但缠在盖子上的生料带要保持完好无损,以免碎屑掉入比色管内,影响吸光值,从而影响化验结果。比色管盖子一定要塞紧,然后用纱布和绳子扎紧。扎好后把纱布边沿往下拔, 使纱布紧密包住盖子。
五、灭菌锅的温度灭菌锅的温度设定为125度,消解时间设定为1小时。
六、趁热拿出消解结束后,待灭菌锅压力降为0 后,马上打开放气阀放气,放气后马上打开灭菌锅盖,立即拿出装比色管的烧杯,把总氮的比色管(压住总氮比色管的盖子)趁热多次摇匀,放回烧杯中,自然冷却。
七、加入1+1盐酸后,10分钟之后测定吸光值(只要是10 分钟后就行,时间长些不要紧,但要避免污染。)。分光光度计要预热30分钟以上,测定总氮的吸光值时,要先测220 波长的吸光值,全部测完了再测275波长的吸光值。
测量步骤应为:
1.取样称量,并溶解于蒸馏水中.
2.加入已知量(需过量)的用稀硫酸酸化过的高锰酸钾溶液.
3.等分并取一份进行氧化还原滴定(注:此还原剂的还原性应不足以被酸化过的硝酸根离子氧化).
4.加入稀硫酸酸化.
5.滴入已知量的(过量)淀粉KI溶液.
6.再用氧化性弱于硝酸的氧化剂对"5"中所得溶液进行氧化还原滴定至蓝色褪去.
记录以上数据并进行简单计算,即可准确测量.
土壤可溶性有机氮是指可以溶于水或盐溶液的有机氮,是土壤氮素中最活跃的组分之一。一方面,它是土壤有效养分的来源之一,可以直接或经过转化后为作物吸收;另一方面,它的移动性较强,可随水分运移而发生径流或淋溶流失,引起环境污染。研究发现,在农田中可溶性有机氮含量为2.9~12.3mg·kg-1,占可溶性总氮(可溶性有机氮和无机氮之和)的13~82%。通过总结前人的研究,Kessel等发现,农田中可溶性有机氮的损失占总溶解性氮素损失的26%。近几年,为探索其影响因素,组成、运移特性等,越来越多的研究围绕可溶性有机氮展开。目前测定可溶性有机氮的方法为差减法(如图1),需要测定可溶性总氮的含量和矿质态氮的含量,两者之差即为可溶性有机氮的含量。该方法步骤繁琐;并且矿质态氮的测定结果直接影响可溶性有机氮的计算结果,尤其是在矿质态氮含量高的土壤中,矿质态氮测定的误差对计算可溶性有机氮的含量影响很大,甚至在有的情况下计算为负值;由于可溶性总氮的测定是采用碱性过硫酸钾氧化法进行的
最近很多人会问总氮的测定方法到底是什么?应该怎么检测呢?今天我来说说总氮的测定方法吧;从以下3个方面说,看完你就会一亩了然了~
仪器
(1)紫外分光光度计。
(2)压力蒸汽消毒器或家用压力锅。
(3)具塞玻璃磨口比色管。
试剂
(1)无氨水,每升水中加入0.1ml浓硫酸,蒸馏。收集流出液于玻璃容器中。
(2)20%(m/V)氢氧化钠:称取20g氢氧化钠,溶于无氨水中,稀释至100ml。
(3)碱性过硫酸钾溶液:称取40g过硫酸钾,15g氢氧化钠,溶于无氨水中,稀释至1000ml,溶液存放在聚乙烯瓶内,可储存一周。
(4)1+9盐酸。
(5)硝酸钾标准溶液:a、标准贮备液:称取0.7218g经105-110℃烘干4h的硝酸钾溶于无氨水中,移至1000ml容量瓶中定容。此溶液每毫升含100毫克硝酸盐氮。加入2ml三氯甲烷为保护剂,至少可稳定6个月。b、硝酸钾标准使用液:将贮备液用无氨水稀释10倍而得。此溶液每毫升含10毫克硝酸盐氮。
测定步骤
(1)将取回的进水样、出水样摇匀。
(2)取3个25mL的比色管(注意不是大的比色管)。第一支比色管加蒸馏水加至下部刻度线;第二支比色管加1mL进水样,然后用蒸馏水加至下部刻度线;第三支比色管加2mL出水样,然后用蒸馏水加至下部刻度线。
(3)分别向3个比色管加5mL碱式过硫酸钾
