生物关于DNA的实验

高中生物关于证明DNA是遗传物质的实验~

因为这个病毒只有蛋白质和DNA，而只有DNA进入了细菌内，产生了子代病毒。这个实验证明了噬菌体（生物的一类）的遗传物质是DNA，要证明其它生物遗传物质也是DNA还要进行更多的实验。目前的研究结论是，绝大多数的生物的遗传物质是DNA，少数病毒遗传物质是RNA

第二步：制备符合要求的培养基，均分为三份，标号为ABC
A不加任何提取物B加入提取出的s型细菌DNA C加入提取出的s型细菌DNA和DNA酶

第三步；分别向三组培养基中加入r型细菌


第四步：将接种后的培养装置放在适宜温度下培养一段时间，观察菌落生长状况

预测实验结果：AC培养基上只有R型细菌，B上既有R型菌又有S型菌

得出实验结论：促进R型菌转化为S型菌的物质是DNA

【我们现在正在做这道题，也没答案，这是我自己做的】

1.实验材料必须准备充足。本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。如果不具备购买活鸡的条件,也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。

2.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。

3.获取较纯净的DNA的关键步骤。

(1)充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。

(2)沉淀DNA时必须用冷酒精实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱(至少5S以下)中至少存放24 h。

(3)正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动510 min。

三 参考资料

实验原理的补充介绍

1.DNA的释放 DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。同时,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),于是释放出DNA,当然也有RNA。但是,释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起。

2.将DNA与蛋白质分离 根据二者的特性,即在浓度较高的氯化钠溶液(物质的量浓度为2 moL/L )中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,Na+与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈溶解状态。

3.DNA的析出与获取 利用DNA在浓度较低的氯化钠溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液中加入大量(300 mL )蒸馏水,稀释氯化钠溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离。这时,加上不停地搅拌,溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤,滤去蛋白质,就可以获取DNA的黏稠物了。如果采用离心法则更好,用4 000 r/min 的旋转频率,离心15 min ,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含DNA。

4.DNA的再溶解 再用较高浓度的氯化钠溶液去溶解DNA黏稠物。

5.DNA的沉淀和浓缩 除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na+的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的DNA丝状物,可以用缓缓旋转玻璃棒的方法卷起(因为玻璃棒有吸附DNA的作用)。

6.DNA的鉴定 本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法(配方见下述的“药品配制”)。二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。

二苯胺试剂的配制

A液： 15 g二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中,再加15 mL浓硫酸,用棕色瓶保存。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化,再使用。

B液： 乙醛的体积分数为0.2%的溶液。

配制： 将0.1 mL B液加入到10 mL A液中,现配现用。

DNA粗提取与鉴定的另一种方法

1.材料用具

新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。

塑料烧杯,量筒,玻璃棒,尼龙纱布,陶瓷研钵,试管,试管架,试管夹,漏斗,酒精灯,石棉网,三角架,火柴,刀片,天平。

研磨液,体积分数为95%的酒精溶液,二苯胺试剂,蒸馏水。

2.方法步骤

(1)DNA的粗提取
①准备材料 将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24 h。
②取材 称取30 g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨 将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。
④过滤 在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1 000r/min的旋转频率,离心25 min,取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰箱中放置几分后,再取上清液。
⑤加冷酒精 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。

(2)DNA的鉴定
①配制二苯胺试剂 取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混匀。
②鉴定 取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。

研磨液的配制方法

Tris：10.1 g(相对分子质量为121.14),先加50 mL 蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 moL/L 的盐酸调至pH8.0,再加下述药品。
NaCl：8.76 g(相对分子质量58.44)
EDTA：37.2 g(相对分子质量372.24)
SDS：20 g(相对分子质量288.3)

待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1 000 mL。

若在室温低于20 ℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解。如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用。

研磨液中几种药品的作用

SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离。
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。
物质的量浓度为0.15 moL/L的氯化钠溶液：能很好地溶解DNA。
Tris/HCl：提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态。(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
鉴定DNA的其他方法 用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。
2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。
3.将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280 nm处)。

4个关于DNA的科学事实，看完才知道

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湛江市18725499629： 有关DNA的常见的实验都有哪些? - ？
奚沈盐酸：[答案] 一般大实验的流程是: 1.提取DNA ,分离及纯化,电泳验证并检测浓度,稀释待用或保存. 2.PCR扩增目的基因,电泳检测或测序等等 3.重组:以上的步骤,然后转化,外源基因表达,蛋白质检测SDS-PAGE,western blot等技术. 4.也可根据需要测序...

