平板划线法,偏大还是偏小

生物中接种方法→平板划线法要注意什么~

如何用平板划线法进行微生物的接种和培养

平板划线法，平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的


方式
划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线,第一区(A区)面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区(B、C区)是逐级稀释的过渡区，第四区(D区)，则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落,平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A。

步骤
　　用接种环在平板培养基表面通过分区划线而达到纯化分离微生物的一种方法。是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。用于目的微生物的分离。

特点
　　快捷、方便、便于得到目的性状的单克隆。

示例
　　对大肠杆菌的分离

　　实验器材

　　大肠杆菌、枯草芽孢杆菌混合菌悬液

　　牛肉膏蛋白胨培养基

　　无菌培养皿，水浴锅，接种环等。

　　实验步骤

　　1．融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。

　　2．倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。

　　倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。

　　3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。

　　4．划线操作

　　(1)挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。

　　(2)划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁)，右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内)，以防止杂菌的污染。

　　(3)划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区(菌源区)将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。

　　5．恒温培养：将划线平板倒置，于37℃（或28℃）培养，24hr后观察。

偏小。
常用稀释涂布平板法，来统计活菌数目，一般情况下，实验结果与真实结果相比偏小。平板划线法的优点：便于观察菌落特征，对混合菌进行分离。缺点：不能准确计数。稀释涂布平板法的优点：便于计数，便于观察菌落特征。
常用平板划线法，操作简单，缺点就是不太准确。

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孙吴县19657694920： 平板划线法,只有在最后的线才能找到想要的菌落吗? - ？
沈厚八珍： 平板划线法,就是不断稀释,第一次划线出生长出来的菌肯定是一条线,无法挑单菌落,但到后面稀释度很高的地方,就是一个一个菌落的生长了,这样就可以得到单菌落了. 菌落虽然生长在同一块培养基上,但是他们之间界限还是比较分明的,只要菌落之间没有长到重合在一起,就没有问题.一般是划线后生长12到16小时,然后把平板取出,放到4度冰箱里面保存,这样可以保存一两个月,而且菌落生长的很慢,不会混在一起. 英特尔最新推出了第六代酷睿产品,采用全新一代的架构,性能提示、功能降低、续航更加长久、无论办公学习、畅玩游戏或者观看超高清音箱播放,均得心应手,您也可以试试.

孙吴县19657694920： 什么情况下用“平板划线法”,什么情况下用“稀释涂布平板法”,什么情况下两者都可用? - ？
沈厚八珍： zhaoshuoxp说的对分单克隆以及接菌量很大时一般用划线,简单方便,能够得到单个菌落. 接菌量小而且要计算菌体数目时要稀释涂布,能够让细菌大量繁殖.

孙吴县19657694920： 生物中接种方法→平板划线法要注意什么 - ？
沈厚八珍： (1)要注意全程无菌操作; (2)滑动时用力要均匀,切勿将接种环嵌入培养基内; (3)平板应较硬、较厚、表面干燥; (4)需要分区的时候,划完一个区后必须烧去接种环上的残菌,待冷却后再划另一个区; (5)划线的线条宜平行、密集...

孙吴县19657694920： 要使平板菌落计数准确 需要掌握哪几个关键 - ？
沈厚八珍： 一、平板划线分离法 由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养...

孙吴县19657694920： 平板划线分离法划破培养基的现象叫什么? - ？
沈厚八珍： 平板划线是为了使菌落分离,有孤立的菌落出现,所以划线时,轻重要适宜,不能划破平板的.

孙吴县19657694920： 平板划线法的优缺点? - ？
沈厚八珍： 答案 平板划线法的优点:便于观察菌落特征,对混合菌进行分离.缺点:不能准确计数. 平板划线法的原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的,而稀释涂布平板法一般用于某些成品检定(如杀虫菌剂等)、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验.希望能帮到你,祝你生活愉快!参考资料来源:百度百科-平板划线法

孙吴县19657694920： 高中生物 为什么平板划线法适用于好氧菌的培养? - ？
沈厚八珍： 学生刚好问过类似的问题.因为平板划线法有利于微生物在有氧环境中生长繁殖,而稀释涂布平板法,不利于微生物接触空气,所以更适用于厌氧菌和兼性厌氧菌. 下面图表给你归纳总结一下这个知识点:

孙吴县19657694920： 稀释涂布平板法和平板划线法分别在什么情况下用 - ？
沈厚八珍： 稀释涂布平板法是用来估算总体细菌个数的,平板画线法是用来培养小型菌落的,两个有着不同的作用

孙吴县19657694920： 稀释涂布法和平板划线法的分离原理分别是什么? - ？
沈厚八珍： 在涂布或划线过程中,微生物的浓度会越来越低.例如划线法:在划线过程中随着划线的结束,线上的微生物会变少,最终只剩很少,进而达到分离的目的!

孙吴县19657694920： 用平板划线法进行纯种分离的原理是什么?有何优点? - ？
沈厚八珍： 用平板划线法进行纯种分离的原理是:把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞,用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞,并让其成长为单菌落. 优点是操作简单. 扩展资料: 注意点: 1、平板应较硬、较厚、表面干燥;划完A区后必须烧去接种环上的残菌,待冷却后再划B区. 2、线条宜平行、密集、整齐,以充分利用平板面积. 方式: 将一个平板分成不同面积的4区,A区面积最小,作为待分离菌的菌源区,B和C区是逐级稀释的过渡区,D区面积最大,以便有机会出现较多的单菌落供选用. 参考资料:百度百科-平板划线法