克隆载体与表达载体的区别
表达载体和克隆载体的区别:
1、性质不同
表达载体:生物学中,基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。
克隆载体:克隆载体通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的 外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。
2、组成不同
表达载体:表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因。
克隆载体:常见的载体有质粒、噬菌粒、酵母人工染色体。
扩展资料:
克隆载体对载体的要求:
1、能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力。
2、容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好。
3、容易插入外来核酸片段,插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点。
4、容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。
5、有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞、或携带着外来的核酸序列进入宿主细胞都能容易被辨认和分离出来。这才介于克隆操作。
参考资料来源:百度百科——表达载体
参考资料来源:百度百科——克隆载体
表达载体四部分:目的基因、启动子、终止子、标记基因常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中。表达载体(Expression vectors)就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点(如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp),其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因。
一、原理不同
1、克隆载体:采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的 外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。
2、表达载体:在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。
二、要求不同
1、克隆载体:能在宿主细胞中复制繁殖,而且最好要有较高的自主复制能力;容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好;容易从宿主细胞中分离纯化出来, 这才便于重组操作。
2、表达载体:常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为黏性末端,也有平末端),采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。
三、组成部分不同
1、克隆载体:病毒、质粒或高等生物细胞。
2、表达载体:目的基因、启动子、终止子、标记基因。
参考资料来源:
百度百科-表达载体
百度百科-克隆载体
克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制
而表达载体是一些用于工程生产的细菌 他们被导入目标基因 这些目标基因会在此类细菌中得到表达 生产出我们需要的产物 导入的基因是有克隆载体产出的
亚细胞定位载体可以当过表达载体用吗
可以。根据查询豆丁网显示,表达载体就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件,使目的基因能够表达的载体。亚细胞定位是查找生物大分子在细胞内的具体存在的位置,如在核内、胞质内或者细胞膜上存在。因此亚细胞定位载体可以当过表达载体用。在选择植物亚细胞定位载体时,需要针对具体的研究目的和研究对象...
基因工程为何要先构建克隆载体然后后构建表达载体能否在获得cDNA后直...
你得到的cDNA的量是很少的,先放在克隆载体上是为了获得更多的你所需要的cDNA,这样做的话不至于在做完实验后突然发现你要的那个cDNA被你用完了,然后你又要重新再去很复杂的提取
基因表达载体和重组质粒的区别
一、构成不同 基因表达载体:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因表达载体的对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
表达载体和表达载体有何不同?它们各起什么作用?各须具备哪些遗传原件...
这是什么问题哦?谁能看懂?克隆载体一般用于克隆外源DNA片段,复制、MCS、marker等。表达载体一般专为表达基因所用,复制、MCS、Marker、表达基因所需的启动子与终止子。
请问什么是穿梭质粒载体和表达质粒载体?
穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制表达的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。表达质粒就是指带有启动子,增强子等等,使其在宿主体内不仅仅是可以复制,还能够通过转录翻印,在宿主内表达出相应蛋白的质粒 ...
分别阐述克隆载体和表达载体(各5种)及其特点和用途
克隆载体基本上均来自微生物,主要有三大类:原核生物克隆载体,真核生物克隆载体和人工染色体等。
克隆菌株与表达菌株的区别
定义不同、制备不同。1、定义不同:克隆菌株是指通过体外培养和分离,从单个细胞中分离出的完全相同的细菌群体,而表达菌株是指可以用来表达特定蛋白的特定细菌。2、制备不同:克隆菌株的制备首先要对菌株进行基因改造,以提高其蛋白表达能力,其次构建合适的表达载体,而表达菌株的制备首先是定向改造菌株,...
目的基因先克隆入克隆载体再亚克隆入表达载体与直接将目的基因克隆到表...
T载体是为了再次确定你获得的目的基因是你想要的目的基因,并且克隆到T载体上可以保存目的基因。而目的基因克隆到表达载体上是为了研究你的目的基因的功能
过表达载体和表达载体的区别
组成成分、操作过程。1、组成成分:表达载体通常包含目的基因、启动子、终止子、复制原点、标记基因等,而过表达载体中除了包含这些基本组件外,往往还加入了一些能使目的基因高水平表达的增强子元件或其他调控元件。2、操作过程:构建表达载体时,通常需要将目的基因与启动子、终止子等调控元件重组在一起,...
