微生物染色原理

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微生物染色的微生物染色的基本原理~

微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。
酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力,易于吸附。要使酸性物质染上酸性材料,必须把它们的物理形式加以改变(如改变pH值),才利于吸附作用的发生。
相反,碱性物质(如细胞质)通常仅能染上酸性染料,若把它们变为适宜的物理形式,也同样能与碱性染料发生吸附作用。
细菌的等电点较低,pH值大约在2—5之间,故在中性、碱性或弱酸性溶液中,菌体蛋白质电离后带阴电荷;而碱性染料电离时染料离子带阳电。因此,带阴电的细菌常和带阳电的碱性染料进行结合。所以,在细菌学上常用碱性染料进行染色。

扩展资料:
有菌体细胞的构造和其外膜的通透性,如细胞膜的通透性、膜孔的大小和细胞结构完整与否,在染色上都起一定作用。此外,培养基的组成、菌令、染色液中的电介质含量和pH、温度、药物的作用等,也都能影响细菌的染色。
标本固定后,滴加染色液。染色的时间各不相同,视标本与染料的性质而定,有时染色时还要加热。染料作用标本的时间平均约1—3分钟,而所有的染色时间内,整个涂片(或有标本的部分)应该浸在染料之中。
若作复合染色,在媒染处理时,媒染剂与染料形成不溶性化合物,可增加染料和细菌的亲和力。一般固定后媒染,但也可以结合固定或染色同时进行。
阳性菌菌体等电点较阴性菌为低,在相同PH条件下进行染色,阳性菌吸附碱性染料很多,因此不易脱去,阴性菌则相反。所以染色时的条件要严格控制。
例如,在强碱的条件下进行染色,两类菌吸附碱性染料都多,都可呈正反应;PH很低时,则可都呈负反应。此外,两类菌的细胞壁等对结晶紫—碘复合物的通透性也不一致,阳性菌透性小,故不易被脱色,阴性菌透性大,易脱色。所以脱色时间,脱色方法也应严格控制。
参考资料来源:百度百科——微生物染色

借助物理因素和化学因素的作用而进行的。
物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。
化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。
酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;
同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化学亲和力,易于吸附。但是,要使酸性物质染上酸性材料,必须把它们的物理形式加以改变(如改变pH值),才利于吸附作用的发生。相反,碱性物质(如细胞质)通常仅能染上酸性染料,若把它们变为适宜的物理形式,也同样能与碱性染料发生吸附作用。

阳性菌厚,不容易脱色,阴性菌容易被乙醇脱色。所以一个可以被显紫色一个土黄色。但操作不当,染色过度。容易出现假阳性。
革兰氏染色的原理
1、G+细胞壁主要由肽聚糖形成的致密网状结构组成,壁厚,类脂含量低,交联度高,用乙醇处理后,发生脱水作用,肽聚糖层孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留再细胞内,故细菌仍保留初染时的紫色。
2、G-肽聚糖层较薄,交联度低,含较多类脂质,故用乙醇处理后,类脂质被溶解,细胞壁孔径变大,通透性增加,使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出,细胞被脱色,经沙黄复染后呈红色。
二、革兰氏染色的步骤
1、制片
涂片——干燥——固定
2、初染
滴加结晶紫染色1~2分钟,水洗;
3、媒染
用碘液冲去残水,并用碘液覆盖1分钟;
4、脱色
滴加95%酒精,脱色30秒,立即水洗;
5、复染
用番红液复染1~2分钟,水洗;
6、镜检
干燥后,用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后,要及时用擦镜纸擦干净镜头,避免香柏油残留


中招实验考试生物洋葱为什么染色
是将液泡染成深色以便观察。细胞核是遗传信息库,细胞核中含有染色体,染色体是容易被碱性染料如碘液染成深色的物质,因此观察经过染色的洋葱鳞片叶表皮细胞时,各部分结构中染色最深的是细胞核。染色的目的也是为了看清细胞核。

he染色名词解释
He染色是一种在生物学中常见的染色体染色技术。He染色的名称来自于两位发现者之一的Ernst Heitz,于1926年首次引入了这种染色技术。该技术能够给染色体着色并显示其形态和结构的细节。通过He染色,科学家们能够观察和研究染色体在不同细胞周期阶段的变化,以及染色体的正常或异常状态。He染色的基本原理是利用...

革兰氏染色的意义是什么?
革兰氏染色法的重要意义是:革兰氏染色法不仅用来观察细菌的形态,而且它还是细菌鉴定的重要方法。微生物的细胞小且透明,在普通光学显微镜下不易识别,必须对它们进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构。革兰氏染色的原理:革兰氏阳性菌的等电点比革兰氏阴性...

台盼蓝染色分辨死活细胞的原理是什么
原理:活细胞不会被台盼蓝染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色...

台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理是什么?
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高中生物涉及的所有实验中的原理方法
原理:淀粉+碘液→蓝色 注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘。应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉 5 DNA的染色与鉴定 染色原理:DNA+甲基绿→绿色 应用:可以显示DNA在细胞中的分布。鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色 应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。6 吡罗红使RNA呈现红色 原理:RNA+吡罗...

酵母菌染色的原理是什么
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neun染色原理
染色原理是运用一些物理和化学的知识。染发剂作用于头发的时候洗干净之后会有一些小分子进入头发的内部,使其产生颜色。细菌细胞通常带负电荷,简单染色时采用已知的、带正电荷的碱性染料与菌体细胞黏附使菌体着色,经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明对比经氧化聚合成为大分子结构并发色的氯化染料定着于头发...

观察细菌形态时为什么要用染色法
观察细菌形态时为何要用染色法?因为细菌细胞微小,透明,不易观察,需染上颜色.利用单一染料对细菌进行染色,使经染色后的菌体与背景形成明显的色差,从而能更清楚地观察到其形态和结构.常用的染色法有:1.简单染色法:简单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法, 一般用于观察个体形态与细菌排列。

革兰染色原理
G+细菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇脱色剂乙醇处理时,因失水而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇的处理不会溶出缝隙,因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色。革兰染色是微生物学中最重要的染色方法。其机制直到在该方法发明100年后才得到了确切的证明。1...

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