寡核苷酸探针种类
首先，是特定序列的单一寡核苷酸探针，它直接针对某一特定的DNA序列，用于检测或定位目标区域。
其次，是简并性较高的成套寡核苷酸探针，它们通常由较短的片段组成，具有较高的识别可能性，适用于大规模的基因表达分析或基因定位。
最后，较长且简并性较低的成套寡核苷酸探针，虽然识别性较差，但能覆盖更广泛的区域，适用于全基因组或大规模测序实验。
在标记寡核苷酸探针时，常用32P作为放射性标记物。一种常见方法是通过T4噬菌体多核苷酸激酶，将[γ-32P]ATP的磷酸基团转移到寡核苷酸5'端，每个探针分子最多只能包含一个放射性原子。这通常用于探针的一次性标记。
另一种标记方法是利用大肠杆菌DNA聚合酶i Klenow片段，这种标记方法的比活性更高，每个寡核苷酸探针可以带有多个放射性原子，甚至能达到每毫克2×1010计数/（min·mg）的高放射性比活度，适用于需要高灵敏度的实验。
生物基因工程探针怎么制作出来的?
（1）根据要制备的探针序列，设计寡核苷酸引物和连接剂；（2）通过自动化合成仪器或手工合成方法，将所设计的基因探针序列逐个核苷酸连接成完整的探针；（3）在必要的情况下，对探针进行修饰和标记。优点：化学合成法高效，探针可制备数目多，比较适合用于大规模合成探针。由于探针制备过程中无需进行克隆、...
核酸分子杂交技术的基本原理
杂交的双方是待测核酸序列及探针（probe）,待测核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因组DNA和细胞总RNA。核酸探针是指用放射性核素、生物素或其他活性物质标记的，能与特定的核酸序列发生特异性互补的已知DNA或RNA片段。根据其来源和性质可分为cDNA探针、基因组探针、寡核苷酸探针、RNA...
高中生物pcr技术扩增的是两引物之间的核苷酸序列是什么意思
Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异...
基因诊断与其他诊断比较,最主要的特点在于
RFLR按孟德尔方式遗传，在某一特定家族中，如果某一致病基因与特异的多态性片断紧密连锁，就可用这一多态性片段为一种“遗传标志”，来判断家庭成员或胎儿是否为致病基因的携带者。甲型血友病、囊性纤维病变和苯丙酮尿症等均可借助这一方法得到诊断。（3）等位基因特异寡核苷酸探针杂交法。遗传疾病的遗传...
科普讲堂|实时荧光定量PCR检测方法
2. 基于探针的化学法 原理： 应用一个或多个荧光标记的寡核苷酸探针检测PCR扩增产物；依赖荧光能量共振传递检测特异性扩增产物。应用于核酸定量、基因表达验证、等位基因鉴别、SNP分型、病原体和病毒检测、多重PCR。优缺点： 探针法的鉴别能力远远大于DNA结合染料法，因为它们只与目的产物结合，从...
寡核苷酸探针杂交为什么要用ssc
寡核苷酸探针杂交为什么要用ssc 用人工合成的寡聚核苷酸片段做为核酸杂交探针应用十分广泛,可根据需要随心所欲...SSC溶液(20×):3mol\/L NaCl,0.3mol\/L柠檬酸钠。
用于基因分型的荧光探针PCR原理是什么
放射性同位素32P标记的寡核苷酸探针检测的敏感性、特异性和方法的可靠性均不容怀疑,对人们认识某些疾病与基因变异的关系起了很大的作用。但是,由于同位素不稳定和放射性危害,不能常规用于临床或法医检验,用非放射性物质(生物素、荧光素和地高辛等)标记的寡核苷酸探针分析PCR产物以确定核酸序列变异则是一种简便而安全的...
什么是PCR检测?他的原理是什么?需要什么材料?
Southern印迹杂交: 在两引物之间另合成一条寡核苷酸链(内部寡核苷酸)标记后做探针,与PCR产物杂交。此法既可作特异性鉴定,又可以提高检测PCR产物的灵敏度,还可知其分子量及条带形状,主要用于科研。 斑点杂交: 将PCR产物点在硝酸纤维素膜或尼膜薄膜上,再用内部寡核苷酸探针杂交,观察有无着色斑点,主要用于PCR产物特异...
...杂交就是用标记的探针通过分子杂交确定特异核苷酸序列或蛋白质分子在...
【答案】：错误原位杂交技术是专门指细胞内特殊核苷酸序列(DNA或RNA)定性与定位的技术方法，它是用标记的核酸探针通过分子杂交确定特异核苷酸序列在染色体上或细胞中的位置，并不涉及蛋白质的定位方法。
谁能详细地说一下southern blot的的原理和有什么应用吗?
一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。2、应用：（1）遗传病诊断；（2）DNA图谱分析；（...
不烟复方： 与原位杂交一样,检测原位PCR结果的探针可以是DNA探针,也可以是寡核苷酸探针,DNA探针的长度在100-200bp为宜,寡核苷酸探针为多个,在20-40bp为宜.
西藏自治区19793072536： 两个生化问题,急,线上等.1,比较脂肪酸合成和分解的异同 2,简述三大分子杂交技术的应用 - ？
不烟复方：[答案] 1.脂肪酸的生物合成,植物中是在叶绿体及前质体中进行,合成4~16碳及16碳以上的饱和脂肪酸.动物是在胞液中进行,只... cDNA探针、cRNA探针及寡核苷酸探针等几类.DNA探针还有单链和双链之分. 下面分别介绍这几种探针. 一、核酸探针的种类 ...
西藏自治区19793072536： DNA分子杂交技术,分子杂交技术,抗原抗体杂交技术的区别? - ？
不烟复方： 一、相关概念解释分子杂交是利用某些分子与另外的一些分子特异结合而形成结合体的过程,狭义指核酸分子杂交即具有一定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),在一定条件下按碱基互补配对原则经过退火处理,形成异质双链的过程....
西藏自治区19793072536： 基因检测方法有好几种,哪一种方式比较好 - ？
不烟复方： 需要按照实际需求去选择,没有哪个最好的说法,合适的就是最好的 常用基因诊断技术: 一、Southern印迹法(Southern blot)基本原理是:硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过DNA变性处理,覆以上述滤膜...
西藏自治区19793072536： 基因芯片及其在肿瘤研究中的应用有哪些? ？
不烟复方： 基因芯片又称 DNA芯片或探针微阵列.它将成千上万个寡核苷酸探针固定在约厘米大小的硅片上,或直接在硅片上原位合成寡核苷酸探针,然后将待研究的材料如DNA、RNA或 cDNA用荧光素或同位素标记,在DNA芯片上与探针杂交,通过激光共聚焦显微镜对芯片进行扫描,获取杂交探针的荧光信号,再经计算机比较荧光信号强度和分布模式图,从而得到所需的信息.基因芯片可分为寡核苷酸芯片和cDNA芯片两类.基因芯片在肿瘤研究中的应用:1.肿瘤基因表达水平的检测.2.肿瘤基因突变及多态性检测.3.寻找相关基因行基因诊断及基因药物设计.4.用于有效药物的筛选和药物治疗效果的评价.
西藏自治区19793072536： 生物芯片的分类 - ？
不烟复方： 生物芯片虽然只有10多年的历史,但包含的种类较多,分类方式和种类也没有完全的统一. (1)生物电子芯片:用于生物计算机等生物电子产品的制造. (2)生物分析芯片:用于各种生物大分子、细胞、组织的操作以及生物化学反应的检测. 前一...
