生物关于DNA的实验
因为这个病毒只有蛋白质和DNA,而只有DNA进入了细菌内,产生了子代病毒。这个实验证明了噬菌体(生物的一类)的遗传物质是DNA,要证明其它生物遗传物质也是DNA还要进行更多的实验。目前的研究结论是,绝大多数的生物的遗传物质是DNA,少数病毒遗传物质是RNA
第二步:制备符合要求的培养基,均分为三份,标号为ABC
A不加任何提取物B加入提取出的s型细菌DNA C加入提取出的s型细菌DNA和DNA酶
第三步;分别向三组培养基中加入r型细菌
第四步:将接种后的培养装置放在适宜温度下培养一段时间,观察菌落生长状况
预测实验结果:AC培养基上只有R型细菌,B上既有R型菌又有S型菌
得出实验结论:促进R型菌转化为S型菌的物质是DNA
【我们现在正在做这道题,也没答案,这是我自己做的】
2.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。
3.获取较纯净的DNA的关键步骤。
(1)充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
(2)沉淀DNA时必须用冷酒精实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱(至少5S以下)中至少存放24 h。
(3)正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动510 min。
三 参考资料
实验原理的补充介绍
1.DNA的释放 DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。同时,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),于是释放出DNA,当然也有RNA。但是,释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起。
2.将DNA与蛋白质分离 根据二者的特性,即在浓度较高的氯化钠溶液(物质的量浓度为2 moL/L )中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,Na+与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈溶解状态。
3.DNA的析出与获取 利用DNA在浓度较低的氯化钠溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液中加入大量(300 mL )蒸馏水,稀释氯化钠溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离。这时,加上不停地搅拌,溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤,滤去蛋白质,就可以获取DNA的黏稠物了。如果采用离心法则更好,用4 000 r/min 的旋转频率,离心15 min ,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含DNA。
4.DNA的再溶解 再用较高浓度的氯化钠溶液去溶解DNA黏稠物。
5.DNA的沉淀和浓缩 除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na+的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的DNA丝状物,可以用缓缓旋转玻璃棒的方法卷起(因为玻璃棒有吸附DNA的作用)。
6.DNA的鉴定 本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法(配方见下述的“药品配制”)。二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。
鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。
二苯胺试剂的配制
A液: 15 g二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中,再加15 mL浓硫酸,用棕色瓶保存。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化,再使用。
B液: 乙醛的体积分数为0.2%的溶液。
配制: 将0.1 mL B液加入到10 mL A液中,现配现用。
DNA粗提取与鉴定的另一种方法
1.材料用具
新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。
塑料烧杯,量筒,玻璃棒,尼龙纱布,陶瓷研钵,试管,试管架,试管夹,漏斗,酒精灯,石棉网,三角架,火柴,刀片,天平。
研磨液,体积分数为95%的酒精溶液,二苯胺试剂,蒸馏水。
2.方法步骤
(1)DNA的粗提取
①准备材料 将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24 h。
②取材 称取30 g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨 将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。
④过滤 在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1 000r/min的旋转频率,离心25 min,取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰箱中放置几分后,再取上清液。
⑤加冷酒精 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。
(2)DNA的鉴定
①配制二苯胺试剂 取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混匀。
②鉴定 取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
研磨液的配制方法
Tris:10.1 g(相对分子质量为121.14),先加50 mL 蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 moL/L 的盐酸调至pH8.0,再加下述药品。
NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)
EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)
SDS:20 g(相对分子质量288.3)
待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1 000 mL。
若在室温低于20 ℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解。如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用。
研磨液中几种药品的作用
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离。
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。
物质的量浓度为0.15 moL/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA。
Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态。(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
鉴定DNA的其他方法 用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。
2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。
3.将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280 nm处)。
4个关于DNA的科学事实,看完才知道
为什么说Meselson-Stahl实验是生物学最美的实验
Meselson-Stahl实验被称为“生物学中最漂亮的实验”,由于这个著名的实验以及其他重要的研究,Meselson获得了2004的Lasker医学奖,此前,他曾在1995年获得摩尔根奖章。1953年4月25日,Watson和Crick发表DNA结构的著名论文,接着(5月30日)他们发表了关于DNA遗传功能的论文,提出了后来被称为半保留的DNA复制...
