高效液相色谱法对流动相的要求有哪些?
高效液相色谱法对流动相的要求如下：
1、选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。
2、选用的溶剂应有高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱性能的改变。
3、选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配，如果使用紫外吸收检测器，就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂；若使用视差折光检测器，就不能用梯度洗脱。
4、选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力，以提高测定的灵敏度。
5、选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。
6、应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂，以保证工作人员的安全。
高效液相色谱仪的用处：
使用高效液相色谱仪时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。
高效液相色谱流动相的选择原则：
1、色谱醇的溶剂不要随意加满溶剂瓶
作为分析流动相，应避免不必要的浪费，防止污染环境，危害身体健康。应该根据样哦数量，计算需要使用的溶剂体积，添加适量流动相到试剂瓶中作为流动相。因为有些有机溶剂长期放置易变质，在分析时导致基线抬高，对一些分析，特别是质谱分析造成影响。
2、配置酸或碱性流动相时要考虑pH范围
有些酸并不适宜作为流动相，如盐酸、长期使用可能损坏泵及相关的钢制管线。注意选择合适的截止波长的溶剂作为流动相。紫外分析时，样品的检测波长至少应大于所用溶剂的截止波长20nm。
3、配置的盐溶液用滤膜过滤
常规液相用0.45µm滤膜过滤，高效液相色谱使用0.2µm滤膜过滤。水或缓冲盐溶液置于棕色瓶中，以防长菌，阻塞溶剂过滤器，降低泵的操作性能。质谱分析不能使用不挥发性盐作为流动相。使用挥发性盐作为流动相时，在保证分析的条件下，流动相中的盐尽量保持低浓度。
在做高效液相时流动相用完,有气体进入会产生什么后果
造成上述现象的主要原因有三条：一是流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；二是系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；三是在注入样品时不注意混入了空气。为了避免这类问题的出现，液相色谱实际分析过程中必须重视对流动相进行脱气处理。常用的脱气方法有以下几种：1. 吹氦脱气法 ...
气相色谱法与高效液相色谱法相同点和不同点
一、高效液相色谱法与气相色谱法的相同点 最基本的原理相同，都是吸附-脱附平衡，利用组分在固定相和流动相中的分配系数不同达到分离的目的。一、不同点 （一）应用范围不同 1、气相色谱法 分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难...
简要说明高效液相色谱法、经典液相色谱法、气相色谱法的主要异同点...
①相同点 都是液相色谱，原理都相同。②不同点 a.分离效率高;b.灵敏度高;c.操作自动化;d.分析速度快。(2)高效液相色谱法与气相色谱法的异同点 ①相同点 都是利用物质在两项中分配系数不同而分离的。②不同点 a.高效液相色谱法不破坏试样，可方便地制备纯样;b.分离效果与流动相的性质密切相...
高效液相色谱法的原理
补充说明：高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相...
高效液相色谱法( HPLC)的原理是什么?
高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是一种使用广泛的分离和分析技术，适用于大规模和高精度度的分析。它的主要步骤包括样品进样、分离、检测和数据处理。（1）样品进样：将反应体系中的各组分通过进样阀加入到高压输液泵中。（2）分离：将样品通过色谱柱进行分离，色谱柱中的固定相和流动相之间存在...
3.高效液相色谱法的色谱系统哪些是不得改变的,哪些是可以适当改变的...
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、制药等领域。其色谱系统包括多个组件，有些是不得改变的，而有些则可以适当改变以满足不同分析需求。不得改变的色谱系统组件：色谱柱： 色谱柱是HPLC系统中至关重要的部分，决定了分离效果和分析的准确性。柱的选择应基于分析物性质...
用高效液相色谱法做标准曲线,应如何配制样品?
做标准曲线首先有标准物质，然后有一个曲线的浓度范围。比如说，标准物质X，浓度是0.1mg\/ml-2mg\/ml。配制样品的时候，取X适量，配制成浓度为10mg\/ml的母液，然后逐级稀释，配制成浓度为0.1mg\/ml，0.2mg\/m，0.5mg\/ml，1.0mg\/ml，2.0mg\/ml的样品，然后按照浓度由低到高的顺序进样分析。（由...
高效液相色谱中流动相的A液B液的作用是什么?假如是测定己二酸如何选择A...
