酵母rna的提取及组分鉴定实验报告?
酵母rna的提取及组分鉴定实验报告如下:
一、实验目的。
1、掌握稀碱法提取酵母RNA勺原理和方法。
2、掌握紫外线(UV吸收法测定核酸浓度的原理)。
3、熟悉紫外分光光度计勺使用方法。
二、实验原理。
核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。研究核酸需要纯度很高的核酸,所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸(RNAo RNA,离体后稳定性很差,含量低,所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性,防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌,尤其重要的是防止 RNA酶的作用。本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸(RNA都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物,而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的,故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA勺方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者是利用碱使细菌细胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性,使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA勺时候应该注意掌握温度,直接至90~100C浸提,避免在20~70C的时间过长,因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围,会使RNA降解而降低提取率。这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA勺一般方法。
但是这两种方法各有利弊,如浓盐法提取的RNA屯度高,而稀碱法提取的时间短,提取率高,更利于工业化生产。
RNA 在260nm处有最大吸收峰,一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比,故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA含量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收,对RNAM定有一定的干扰作用,但蛋白质的最大吸收峰在280nm 处,如同时测定280nm的光吸收,通过计算可消除其对 RNA测定的影响。因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm 的吸光度,可通过计算测定溶液中 RNA的含量。
三、实验器材。
电子天平、离心机、量筒、烧杯、锥形瓶、紫外分光光度计、容量瓶(100mL、移液管(5ml)、试管和试管架、PH 1-14试纸。
以上内容参考:百度百科-rna
酵母rna的提取及组分鉴定实验报告如下。
目的和要求,了解核酸的组成及其提取原理及方法。掌握鉴定核酸组分的方法。
基本原理,由十RNA的来源很多,因提取制备方法也很各异。一般有苯酚法,去污剂法和盐酸瓜法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶十十层被酚饱和的水相中。DNA和蛋白质训留在酚层中。il水层加入乙醇后,RNA即以自色絮状沉淀析出,此法能较好的除去DNA和蛋白质。
工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA,主要用作制备核苷酸的原料,其工艺比较简单。浓盐法使用10%左右氯化钠溶液,90℃提取3-4h,迅速冷却,提取液经离心后,上清液用乙醇沉淀RNA。
酵母的作用
美国、日本及欧洲一些国家在普通的粮食制品如面包、蛋糕、饼干和烤饼中掺入5%左右的食用酵母粉以提高食品的营养价值。酵母自溶物可作为肉类、果酱、汤类、乳酪、面包类食品、蔬菜及调味料的添加剂。
在婴儿食品、健康食品中作为食品营养强化剂。由酵母自溶浸出物制得的5′-核苷酸与味精配合可作为强化食品风味的添加剂。从酵母中提取的浓缩转化酶用作方蛋夹心巧克力的液化剂。
从以乳清为原料生产的酵母中提取的乳糖酶,可用于牛奶加工以增加甜度,防止乳清浓缩液中乳糖的结晶,适应不耐乳糖症的消费者的需要。
酵母rna的提取及组分鉴定实验报告如下。
目的和要求,了解核酸的组成及其提取原理及方法。掌握鉴定核酸组分的方法。
基本原理,由十RNA的来源很多,因提取制备方法也很各异。一般有苯酚法,去污剂法和盐酸瓜法。其中苯酚法又是实验是最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶十十层被酚饱和的水相中。DNA和蛋白质训留在酚层中。il水层加入乙醇后,RNA即以自色絮状沉淀析出,此法能较好的除去DNA和蛋白质。
工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA,主要用作制备核苷酸的原料,其工艺比较简单。浓盐法使用10%左右氯化钠溶液,90℃提取3-4h,迅速冷却,提取液经离心后,上清液用乙醇沉淀RNA。
酵母的作用
美国、日本及欧洲一些国家在普通的粮食制品如面包、蛋糕、饼干和烤饼中掺入5%左右的食用酵母粉以提高食品的营养价值。酵母自溶物可作为肉类、果酱、汤类、乳酪、面包类食品、蔬菜及调味料的添加剂。
在婴儿食品、健康食品中作为食品营养强化剂。由酵母自溶浸出物制得的5′-核苷酸与味精配合可作为强化食品风味的添加剂。从酵母中提取的浓缩转化酶用作方蛋夹心巧克力的液化剂。
从以乳清为原料生产的酵母中提取的乳糖酶,可用于牛奶加工以增加甜度,防止乳清浓缩液中乳糖的结晶,适应不耐乳糖症的消费者的需要。
酵母细胞基因组rna的提取
酵母细胞基因组RNA的提取一般可以按照以下步骤进行:1.提取细胞总RNA:将酵母细胞收集后用三倍体积的Trizol或RNeasy提取试剂按照说明书操作,可将总RNA提取出来。2.消化DNA:将总RNA加入DNase消化缓冲液,用DNaseI酶消化,将DNA降解掉。3.纯化RNA:将消化完DNA的RNA取出后,加入等体积的Phenol\/Chloroform提...