高一生物:观察DNA和RNA分布实验中,为什么要用到盐酸水浴加热
1、盐酸的作用 a、增加细胞的通透性,是染色分子容易进入细胞内。b、促使染色体中的蛋白质与DNA分离,便于细胞核中DNA被甲基绿染上颜色。2、水浴加热的作用 增加染料分子的运动速率,促使染料分子快速进入细胞与DNA和RNA结合,从而促进染色反应快速进行而使效果更明显。
证明DNA是遗传物质的两个经典实验是什么,考试中
32P和35S)肺炎双球菌转化实验的结论:证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。噬菌体侵染细菌实验的结论:证明DNA是遗传物质,不能证明蛋白质不是遗传物质,因蛋白质没有进入细菌体内。值得注意的是两者都不能证明DNA是主要的遗传物质。两个实验遵循相同的实验设计原则——对照原则 ...
赫尔希和蔡斯的实验说明了什么
赫尔希和蔡斯的实验说明了DNA是遗传物质,但不能说明DNA是主要遗传物质,也不能说明蛋白质不是遗传物质。赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染实验是生命科学发展史上的经典实验。在赫尔希和蔡斯做噬菌体侵染细菌实验之前已有艾弗里的实验,但艾弗里的实验材料处理有些遗憾,DNA中混有极少量的蛋白质。除此外,当时人们...
高考生物实验有哪些啊?
(6)若实验中所得黏稠物太少,其原因是什么? 第一次加蒸馏水过少,细胞未充分胀破;第二次加蒸馏水过多或过少;第一次过滤用了多层纱布;第二次过滤用了一层纱布;使用了玻璃烧杯。 (7)两次加入蒸馏水的目的分别是什么? 第一次是为了使血细胞吸水胀破;第二次是为了降低氯化钠的浓度,有利于DNA有析出。 (8)...
人和动物基因结合实验
关于人和动物基因结合实验内容如下:人兽基因混合实验是指美联社在2009年11月11日报道的、英国医学科学院的科学家们决定将开展一项具有争议的、人兽混合基因医学研究课题实验或其实验计划。具体是把人类的DNA应用到动物医学实验中并判断这项争议性医学研究究竟能够走多远,以确定人类基因在动物体内最多可以占...
求助,提取古生物dna,进行转化实验
霍纳希望利用从鸡身上提取的DNA复活一只小型恐龙。古生物学家杰克·霍纳认为,通过基因工程的方法,我们能复活一种小型恐龙,他称之为“鸡恐龙”。 (化石网报道)据新浪科技(任天):2009年,世界知名的古生物学家杰克·霍纳(Jack Horner)宣布了一项大胆的计划,提出要从恐龙的后裔——鸡的身上获取源自恐龙的古老DNA(脱氧...
探究遗传物质是dna还是rna的实验原理
1. 确定遗传物质的类型:DNA和RNA具有不同的化学组成,可以通过一些特定的试剂进行区分。例如,我们可以使用酸性破裂剂来分离细胞中的DNA和RNA,然后通过酶的反应来判断其类型。DNA可以被酶RNase H降解而不受DNA酶的影响,而RNA则可以被DNA酶降解。2. 执行染色实验:DNA和RNA可以通过染色实验来区分。常用...
DNA是遗传物质的实验。
肺炎双球菌转化实验说明,S型死菌体内有一种“转化因子”能使S型细菌转化为R型细菌。艾弗里的实验证明DNA是遗传物质,但没有证明蛋白质不是遗传物质(分离不完全)。噬菌体侵染细菌试验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质。(因为噬菌体只有蛋白质外壳和DNA,可完全分离)...
