发一个生化的知识点,DNA变性和复性核酸杂交
变性,这是DNA最重要的一个性质。 ①DNA双链之间以氢键连接,氢键是一种次级键,能量较低,易受破坏,在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,变成单链,即为DNA变性。DNA变性只涉及二级结构改变,不伴随一级共价键的断裂。
②监测DNA是否变性的一个最常用的指标是DNA在紫外区260nm波长处的吸收光值变化。因为DNA变性时,DNA双链发生解离,共轭双键更充分暴露,故DNA变性,DNA在260nm处的吸收光度值增加,并与解链程度有一定的比例关系,这种关系叫做DNA的增色效应。
③DNA的变性从开始到解链完全,是在一个相当窄的温度内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值增加达到最大增加值的50%时的温度叫做DNA的解链温度(Tm)。一种DNA分子的 Tm值的大小与其所含碱基中的 G+C的比例相关也与DNA分子大小及变性条件有关,G+C的比例越高,DNA分子越长,溶液离子强度越高,Tm值越大。
④加热、低盐及强酸、强碱均可使DNA变性。
复性 变性DNA在适当条件下,两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象,这种现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程也叫退火,一般认为,比Tm值低 25℃ 的温度是DNA复性的最佳条件。
DNA复性的实际应用——杂交
通过变性DNA的复性性质,我们可知道,DNA单链之间、RNA单链之间、一条DNA和一条RNA链之间只要存在序列互补配对区域,不管是整条链互补,还是部分序列互补,即可重新形成整条双链或部分双链,这即为核酸分子杂交,这在分子生物学研究中有极大的应用,比如:可用于在基因组中对特异基因的定位及检测,PCR技术扩增目的基因等,很多分子生物学实验技术应用的都是核酸分子杂交的原理,如Southern Blot, Northern Blot,包括PCR技术等。
1.变性,这是DNA最重要的一个性质.
①DNA双链之间以氢键连接,氢键是一种次级键,能量较低,易受破坏,在某些理化因素作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,使DNA双螺旋结构松散,变成单链,即为DNA变性.DNA变性只涉及二级结构改变,不伴随一级共价键的断裂.②监测DNA是否变性的一个最常用的指标是DNA在紫外区260nm波长处的吸收光值变化.因为DNA变性时,DNA双链发生解离,共轭双键更充分暴露,故DNA变性,DNA在260nm处的吸收光度值增加,并与解链程度有一定的比例关系,这种关系叫做DNA的增色效应.③DNA的变性从开始到解链完全,是在一个相当窄的温度内完成的,在这一范围内,紫外光吸收值增加达到最大增加值的50%时的温度叫做DNA的解链温度(Tm).一种DNA分子的 Tm值的大小与其所含碱基中的 G+C的比例相关也与DNA分子大小及变性条件有关,G+C的比例越高,DNA分子越长,溶液离子强度越高,Tm值越大.④加热、低盐及强酸、强碱均可使DNA变性.
2.复性
变性DNA在适当条件下,两条互补链可重新恢复天然的双螺旋构象,这种现象称为复性.热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程也叫退火,一般认为,比Tm值低 25℃ 的温度是DNA复性的最佳条件.
3.DNA复性的实际应用——杂交:通过变性DNA的复性性质,我们可知道,DNA单链之间、RNA单链之间、一条DNA和一条RNA链之间只要存在序列互补配对区域,不管是整条链互补,还是部分序列互补,即可重新形成整条双链或部分双链,这即为核酸分子杂交,这在分子生物学研究中有极大的应用,比如:可用于在基因组中对特异基因的定位及检测,PCR技术扩增目的基因等,很多分子生物学实验技术应用的都是核酸分子杂交的原理,如Southern Blot,Northern Blot,包括PCR技术等.
★★★考点10:RNA主要分为信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)和核糖(核蛋白)体RNA(rRNA)三类。
mRNA mRNA为线状单链结构。大多数真核mRNA在5′端含倒装的7甲基三磷酸鸟苷(m7Gppp),称为帽子结构。mRNA的3′末端有一段长短不一的多聚腺苷酸序列。3′末端的多聚腺苷酸结构可增加转录活性,增加mRNA稳定性。5′加“帽”、3′加“尾”属转录后加工过程tRNAtRNA均呈三叶草形状,这就是tRNA的二级结构。tRNA的三级结构为倒L型。tRNA二级结构有三个环,其中反密码环上有反密码子,反密码子辨认mRNA上相应的三联体密码,而且把正确的氨基酸连接到tRNA 3′末端的CCAOH结构上。由此可见tRNA在蛋白质生物合成中起运输氢基酸的作用续表rRNArRNA是细胞内含量最多的RNA。rRNA与核糖体蛋白共同构成核糖体。核糖体由大、小两个亚基组成。真核生物的核糖体小亚基由18SrRNA和30多种核糖体蛋白构成,大亚基则由5S、5.8S及28S三种rRNA与50种核糖体蛋白组成。当大小亚基聚合时,可作为蛋白质合成的场所 考点11:辅酶为结构复杂的小分子有机物,通过非共价键与酶蛋白疏松结合,可用透析、超滤等方法而分离;辅基则常以共价键与酶蛋白牢固结合,不易与酶蛋白分离。除了上述辅酶外,酶辅助因子主要是各种金属离子,如Zn2+、Fe2+、Cu2+、Mn2+、Ca2+、Mg2+、Na+和K+等。
酶蛋白辅助因子物质成分蛋白质非蛋白质结合特点一种酶蛋白只能结合一种辅助因子形成全酶一种辅助因子可与不同的酶蛋白结合形成不同的全酶参与反应催化一定的化学反应催化不同的化学反应特性决定反应的特异性决定反应的种类和性质 考点12:酶促反应的特点高效性、专一性、不稳定性、可调控性。
考点:酶的活性中心酶分子中能与底物结合并发生催化作用的局部空间结构称为酶的活性中心。活性中心中有许多与催化作用直接相关的基团,称为必需基团。有些必需基团涉及酶与底物的结合,又称为结合基团,有些具有催化功能,称为催化基团。在酶活性中心外,也存在一些与活性相关的必需基团。
怎么自学生化啊?