(4)将3个比色管放入到塑料烧杯内,然后放到高压锅内加热。进行消解。
(5)加热完毕,拆开纱布,自然冷却。
(6)冷却后,再向3个比色管分别加1mL1+9的盐酸。
(7)向3个比色管分别加蒸馏水至上部刻度线,摇匀。
(8)使用两种波长,用分光光度计测。首先用波长275nm,10mm的石英比色皿(稍旧的),测空白、进水、出水样并记录数;再用波长220nm,10mm的石英比色皿(稍旧的),测空白、进水、出水样并记录数。
(9)计算结果。
目前测定可溶性有机氮的方法为差减法 (如图1),需要测定可溶性总氮的含量和矿质态氮的含量,两者之差即为可溶性有机氮的含量。 该方法步骤繁琐;并且矿质态氮的测定结果直接影响可溶性有机氮的计算结果,尤其是在矿质态氮含量高的土壤中,矿质态氮测定的误差对计算可溶性有机氮的含量影响很大,甚至在有的情况下计算为负值;由于可溶性总氮的测定是采用碱性过硫酸钾氧化法进行的,溶液中的铵态氮往往在测定过程中发生损失,使可溶性有机氮的测定结果偏低;另外,在采用15N示踪技术进行试验时,不能直接检测15N在可溶性有机氮中的行为。
原理:
与MBC一样,DON(可溶性有机氮〉TDN的测定不能够直接进行,而是由TDN(可溶性总N)减去TIN((可溶性无机氮)而得出结果。TIN又包括NH*-N和 NO。—N。即:
DON = TDN - NH*一N - NO。一N
测定方法如下:
TDN:(过硫酸钾氧化-紫外分光光度法,农化p128,12.3.4);NO。-N:(紫外分光光度法,农化 p129,12.4) ;
一、材料:各种干燥、过筛(60~80目)的植物样品。
二、仪器设备:消化管; 微量凯氏定氮蒸馏装;三角烧瓶;微量滴定管; 量筒;容量瓶;烧杯;移液管等。
三、植物样品中氮元素含量检测实验:
1、样品提取分离:准确称取烘至恒重的样品0.1000g~0.5000g(依样品含氮量而定,含氮1~3mg宜),置10ml离心管中,加入5ml5%三氯乙酸,90℃水浴中浸提15min,不时搅拌。
取出后用少量蒸馏水冲洗玻棒,待溶液冷却后,4000rpm离心15min,上清液弃去。并用5%三氯乙酸洗沉淀2~3次,离心,弃去上清液,最后用蒸馏水将沉淀无损地洗入铺有滤纸的漏斗上,去掉滤液后,将沉淀和滤纸在50℃下烘干,用于蛋白氮的测定。
2、样品的消化:取4支消化管编号。1号管直接放入称好的材料用于测定总氮,2号管放入上述烘干的滤纸和沉淀,用于蛋白氮的测定,3号管放入同样滤纸一张、4号管不加任何样品作为空白对照,注意将样品放入消化管底部。
向各消化管加浓硫酸5ml,混合催化剂0.3g~0.5g,将样品浸泡数h或放置过夜后,在管口盖一小漏斗,放在远红外消煮炉上加热消化。开始时温度可稍低,以防止内容物上升至管口。泡沫多时,可从小漏斗加入2~3滴无水乙醇。
到管口出现白色雾状物时,泡沫已不再产生;此时可逐渐升温,使内容物达到微沸。直到消化液变为清澈透明为止。
消化过程中,若在消化管上部发现有黑色颗粒时,应小心地转动消化管,用消化液将它冲洗下来,以保证样品消化完全。消化过程约需2~3h。
3、定容消化完毕待溶液冷却后,沿管壁仔细加入10ml左右无氨蒸馏水,以冲洗管壁,再将消化液小
一般采用什么和什么两个指标表示有机物含量
3. 除了总有机碳含量和溶解性有机碳含量,还有其他指标可以用来表示有机物含量,例如总有机氮含量、总有机磷含量等。不同的指标适用于不同的研究目的和环境条件,研究人员可以根据具体情况选择合适的指标进行分析和研究。此外,随着科技的不断进步,新的指标和方法也在不断涌现,为有机物含量的研究提供...