科学家是怎样通过实验证明DNA是遗传物质
1952年,美国科学家赫尔希和蔡斯通过噬菌体侵染大肠杆菌的实验证明DNA是遗传物质。他们采用的方法是用放射性同位素硫和磷标记噬菌体的蛋白质外壳和DNA,再去侵染未标记的大肠杆菌。
奚沈盐酸:[答案] 一般大实验的流程是: 1.提取DNA ,分离及纯化,电泳验证并检测浓度,稀释待用或保存. 2.PCR扩增目的基因,电泳检测或测序等等 3.重组:以上的步骤,然后转化,外源基因表达,蛋白质检测SDS-PAGE,western blot等技术. 4.也可根据需要测序...
湛江市18725499629: 什么实验证明了dna是主要的遗传物质 - ?
奚沈盐酸:[答案] DNA是主要的遗传物质这一结论是随人们逐步认识到的,它的认识主要通过三个实验来完成. 肺炎双球菌转化实验、T2噬菌体侵染细菌的实验(用分别含有放射性同位素35S和放射性同位素32P培养基培养大肠杆菌.)、烟草花叶病毒的感染和重建...
湛江市18725499629: 高中生物必修二第一章中有个实验是“DNA的粗提取”,此实验中用玻璃棒搅拌时,为什么要“轻轻”的搅拌? - ?
奚沈盐酸:[答案] DNA结合成丝状,易断,轻轻的搅拌防止DNA断裂
湛江市18725499629: 生物关于DNA的实验 - ?
奚沈盐酸: 1.实验材料必须准备充足.本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得.每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 ...
湛江市18725499629: 证明DNA是遗传物质的两个重要试验的主要步骤是什么了? - ?
奚沈盐酸:[答案] 一、肺炎双球菌的转化实验(格里菲思,1928) 对此,教师在讲解是主要讲清以下几点: 1、格里菲思采取“加热杀死”的目的是针对当时“认为蛋白质在遗传中起决定作用的物质”,蛋白质在高温状态下易变性的特性. 2、加热杀死的要求:温度...
湛江市18725499629: 证明DNA是遗传物质的实验有哪些?小鼠的实验是一个什么样的过程?求高人解答,谢谢 - ?
奚沈盐酸: 肺炎双球菌的转化实验和噬菌体侵染细菌的实验 1、证明DNA是遗传物质的实验关键是:设法把DNA与蛋白质分开,单独直接地观察DNA的作用. 2、肺炎双球菌的类型:①、R型(英文Rough是粗糙之意),菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒...
湛江市18725499629: 求高中生物实验“DNA的粗提取”“DNA的鉴定”的实验结果与分析用鸡血细胞液的,万分感谢.给个结果与分析的模版思路也行 - ?
奚沈盐酸:[答案] 用不同浓度的氯化钠根据蛋白质和DNA在其中溶解度不同,析出DNA. DNA鉴定 二苯胺 沸水浴加热 蓝色
湛江市18725499629: 高中生物在DNA粗提取与鉴定的实验中1,在DNA粗提取与鉴定的实验中,鉴定DNA是否存在,用的试剂()A,二苯胺(沸水浴)B,二苯胺(温水浴)... - ?
奚沈盐酸:[答案] A.DNA中的嘌呤核苷酸中的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ-酮基戊醛,在沸水浴条件下,它和二苯胺试剂反应使溶液呈蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂. B
湛江市18725499629: 高二生物书里关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验问题实验时,在提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清液? - ?
奚沈盐酸:[答案] 因为鸡血里的细胞核力含有DNA,经过离心,研磨,他的DNA从细胞核力分离出来,细胞核沉淀到底部,上清液里含有的红细胞蛋白都漂浮在上清液里,细胞核比较重,沉淀在底部,所以要出去没用的东西,只要含有DNA的细胞核.
湛江市18725499629: 动植物DNA提取步骤是什么? - ?
奚沈盐酸: 实验内容方法步骤 提取DNA(1)破碎细胞,释放DNA取5~10 mL鸡血细胞悬液注入50 mL烧杯中,加蒸馏水20 mL,同时,用玻璃棒沿一个方向快速充分搅拌,使血细胞过度吸水破裂,细胞核内物质释放出来,然后用纱布过滤取其滤液于500 mL...