A和B只是代称.主要就是指两个通道的流动相,一个通道为A,一个通道为B.方法上都会注明A和B指的是什么液体.A液和B液是两种互溶的溶剂，一个洗脱能力强，一个洗脱能力差，这样，通过调节A和B的比例来获得洗脱能力不同的混合流动相，实现样品在色谱柱上的分离。当然，你也可以把A和B两相都放上洗脱...
高效液相色谱分析法的原理是什么?
高效液相色谱分析原理：（一）高效液相色谱分析的流程：由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。废液流入废液瓶。遇到复杂的混合物分...
高效液相色谱测右旋布洛芬流动相的选择
2>0.02mol\/L的乙腈-缓冲盐 （PH3.5 58:42）的配置方法如下：缓冲液配置：称取磷酸二氢钾13.61g（0.02mol）加水950ml溶解，加磷酸调PH至3.50，加水至1000ml（无需容量瓶，用大量筒即可）。流动相配置：缓冲液420ml，乙腈580ml，混合，过0.2um（或0.45um）滤膜即可。如果对你有帮助，望...
陟汤乙酰： 由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对组分的竞争.因此,正确选择流动相直接影响组分的分离度.对流动相溶剂的要求是:(1)溶剂对于待测样品,必须具有合适的极性和良好的选择性.(2)溶剂要与检测...
宾川县13067781660： 高效液相色谱仪是以什么为流动相 - ？
陟汤乙酰： 干净,没有小颗粒,以免堵塞色谱柱. 对样品有合适的洗脱作用,这个要进行测试.还有就是在检测器上的响应不应该干扰样品的检测. 其他要求就是柱子的要求了,在一定范围的pH内,流动相的极性,这些在色谱柱的说明书上都会有写明,可以参照执行.
宾川县13067781660： 高效液相色谱测右旋布洛芬流动相的选择 - ？
陟汤乙酰： 1>乙腈-磷酸二氢钾的好. 因为布洛芬(无论是右选还是左旋)是一个有机酸,极性较大,分离极性较大的酸性物质一般采用酸性缓冲盐溶液.2>0.02mol/L的乙腈-缓冲盐 (PH3.5 58:42)的配置方法如下: 缓冲液配置:称取磷酸二氢钾13.61g(0.02mol)加水950ml溶解,加磷酸调PH至3.50,加水至1000ml(无需容量瓶,用大量筒即可). 流动相配置:缓冲液420ml,乙腈580ml,混合,过0.2um(或0.45um)滤膜即可.如果对你有帮助,望采纳.
宾川县13067781660： 高效液相色谱仪主要包括哪几个部分 - ？
陟汤乙酰： 高效液相色谱仪般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成,具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分. 其整体组成类似于气相色谱,但是针对其流动相...
宾川县13067781660： 高效液相色谱法有＂四高一广＂的特点有哪些 - ？
陟汤乙酰： 高效液相色谱法有＂四高一广＂的特点:高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须用色谱泵对流动相加高压.高速:分析速度快、流动相流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时.高效:分离效能高.可选择不同的固定相和流动相搭配以达到最佳分离效果,高效液相色谱比气相色谱的分离效能高出许多倍.高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级.应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势.
宾川县13067781660： 气相与液相色谱区别 - ？
陟汤乙酰： 气相与液相色谱的区别: 定义差异: 气相色谱仪,是指用气体作为流动相的色谱分析仪器;液相色谱仪是指利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器. 分离原理差异: 气相色谱仪...
宾川县13067781660： 高效液相色谱法配流动相需要注意什么 - ？
陟汤乙酰： 就是按照标准配制就好了. 如果调解pH值的话,注意pH值按照标准上下不要超过0.05另外流动相配制完成之后需要减压抽滤,然后超声10-15min,为的是脱气.防止气体进入仪器,色谱柱和检测器.
宾川县13067781660： 高效液相色谱柱的分离测试中流动相中ph应控制在什么范围内 - ？
陟汤乙酰： 这要看你的被测物质和色谱柱耐受程度.这个没有一个准确范围,反向色谱常用的C18柱是在酸性条件下(ph2~8)工作的. 其他色谱柱在使用时首先就是要了解色谱柱的PH工作范围,查看说明书就能知道你的色谱柱是在什么ph环境下工作的.其次就是你样品中物质组成,化合物pKa值与流动相pH值关系到化合物的解离状态,所以物质的pKa值是设定pH范围的重要依据.
宾川县13067781660： 如何使用液相色谱 - ？
陟汤乙酰： 原发布者:jing2595832液相色谱基础知识2017年04月11日一、什么是色谱色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器.色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分...