土壤中的氮有哪些形态?
土壤中氮的形态有有机态和无机氮之分,二者合称为土壤全氮。其中土壤有机氮占土壤全氮量的98%以上。第一类为水溶性有机氮(包括一些结构简单的游离氨基酸、胺盐及酰胺类化合物),是速效氮源,易被作物吸收利用,但其含量不超过土壤全氮量5%;第二类是水解性有机氮,它包括蛋白质类(占全氮量的40%...
水污染常规分析指标物质
测定悬浮性固体通常使用玻璃砂芯滤器、滤纸或滤膜,国际上常用0.45微米作为滤孔标准。总氮是生物体内蛋白质的重要成分,反映了水体污染程度。它包括有机氮和无机氮,通过强酸和氧化剂分解后测定。通过测量氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的含量,可以了解水体的氧化自净过程。例如,氨氮高而另两种含量低,表明...
什么是DIN?跟氮元素含量有关的一个指标
水域生态系统中氮素的主要来源是陆地上输入的各种形式的有机和无机氮以及大气扩散的N2 氮的迁移,转化与循环主要途径包括氨化,硝化,脱氮(反硝化),合成,分解与挥发等 水中的有机氮化合物经过细菌的分解作用,形成氨态氮(氨化作用);氨态氮经过好氧细菌的氧化作用,形成亚硝酸盐和硝酸盐氮(硝化作用);硝酸...
如何测土壤 中的N
此法容易掌握,测定结果稳定,准确度较高。 1.原理:此法主要是在盐类和催化剂的参与下,用浓硫酸消煮,使有机氮分解为铵态氮。其中硫酸钾在消煮过程中可提高硫酸沸点,硫酸铜起催化作用,以加速有机氮的转化。硒粉是高效催化剂,可缩短消化时间。 此法已订为国家标准。 2.主要试剂: (1)混合...
如果测定水中总氮时 总氮值小于氨氮值是什么原因
原因:在碱性介质条件下,氨氮会以氨气形式逸散在消解管的气相中,这样测出的总氮只是硝态氮、亚硝态氮和部分氨氮之和,必然出现氨氮高于总氮。建议使用密封消解管,例如采用总氮测定仪器专用的密封消解管(LH-3BN),实验证明使用专用的密封消解管加上快速放气趁热将消解管多次摇匀是最有效的方法,其回...
水中氮的形式及转化
进入水体中的氮主要有无机氮和有机氮之分。无机氮包括氨态氮(简称氨氮)和硝态氮。氨氮包括游离氨态氮NH3-N和铵盐态氮NH4+-N;硝态氮包括硝酸盐氮NO3--N和亚硝酸盐氮NO2--N。有机氮主要有尿素、氨基酸、蛋白质、核酸、尿酸、脂肪胺、有机碱、氨基糖等含氮有机物。可溶性有机氮主要以尿素和...
污水的水质指标分类
一般分为物理、化学、生物三大类。 一、化学需氧量(COD):指用强化学氧化剂(中国法定用重铬酸钾)在酸性条件下,将有机物氧化成CO2与H2O所消耗的氧量(mg\/L),用CODcr表示,简写为COD。化学需氧量越高,表示水中有机污染物越多,污染越严重。cod的测定方法:随着测定水样中还原性物质以及测定方法...
