细胞工程中,制备单克隆抗体时,需要经过三次筛选检测,这三次的目的是什么?

作者&投稿:雷廖 (若有异议请与网页底部的电邮联系)
通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程: ①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能~

2一定第一个,然后是1,注意这里的多种杂交瘤细胞能产生不同的抗体,所以3最后.选c

第一次筛选:

(1)筛选对象:脾细胞、瘤细胞、脾-脾细胞、瘤-瘤细胞、脾-瘤细胞(即羊红细胞免疫过的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后得到的细胞混合液)。另有少量多细胞聚体,因寿命短而迅速死亡,故无需特殊筛选。

(2)筛选方法:用HAT选择培养基筛选出正常生长的细胞。(注重:HAT培养基含有次黄嘌呤H、氨基喋呤A和胸腺嘧啶核苷T。其中氨基喋呤能阻断核酸合成的主通路,而次黄嘌呤在磷酸核糖转移酶HGPRT的催化下能合成RNA或胸腺嘧啶核苷在胸腺嘧啶核苷激酶TK的催化下合成DNA均属于核酸合成的旁通路。)

(3)筛选结果:脾-瘤细胞正常生长,其它细胞都会死亡。(析因:脾细胞和脾-脾细胞的核酸合成主通路被氨基喋呤阻断,虽有核酸合成的旁通路,但不能长期增殖;瘤细胞和瘤-瘤细胞缺乏核酸合成旁通路的酶,核酸合成主通路又被氨基喋呤阻断,因核酸合成障碍而死亡;脾-瘤细胞具有脾细胞的核酸合成旁通路酶,虽核酸合成主通路被氨基喋呤阻断,但可利用培养基中的次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷合成核酸而得以生存。)

第二次筛选:

(1)筛选对象:多克隆杂交瘤细胞群体。(即产生多种抗体的脾-瘤细胞混合群体。)

(2)筛选方法:抗体检测( 如 免疫荧光技术、放射免疫技术等,实际上是利用稀释法,在聚乙烯微板孔内逐个杂交瘤细胞分开培养,然后检查每孔中产生特定抗体的能力)。

(3)筛选结果:产生专一性抗体的杂交瘤细胞。

记得只经过两次筛选
第一次是筛选杂交瘤细胞
第二次是筛选能够产生单一抗体的杂交瘤细胞
当筛选完毕就可以进行体内或体外培养了


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公安县18221927819: 细胞工程中,制备单克隆抗体时,需要经过三次筛选检测,这三次的目的是什么? -
壤炕喏高:[答案] 记得只经过两次筛选 第一次是筛选杂交瘤细胞 第二次是筛选能够产生单一抗体的杂交瘤细胞 当筛选完毕就可以进行体内或体外培养了

公安县18221927819: 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及到以下三个筛选过程,这三个过程的先后顺序是 ( )①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生抗体的效应B... -
壤炕喏高:[选项] A. ②③① B. ③①② C. ②①③ D. ①③②

公安县18221927819: 运用细胞工程技术获得单克隆抗体时,必要的操作是()A.对小鼠注射特定抗原B.融合并筛选获得杂交瘤 -
壤炕喏高: A、在制备单克隆抗体的过程中,需要先对小鼠进行特定抗原免疫,使机体产生相应的浆细胞,A正确;B、在诱导细胞融合时,除了异种细胞融合外,还有同种细胞融合,因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞,B正确;C、效应B细胞不能分裂,C错误;D、在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时,可以将其注入小鼠腹腔中,以备获得大量的单克隆抗体,D错误. 故选:AB.

公安县18221927819: 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程: ①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞 ②选出能 -
壤炕喏高: 2一定第一个,然后是1,注意这里的多种杂交瘤细胞能产生不同的抗体,所以3最后.选c

公安县18221927819: 制备单克隆抗体过程中要用到的技术 -
壤炕喏高: 细胞培养 细胞融合 细胞筛选 细胞检测

公安县18221927819: 制备单克隆抗体时,需要将抗原注射到小鼠体内,注射后小鼠血液中可能获得新的效应B细胞吗? -
壤炕喏高:[答案] 注射抗体后就会产生相应的效应B细胞 您的采纳使我继续努力的动力!

公安县18221927819: 利用细胞工程技术制备针对肝癌细胞膜蛋白的单克隆抗体.需要做的工作有()A.对肝癌细胞膜蛋白进行 -
壤炕喏高: A、根据题意可知,肝癌膜蛋白属于抗原,要对抗原进行纯化,保证抗体的特异性,A正确;B、正常的体细胞中均含有原癌基因和抑癌基因,不需要提取抑癌基因,B错误;C、膜蛋白没有复制能力,因此不能进行组织培养或PCR扩增,C错误;D、单克隆抗体制备需要的是已免疫的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞杂交,D错误. 故选:A.

公安县18221927819: 通过细胞工程生产单克隆抗体时,要涉及以下三个筛选过程:①在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞②选出能产生 -
壤炕喏高: C

公安县18221927819: 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括()①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 &nb... -
壤炕喏高: A、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,A正确; B、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,B错误; C、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,C错误; D、单克隆抗体主要涉及的细胞工程技术包括动物细胞培养、动物细胞融合技术,无胚胎移植,细胞核移植,D错误. 故选:A.

公安县18221927819: 如图表示单克隆抗体的两种制备方法,①→⑥表示不同的过程,请分析回答下列问题:.(1)在方法1中,细胞A应具备的特点是___.在体外培养细胞Y时,则... -
壤炕喏高:[答案] (1)从图中分析可知,细胞A为骨骼瘤细胞,能进行无限增殖,细胞B为浆细胞,能产生抗体,过程①为利用细胞工程制备单克隆抗体的过程,在细胞培养时需要满足以下条件,无菌、无毒、添加了血浆(或“血清”)的培养基,适宜的温度与pH、含...

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