融合细胞需要用什么培养基进行筛选,并进行科隆化培养

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怎样从融合细胞中挑选想要优秀细胞~

单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后,要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞。
筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞.该制备过程涉及到动物细胞融合技术、动物细胞培养技术.

(1)B淋巴细胞能产生抗体,但在体外培养条件下不能无限增殖;骨髓瘤细胞则相反.所以要制备单克隆抗体,可以把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合,使融合细胞(杂交瘤细胞)既能大量增殖,又能产生足够数量的特定抗体.(2)诱导细胞融合时,除了产生杂交瘤细胞,还会产生B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等,因此需要用特定的选择性培养基来筛选出杂交瘤细胞,并进行克隆化培养和抗体检测,以得到足够数量的符合要求的单核杂交瘤细胞.(3)将杂交瘤细胞在体外条件下作大规模培养,可从细胞培养液中提取出大量的单克隆抗体.(4)某病人连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病,开始病毒量明显减少,一段时间后,这种病毒量又开始上升,上升原因可能是病毒发生变异,也可能是人体产生抗鼠源抗体的抗体,中和了鼠源抗体,使鼠源抗体不能发挥抗病毒的作用.(5)改造鼠源性抗体分子的结构需要用蛋白质工程技术,改造后的鼠源性抗体分子可以降低鼠源性抗体的人体反应.故答案:(1)B淋巴 骨髓瘤(2)特定的选择性 抗体检测 单 (3)细胞培养液(4)抗鼠源抗体的抗体,中和了鼠源抗体(5)蛋白质工程

融合细胞需要用什么培养基进行筛选
单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后,要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞。
筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞.该制备过程涉及到动物细胞融合技术、动物细胞培养技术.
细胞融合是一个随机的物理过程.在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬中,经融合后细胞将以多种形式出现.如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等.正常的脾细胞在培养基中存活仅5~7天,无需特别筛选,细胞的多聚体形式也容易死去.而未融合的瘤细胞则需进行特别的筛选去除.细胞DNA合成一般有两条途径.


如何用实验证明细胞松弛素B在细胞中对细胞中对微丝的作用具有可逆性_百 ...
三张培养好细胞的盖片,1号加药,2号加药,3号不加药;培养一段时间,二号用培养液将药洗掉;染色,观察;如果镜下1=2说明不可逆,2=3说明可逆。真核细胞胞质中纵横交错的纤维网称为细胞骨架,在维持细胞形状和运动方面具有重要作用。根据组成成分和组装结构的不同,分为微管、微丝和中间纤维。微丝...

从某种真核细胞中提取出大量核糖体,放入含下列几种有机物(其中的氮原子...
出这种题的人自以为聪明。其实就是想当然。1. 如果“培养液里有完成其功能的一切物质和条件”,核糖体就能合成多肽或蛋白质,我们干吗还要在原核细胞里转基因生产多肽?2. 核糖体在细胞内可以合成多肽和蛋白质,原料的α氨基酸,携带α氨基酸的是t-RNA,以mRNA为模板。而且核糖体的大小亚基本来是分离的...

...动物细胞可培养性的主要差异是什么?常用的培养动物细胞有哪些...
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从某种真核细胞中提取大量的核糖体,放入含下列几种物质的培养液里,假...
(1)根据题意和图示分析可知:图中只有①③⑤中都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上,属于构成蛋白质的氨基酸,所以①③⑤能在核糖体通过脱水缩合方式合成多肽.(2)由于只有③中含有2个羧基,所以这3种氨基酸合成的直链多肽含有1个氨基和2个羧基,称为三肽.合成的直链多肽可能有C23=6...

有哪位大侠使用过percoll gradient
表层为死细胞残片和血小板,底层为粒细胞和红细胞,中间有两层,上层富含单个核细胞(75%),下层富含淋巴细胞(98%),该法是纯化单核细胞和淋巴细胞的一各较好的方法,但操作流程较长,手续较多。你分离什么细胞?分离的细胞不同,其操作步骤略有差异。如最麻烦的,分离大鼠睾丸间质细胞,需要用培养基将...

如何对细胞核的结构进行有效教学
一、知识结构 二、教学目标 1.知识方面:(1)真核细胞的细胞核的结构和功能(c:理解)。高考试题库197http:\/\/www.gkstk.com (2)原核细胞的基本结构(c:理解)(3)原核生物的主要类群(a:知道)。2.态度观念方面:培养学生从社会中发现问题,并利用所学知识解决问题的科学态度和科学精神。3.能力方面...

细胞因子活化杀伤(CIK)细胞输注是什么意思?
CIK(cytokine-induced killer,中文名:多种细胞因子诱导的杀伤细胞),是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子(如抗CD3单克隆抗体、IL-2和IFN-γ等)共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。CIK的作用是杀死细胞肿瘤和病毒感染细胞,但CIK(这里用的不准确不经过细胞因子活化它也不叫CIK,但不会命名...

细胞核移植以什么技术为基础
A、动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础,A正确;B、胚胎移植技术属于胚胎工程,B错误;C、动物细胞融合技术属于动物细胞工程技术,但不是动物细胞工程技术的基础,C错误;D、核移植技术属于动物细胞工程技术,但不是动物细胞工程技术的基础,D错误.故选:A.

