为什么双缩脲试剂AB不能同时加入

作者&投稿:闽净 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
检验蛋白质加入双缩脲试剂AB液顺序不同的比照实验现象是什么~

双缩脲反应是指具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与cu2+反应,生成红紫色的络合物.所有的蛋白质均有此显色反应.双缩脲试剂就是指能与具有两个以上肽键的化合物发生红紫色显色反应的试剂.它是naoh和cuso4两种溶液.在实验过程中,先在含蛋白质的溶液中加入等体积的naoh溶液,混合均匀后,再滴几滴cuso4溶液(量较少).即先后加入naoh和cuso4溶液.如果在naoh中滴几滴cuso4溶液混合后,再加入到含蛋白质的溶液中,混合液中就没有cu2+,显色反应就不会发生.除-conh-有此反应外,-conh2-,-ch2-,nh2-,-cs-cs-nh2,等基团亦有此反应。

A液是提供碱性环境,以及适量的氢氧根离子
B液中有铜离子,会使蛋白质变性
所以不能改变顺序

根据原理:Cu离子在碱性条件下与双缩脲(NH2-CO-NH-CO-NH2)产生紫红色的络合物。如果AB同时加入,则产生了Cu(OH)2,失去了铜离子当然bu产生紫色的络合物了。
注:(NH2-CO-NH-CO-NH2)类似于肽键。

防止过早产生沉淀,使试管难以清洗或使实验现象模糊

会产生氢氧化铜沉淀,铜离子是显色的主要成分,就是铜离子被螯合后才生成紫色化合物的,同时加入,铜离子以沉淀的形式析出,就会失去它本身的作用。


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墉桥区17239357193: 双缩尿检验蛋白质 两个试剂为什么不一起加,而分开加? -
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墉桥区17239357193: 双缩脲试剂的使用为什么一定要先加A液再加B液 -
慕郊米氮: 因为A液和B液如果同时加一起,它们之间也会有反应发生,影响实验的效果,所以分开加好.

墉桥区17239357193: 您好,双缩脲试剂的使用为什么一定要先加A液再加B液啊?为什么B液才加2滴呢? -
慕郊米氮:[答案] 双缩脲试剂的原理是双缩脲能够在碱性条件下和铜离子形成配合物形成紫色物质,在使用双缩脲试剂时候,必须注意先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液形成碱性环境,再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液.(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液,再加入氢...

墉桥区17239357193: 在鉴定蛋白质时,为什么先加双缩脲试剂A后加双缩脲试剂B?如果先加B后加A会怎么样? -
慕郊米氮: 先加B的话会是蓝色沉淀看不到紫色.鉴定原理其实是蛋白质在碱性条件和铜离子反应

墉桥区17239357193: 双缩尿试剂A,B液要混合吗 -
慕郊米氮: 不要,双缩脲试剂使用时,先加入溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象. 将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀在加入双缩脲试剂B.只有斐林试剂才是要混合,而且是现配现用

墉桥区17239357193: 您好,双缩脲试剂的使用为什么一定要先加A液再加B液啊?谢谢!!! -
慕郊米氮: 双缩脲试剂的原理是双缩脲能够在碱性条件下和铜离子形成配合物形成紫色物质,在使用双缩脲试剂时候,必须注意先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液形成碱性环境,再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液.(若先加入硫酸铜[CuSO4]溶液,再加入氢氧化钠[NaOH]溶液,则无法充分制造碱性环境,此时CuSO4会与NaOH发生复分解反应,生成蓝色氢氧化铜[Cu(OH)2]沉淀,导致现象不清,无法较好地达到实验目的.).另外B液加2滴是因为过量会影响配位,影响实验现象.

墉桥区17239357193: 高中生物为什么蛋白质的检测要先注入双缩脲试剂A液,再注入双缩脲试剂B液,而不是将A液和B液混合好后再注 -
慕郊米氮: 先加氢氧化钠是为铜离子和蛋白质反应提供一个碱性环境,如果混装会生成氢氧化铜沉淀而使实验失败,如果先加硫酸铜,会使溶液呈蓝色而观察不到现象.

墉桥区17239357193: 检验蛋白质时,为什么双缩脲试剂B不能过量? -
慕郊米氮: 加入过量的双缩脲试剂B, CuSO4有碱性溶液中生成大量蓝色沉淀会遮蔽所产生的紫色.所以你不能加太多, 这样对你的实验造成影响的

墉桥区17239357193: 双缩脲法测定蛋白含量:双缩脲试剂AB液是否可以事先混匀,还是A B液先后加入样品溶液 -
慕郊米氮: 1、双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液. 先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,振荡均匀.如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色

墉桥区17239357193: 检测蛋白质实验中,加双缩脲试剂的量只有3~4滴,不能多加的原因是什么? -
慕郊米氮: 双缩脲试剂分为A液与B液.A为氢氧化钠,B为硫酸铜.双缩脲试剂与蛋白质反应的实质其实是与肽键反应.而肽键实际上是断开后与铜离子形成紫色复合物.该反应需在碱性环境下完成.但硫酸铜遇到大量碱会生成氢氧化铜沉淀.故仅仅滴加3~4滴硫酸铜溶液,以免蓝色的氢氧化铜盖住了紫色复合物的紫色导致观察失败.

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