载体与片段的摩尔比例如何计算
载体与插入片段比例一般是1:10,通过测定DNA浓度来调整。单酶切片段插入时,载体一定要去磷酸化,载体易自连;双酶切二者比例要适当,比例不对,载体也会自连,因为微生物有自己的修护系统。载体按功能 可分为克隆载体和表达载体。克隆载体是最简单的载体,主要用来克隆和扩增DNA片段。主要有质粒载体、...
笪范重组:[答案] 克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制而表达载体是一些用于工程生产的细菌...
济南市13178128081: 克隆载体与表达载体的区别 - ?
笪范重组: 克隆载体一般是原核细菌 将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接 在导入原核细菌内 质粒会在原核细菌内大量复制 形成大量的基因克隆 被克隆的基因不一定会表达 但一定被大量复制 而表达载体是一些用于工程生产的细菌 他们被导入目标基因 这些目标基因会在此类细菌中得到表达 生产出我们需要的产物 导入的基因是有克隆载体产出的
济南市13178128081: 基因载体与基因表达载体的区别? - ?
笪范重组:[答案] 在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用于在宿主细胞中获得外援...
济南市13178128081: 表达载体和克隆载体一样吗?有什么区别?实验室常用有哪些? - ?
笪范重组:[答案] 1.不一样 2.载体的分类 按功能分成: (1)克隆载体:都有一个松弛的复制子,能带动外源基因,在宿主细胞中复制扩增.它是用来克隆和扩增DNA片段(基因)的载体. (2)表达载体 :具有克隆载体的基本元件(ori,Ampr,Mcs等)还具有转录/翻译...
济南市13178128081: 克隆载体与表达载体有哪区别?它们分别都有哪些常见的类型?谢谢!?
笪范重组: 克隆载体:大多是高拷贝的载体,一般是原核细菌,将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接,再导入原核细菌内,质粒会在原核细菌内大量复制,形成大量的基因克隆,被克隆的基因不一定会表达,但一定被大量复制. 表达载体就是在克隆...
济南市13178128081: 载体与表达载体在结构上的区别 - ?
笪范重组: 载体(克隆载体)一般只用于基因的克隆、测序,所以它一般不需要来有驱动基因表达的启动子,或者在构建克隆载体的时候不需要考虑读码框的问题.但是表达载体一般包括能够在源一定宿主中驱动基因表达的启动子(比如在双子叶植物中驱动基因表达的烟草花叶病毒的启动子35S,或知者在单子叶中的UBI启动子),同时在构建表达载体时还需要考虑读码框的正确性.另外,具体到一些表达载体,可能还有T-DNA结构,用于将道目的基因整合到宿主染色体上.
济南市13178128081: 基因载体与基因表达载体的区别? - ?
笪范重组: 在基因工程中,携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的工具称为copy载体,载体实际上是具有运载能力的DNA.依据功能,载体可以分为克隆载体和表达zhidao载体.克隆载体用于在宿主细胞中克隆和扩增外援片段;表达载体则用于在宿主细胞中获得外援基因的表达产物.
济南市13178128081: 表达载体与克隆载体的优缺点?那个是较理想的载体?如何设计》? - ?
笪范重组: 表达载体 具有较高的蛋白质表达效率,一般因为具有强的启动子. 而克隆载体 只是为了保存基因片段,这样细胞内不会有很多表达的蛋白质而影响你别的工作.看你的目的而选吧 各有好处.
济南市13178128081: 载体的问题 - ?
笪范重组: 克隆载体只是携带外源基因,使其在宿主细胞内扩增,表达载体不仅使外源基因扩增,还要使其表达,原核和真核的调控元件不同,除了一楼提到的还有转录终止子,终止转录功能,防止合成的mRNA过长,还要考虑不同生物的核糖体结合位点,对于原核生物称为SD序列,它对翻译效率有明显的影响