rna提取方法有哪些
RNA提取方法有以下几种:1. 离心柱法提取RNA 离心柱法是一种常用的RNA提取方法,其原理是利用吸附柱或离心柱上的吸附材料对RNA进行选择性吸附和分离。具体操作流程包括样品处理、裂解、吸附、洗涤和洗脱等步骤。这种方法具有操作简便、快速和效率高的特点。但需注意操作过程中的温度和试剂选择,以避免RNA...
rna的提取方法有哪些
1. 离心柱法 离心柱法是一种快速且简单的RNA提取方法。该方法主要利用特定的离心柱来分离RNA。通过破碎细胞并释放出RNA后,通过离心柱将RNA与其他细胞成分分离。此方法适用于各种类型的生物样本,包括动植物组织和细胞。2. 酚氯仿法 酚氯仿法是一种经典的RNA提取方法。该方法利用酚和氯仿的萃取原理,通...
动物细胞rna抽提不需要除去基因组dna吗
需要去除基因组dna。动物细胞rna提取的实质就是将细胞裂解,释放出rna,并通过不同方式去除蛋白质、dna等杂质,最终获得高纯度rna产物的过程。
动物组织rna提取跟细胞一样吗
两者是不一样的。在细胞级别,RNA提取通常是通过将细胞裂解并使用离心等步骤来获得,细胞膜被破坏后,内部的RNA会被释放出来,然后通过离心等步骤分离和纯化。而对于动物组织级别,除了细胞的裂解,还需要对组织进行预处理。这通常涉及到将组织切割成较小的碎片,以增加细胞膜的破裂,并使细胞内的RNA暴露...
为什么rna提取液只提出基因组dna?
看看是不是用错试剂盒啦?通常RNA提取试剂盒里会带有DNA酶,降解DNA,避免DNA污染RNA。而DNA提取试剂盒通常会带RNA酶降解RNA,即使不带RNA酶,也不会进行无RNA酶处理,会让RNA自然降解。
提取RNA相关
Trizol 法提取 RNA 是要用到氯仿、异丙醇和乙醇的。氯仿遇光易分解,异丙醇虽然没有特殊说明,但我查的据说也是最好避光保存,不过这种试剂都是棕色瓶子,能遮蔽大部分的光线了。关于实验时的防护:RNA 很容易降解,所以实验时一般都要求口罩帽子的,避免组织的污染。不过以我的经验,好像内源性的 RNA...
肠道组织提取RNA的是的称取是否包括内容物,还是要清除内容物后才称量...
需要清除内容物。。内容物里面可能有其他微生物的核酸。。。有个叫华越洋生物的小孩,朝天空中喊了一声“外源RNA清除剂,替代致癌物DEPC,RNA提取必备!”刷了一下广告,头也不回的走开了。。
求TRIZOL提取RNA的详细步骤
1、在提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。2、将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;在EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量...
怎么从精细胞 卵细胞中提取DNA RNA?