湛江市18725499629： 什么实验证明了dna是主要的遗传物质 - ？
奚沈盐酸：[答案] DNA是主要的遗传物质这一结论是随人们逐步认识到的,它的认识主要通过三个实验来完成. 肺炎双球菌转化实验、T2噬菌体侵染细菌的实验(用分别含有放射性同位素35S和放射性同位素32P培养基培养大肠杆菌.)、烟草花叶病毒的感染和重建...

湛江市18725499629： 高中生物必修二第一章中有个实验是“DNA的粗提取”,此实验中用玻璃棒搅拌时,为什么要“轻轻”的搅拌? - ？
奚沈盐酸：[答案] DNA结合成丝状,易断,轻轻的搅拌防止DNA断裂

湛江市18725499629： 生物关于DNA的实验 - ？
奚沈盐酸： 1.实验材料必须准备充足.本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得.每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 ...

湛江市18725499629： 证明DNA是遗传物质的两个重要试验的主要步骤是什么了? - ？
奚沈盐酸：[答案] 一、肺炎双球菌的转化实验(格里菲思,1928) 对此,教师在讲解是主要讲清以下几点: 1、格里菲思采取“加热杀死”的目的是针对当时“认为蛋白质在遗传中起决定作用的物质”,蛋白质在高温状态下易变性的特性. 2、加热杀死的要求:温度...

湛江市18725499629： 证明DNA是遗传物质的实验有哪些?小鼠的实验是一个什么样的过程?求高人解答,谢谢 - ？
奚沈盐酸： 肺炎双球菌的转化实验和噬菌体侵染细菌的实验 1、证明DNA是遗传物质的实验关键是:设法把DNA与蛋白质分开,单独直接地观察DNA的作用. 2、肺炎双球菌的类型:①、R型(英文Rough是粗糙之意),菌落粗糙,菌体无多糖荚膜,无毒...

湛江市18725499629： 求高中生物实验“DNA的粗提取”“DNA的鉴定”的实验结果与分析用鸡血细胞液的,万分感谢.给个结果与分析的模版思路也行 - ？
奚沈盐酸：[答案] 用不同浓度的氯化钠根据蛋白质和DNA在其中溶解度不同,析出DNA. DNA鉴定 二苯胺 沸水浴加热 蓝色

湛江市18725499629： 高中生物在DNA粗提取与鉴定的实验中1,在DNA粗提取与鉴定的实验中,鉴定DNA是否存在,用的试剂()A,二苯胺(沸水浴)B,二苯胺(温水浴)... - ？
奚沈盐酸：[答案] A.DNA中的嘌呤核苷酸中的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ-酮基戊醛,在沸水浴条件下,它和二苯胺试剂反应使溶液呈蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂. B

湛江市18725499629： 高二生物书里关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验问题实验时,在提取鸡血中的DNA时,为什么要除去血液中的上清液? - ？
奚沈盐酸：[答案] 因为鸡血里的细胞核力含有DNA,经过离心,研磨,他的DNA从细胞核力分离出来,细胞核沉淀到底部,上清液里含有的红细胞蛋白都漂浮在上清液里,细胞核比较重,沉淀在底部,所以要出去没用的东西,只要含有DNA的细胞核.

湛江市18725499629： 动植物DNA提取步骤是什么? - ？
奚沈盐酸： 实验内容方法步骤 提取DNA(1)破碎细胞,释放DNA取5~10 mL鸡血细胞悬液注入50 mL烧杯中,加蒸馏水20 mL,同时,用玻璃棒沿一个方向快速充分搅拌,使血细胞过度吸水破裂,细胞核内物质释放出来,然后用纱布过滤取其滤液于500 mL...