动物细胞培养、动物细胞融合、体细胞杂交、制备单克隆抗体和核移植技...
动物细胞融合 体细胞杂交 单克隆抗体的制备 这3项联系比较紧密 动物细胞融合技术是他们的基础 核移植比较独立 主要移植的是细胞核 而不是2个细胞的完全融合 但所有的这些 基础都是动物细胞培养技术 只有它能让动物细胞在体外环境下成活 有了它 融合啊 杂交啊 移植啊 什么的 才有了可能 ...

供核细胞如何与受体细胞融合? 供核细胞是只有细胞核与受体结合,还是整 ...
核移植肯定都是显微操作的啦 供核细胞的问题首先是受体细胞的去核问题(有盲吸法,也有荧光法) 其次是怎么完整的将核取出 最后就是将所需要的核物质注入受体中并融合(方法就是楼上几位介绍的了,实际用电刺激方法比较多,电压电流比较讲究有相关的电融合机器)其中的关键步骤蛮多的,受体和...

明光市15181856994: 融合细胞需要用什么培养基进行筛选,并进行科隆化培养和什么 -
邬食丹香: 融合细胞需要用什么培养基进行筛选 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和b淋巴细胞融合后,要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞. 筛选得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的...

明光市15181856994: 1.在细胞融合时,怎样进行促融合和筛选融合子? -
邬食丹香: 细胞促融剂有三类,物理因素:电激,离心等;化学因素:聚乙二醇等;生物因素:病毒等.这三类都可以促进细胞融合的进行.细胞融合后用"选择性的培养基“来培养所有细胞,那么就可以得到你想到的融合细胞了."选择性培养基"的配制因不同的细胞而不同.

明光市15181856994: 脾细胞和骨髓瘤细胞融合后,如何筛选杂交瘤细胞?其原理是什么? -
邬食丹香: 放在选择性培养基上培养..杂交到的细胞有 3种 脾细胞和脾细胞, 脾细胞和瘤细胞, 瘤细胞和瘤细胞.3种 ..放在选择性培养基上连续培养. 比如说有什么脾细胞可以分泌出抗体那种抗原的物质...而其他细胞不能够抵抗..脾细胞和脾细胞 一般不会培养到50代..就会死了..放在选择性培养基上的瘤细胞和瘤细胞 没有相应的抗体 所以自动被消灭掉..脾细胞和瘤细胞..因为具有无限繁殖和有抗体产生 所以能够存活.存活下来的 就是合格的杂交瘤细胞.. 一般筛选2次...

明光市15181856994: 怎样对融合后获得的杂交细胞进行筛选
邬食丹香:筛选过程一般分为两步进行:一是融合细胞的抗体筛选,二是在此基础上进行的特异性抗体筛选.将融合的细胞进行充分稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在0至数个细胞之间(30%的孔为0才能保证每个选培养后取上清以ELISA法选出抗体高分泌性的细胞;这一过程常被习惯地称作克隆化.将这些阳性细胞再进行克隆化,应用特异性抗原包被的ELISA找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后进行冻存、体外培养或动物腹腔接种;原理是;B淋巴细胞本身是一种终末分化细胞,通常不再进行细胞分裂,存活一段时间后便会死亡——短命细胞

明光市15181856994: B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,用什么培养基 -
邬食丹香: 五种细胞,分别是单独的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,B淋巴细胞和骨髓瘤细胞自身融合的细胞以及实验所要得到的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交体.希望对你能有所帮助.

明光市15181856994: 简述人工制备单克隆抗体的方法? -
邬食丹香: 单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体.通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤...

明光市15181856994: 单克隆抗体中两次筛选分别是什么方法 -
邬食丹香: 第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,用连续注射抗原,下面具体介绍一下: 1、在实际免疫过程中,由于采用连续注射抗原的方法,且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞,因此,从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴...

明光市15181856994: 单克隆抗体技术在生物工程中占有重要地位.请回答相关问题:(1) - __技术是单克隆抗体技术的基础.إ(2)在技术操作中,需要将融合细胞用 - __培养基进... -
邬食丹香:[答案] (1)动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础.(2)需要将融合细胞用特定的选择培养基进行筛选,去掉B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞,筛选出B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞,并进行克...

明光市15181856994: 细胞融合问题请问两种细胞融合后,在筛选融合细胞是怎 -
邬食丹香: 选择性筛选的参照标准是自己定的,可以由融合前细胞的特性出发,找出其中之一的代谢特点.比如在筛选杂交瘤细胞时,B细胞是可以进行细胞外途径的DNA合成的,但是寿命很短.而骨髓瘤细胞是没有细胞外源合成DNA这一途径的.所以我们提供的培养基可以是阻断细胞内源合成DNA途径的选择培养基,这样,单一的瘤细胞会合成不了DNA而死亡,单一的B细胞在一段时间后,也死亡.剩下的只有需要的杂交瘤细胞了.这是经典的HAT选择培养基的原理.缺失基因的细胞,是不能正常代谢的,一般是会死亡的,但在某些特殊实验中,人工培养一些缺陷型细胞,以便于标记特征,便于筛选也是可以的.找出的代谢特点还可以包括,温度差异,PH差异等,很灵活,也很困难.

明光市15181856994: 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞.在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是①B淋巴细胞 ②... -
邬食丹香:[选项] A. ①②③④ B. ①③⑤ C. ②④ D. ①③

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