只是与卵母细胞相比,它是飘在PBS(缓冲液)液体表面,而卵母细胞是沉到底部,这时,你可以晃动下培养皿。当观测到的的黑点移动并从其它角度可以的就看到它不再是黑点而是透明的,这就是脂肪滴。至于颗粒细胞则很好区分,顾名思义了,提取 RNA 的话,采用微量 RNA 试剂盒就可以,纯度很高 ...
晏刮眠安: 一、 实验目的1、掌握酵母RNA提取的方法.2、了解核酸的组成.3、掌握鉴定核酸组分的方法和操作.二、 实验原理 酵母核酸中RNA含量较多,DNA则少于2%.RNA可溶于碱性溶液,当碱被中和后,可加乙醇使其沉淀,由此即可得到RNA...
临海市15172928503: 酵母RNA的提取及鉴定 - ?
晏刮眠安: 可以用液氮先研磨酵母,然后再用相关的RNA提取试剂盒提取,可以电泳鉴定提取效果,或是测OD值.
临海市15172928503: 酵母RNA提取和鉴定思考题 - ?
晏刮眠安: 1 .加热后中和至微酸性可以除去蛋白质、多糖等杂质,不能多加,否则RNA会酸水解. 2.上清液主要为RNA,沉淀物中主要含蛋白质、多糖等杂质 3.离心管加完试剂后应用天平和加水的离心管保持质量平衡,并在离心机内对角线放置
临海市15172928503: 酵母RNA的提取(稀碱法) 酵母加酸经沸水浴所得混合物加入醋酸离心所得清夜与沉淀各自的成分 - ?
晏刮眠安: 清夜 RNA的钠盐和少量DNA钠盐 沉淀 蛋白质和剩余的菌体 最后得到的RNA是粗品,混有DNA杂质
临海市15172928503: 酵母RNA的提取方法除了稀碱法还有其它什么方法?!!<br/>最? ?
晏刮眠安: 实验三 酵母RNA的提制(浓盐法) 一、目的 学习和掌握从酵母中提制RNA的原理和方法,以加深对核酸性质的认识. 二、原理 酵母含 RNA 2. 67%~10.0%,DNA很少...
临海市15172928503: 酵母RNA的提取及鉴定 - ?
晏刮眠安:[答案] 可以用液氮先研磨酵母,然后再用相关的RNA提取试剂盒提取,可以电泳鉴定提取效果,或是测OD值.
临海市15172928503: 离心脱水机在运行中发现上清液浑浊,固体回收率较低,产生以... - 上学吧?
晏刮眠安: 根据氧气能助燃的性质可知,氧气多的能使木条燃烧时间长,水蒸气易在玻璃片上凝结成雾状,水的含量越高,水雾越明显.实验步骤 实验现象 实验结论实验现象:呼出气体瓶中的木条熄灭,空气瓶中的木条无明显变化取呼出气体一瓶和等体积的空气一瓶,分别滴入适量的澄清石灰水,盖上玻璃片,振荡 空气中的二氧化碳比呼出气体中的少取两块干燥的片,向其中一块呼气,另一块放在空气中(或取一干燥玻璃片,在空气中观察其表面后对其呼气)实验现象: 呼气的玻璃片上出现水雾(或小水滴),另一块无明显现象(或玻璃片表面在空气中无水雾,呼气后有水雾) 空气中水蒸气的含量比呼出气体中的少
临海市15172928503: 如何鉴定核糖 - ?
晏刮眠安: 核糖具有醛糖的通性 有醛基 和葡萄糖一样可以用斐林试剂检验
临海市15172928503: 某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验.通过查阅资料,制订了以下的实验方案:【实验课题】酵母RNA的... - ?
晏刮眠安:[答案] (1)酵母菌中含有RNA的结构有细胞核、核糖体(蛋白质和RNA构成)、线粒体、细胞质基质(RNA主要存在于细胞质中).酵母菌在有氧和无氧条件下都能生存,属于兼性厌氧型,所以是用来研究细胞呼吸不同方式的好材料.(...