化验土壤去哪里
可以的,下面我将实验室正规实验步骤给你列出,如果没有以下实验条件,建议你买一台土壤养分速测仪,方便实用。 有效氮的测定(碱解扩散法) 一、 方法与原理: 在密闭的扩散皿中,直接加碱于土壤中,在恒温条件下,一定时间内土壤中部分有机物被碱水解,释放出氨,连同土壤中的铵态氮在碱性条件下转化为氨气,并不断扩散...
水溶性含氮有机物有哪些
一甲胺 二甲胺 三甲胺、三乙醇胺、二乙醇胺
纵燕走川: 1、碱性过 硫酸钾紫外 分光光度法(GB 11894-89):如英国RAIKING,中国锐泉等品牌是主流的在这个标准基础上优化的产品. 2、气相分子吸收光谱法:该方法主要应用于实验室. 3、也有采用 氨氮、 硝酸根、 亚硝酸根分别进行测量,然...
荷泽市13429185431: 测定氮的方法 - ?
纵燕走川: 克氏定氮法 于有机式样中假如硫酸和硫酸钾,加硒或铜催化.N定量转化成NH4HSO4或者(NH4)2SO4,然后在 上述煮液中假如浓NAOH,析出NH3导入标准HCL.用标NAOH返滴 或直接用H3BO3吸收氨气,用标HCL吸收
荷泽市13429185431: 有机化合物氨值的测定方法?
纵燕走川: 1.如果是测氮:有杜马斯燃烧法、凯式定氮法. 当然了,卖个定氮仪,就方便了.最好的方法为杜马斯燃烧法定氮法,已经进入国标5009.5最新版本的修订稿,并已经审批了. 国内目前还是落后的凯式定氮法为主. 2.如果是测氨基(-NH2)就更好办了,除了上述的办法外,用茚三酮显色,再用UV扫描就OK了.
荷泽市13429185431: 测定各种土壤理化指标的国家标准是什么包括总有机碳(TOC)、微生物量碳、可溶性有机碳、氮磷、孔隙度、ph值、易氧化碳等、谢谢~ - ?
纵燕走川:[答案] 测定土壤理化指标有很多标准文件,部分指标有国家标准,部分用农业行业标准,由于指标太多,故列出土壤测定的一些方法,通过方法可以搜索到行业标准或国家标准的具体内容,供参考: 土壤质地 国际制;指测法或密度计法(粒度分布仪法)...
荷泽市13429185431: 有机物中总氮的测定 - ?
纵燕走川: 在此有机物中N是怎么存在的呢? 酰胺或氨基机构的直接用凯式定氮,偶氮或肼需先加Zn粉还原后再消解,杂环氮需先用氢碘酸或红磷还原后再消解,对于含碳量较高的(大于百分之10)的在消解液中加入少量多碳化合物.
荷泽市13429185431: 有机肥料全氮含量是多少 - ?
纵燕走川: 这个是需要自己测量的,不同的化肥不同的含氮量.提供一下测量方法:有机肥料全氮的测定采用硫酸-过氧化氢消煮、碱化后蒸馏定氮的方法,适用于非泥质有机肥料中全氮含量的测定.本方法依据NY/T297—1995制定. 方法原理有机肥料中...
荷泽市13429185431: 有机物的总氮测定 - ?
纵燕走川: 凯式定氮法 硫酸做消解液,加入催化剂硫酸铜,适量硫酸钾,再加氢氧化钠加热蒸馏,用硼酸液吸收氨气,最后硫酸滴定. 具体数据和方法查阅资料.
荷泽市13429185431: 蛋白质及氨基酸的测定有哪些方法?求大神帮助 - ?
纵燕走川: 楼主你好: 测定蛋白质最基本的方法是定氮法,即先测定样品中的总氮量,再由总氮量计算出样品中蛋白质的含量.蛋白质含量测定最常用的方法是凯氏定氮法,它是测定总有机氮的最准确和操作较简便的方法之一,在国内外应用普遍.此外,...
荷泽市13429185431: 凯氏定氮法适用于所有含氮化合物的测定吗 - ?
纵燕走川: 对于所有非正价态氮元素都可以测定,对于正价态的不行.比如硝酸根、硝酸酯,硝基和亚硝基化合物不宜采用此法.