比如肝昏迷的原因是因为氨与酮戊二酸生成谷氨酸、谷氨酰胺,导致三羧酸循环中的酮戊二酸含量减少,发生障碍。基本上都是几个不同章节的知识点结合在一起的。 所以第一步还是要通读,不用深刻的理解每个步骤,不用记住那些酶,但求留下一个大概的印象。 然后第二遍的时候,就可以开始仔细研究各个...
高中生物必修一第一章知识点
高中生物必修一必备知识点 命活动的主要承担者——蛋白质 一、氨基酸及其种类 氨基酸是组成蛋白质的基本单位(或单体)。结构要点:每种氨基酸都至少含有一个氨基(-NH2)和一个羧基(-COOH),并且都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上。氨基酸的.种类由R基(侧链基团)决定。二、蛋白...
高一生物知识点总结
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高考生物选修一知识点总结
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生化只看刘不言够吗
生化只看刘不言够的。根据往年的生化试卷可以得知,生化这门科目的重复率高,而刘不言的讲解全面,涉及到的知识点有着重讲解,由此生化只看刘不言是足够的。
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生物选修一知识点总结
2022-07-20 · TA获得超过1106个赞 知道答主 回答量:0 采纳率:100% 帮助的人:0 我也去答题访问个人页 关注 展开全部 学习生物要讲究方法和技巧,更要学会对知识点进行归纳整理。接下来我为你整理了高中生物选修一知识点总结,一起来看看吧。 高中生物选修一知识点:DNA的粗提取与鉴定 提取DNA的溶解...
吴1,吴2和吴3分别是什么
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高中生物必修一知识点总结
高中生物必修一知识点总结 4个回答 #热议# 公司那些设施可以提高员工幸福感? 济外russian 2012-03-05 · TA获得超过6141个赞 知道小有建树答主 回答量:850 采纳率:0% 帮助的人:372万 我也去答题访问个人页 关注 展开全部 生物必修1复习提纲(必修)第二章 细胞的化学组成第一节 细胞中的原子...
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滴道区13353257128: 下列有关核酸的变性与复性的正确叙述是( ). - ?
杭削安乐:[选项] A. 不同长度的DNA分子变性后,在合适温度下复性所用的时间基本相同 B. 热变性后的DN A经缓慢冷却后可复性 C. 热变性的DNA迅速降温过程也称作退火 D. 复性的最佳温度为700C-850C
滴道区13353257128: 基因克隆中三个基本要点是: - ?
杭削安乐: 基因克隆就是PCR技术,三个基本要点是:1、变性(将DNA加热到90-95度)2、复性(将DNA降温至55-60度)3、延伸(将DNA升温到70-75度)
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杭削安乐: 合酶的生物学意义就是,核酸可以仅依靠自身,而不依靠蛋白质即可进行催化活动,打破了生化催化一定需要蛋白质的限制.bs一下楼上拷贝粘贴.
滴道区13353257128: 热变性的DNA分子,在适当条件下可以复性,条件之一是() - ?
杭削安乐:[选项] A. 浓缩 B. 加入无机盐 C. 骤然冷却 D. 缓慢冷却
滴道区13353257128: 两个生化问题,急,线上等.1,比较脂肪酸合成和分解的异同 2,简述三大分子杂交技术的应用 - ?
杭削安乐:[答案] 1.脂肪酸的生物合成,植物中是在叶绿体及前质体中进行,合成4~16碳及16碳以上的饱和脂肪酸.动物是在胞液中进行,只... (hybrid),杂交体中的分子不是来自一个二聚体分子.同一个二聚体中的两个分子在变性解离后重组合称为复性.利用两条不...
滴道区13353257128: 保证DNA复制准确无误的关键步骤是什么? - ?
杭削安乐: DNA生物合成具有保真性.要使DNA准确复制必须要有严格的碱基配对,DNA聚合酶在复制中的正确选择,对复制过程中出现的错误及时校正 (我们生化中讲的) 如果谈及DNA复制的过程分为DNA复制的引发,DNA链的延伸,DNA复制的终...
滴道区13353257128: 碱法提取质粒中,基因组dna和蛋白质怎样被去除,其原理何在 - ?
杭削安乐: 现质粒提取论手提试剂盒其根本原理碱裂解:菌体NaOH SDS溶液裂解蛋白质与DNA发变性加入液质粒DNA能够迅速复性呈溶解状态离留清;蛋白质与染色体DNA变性 呈絮状离沉淀 进步质粒DNA获取手提经苯酚、氯仿抽提RNA酶消化乙醇沉淀 等简单步骤除残余蛋白质RNA及盐试剂盒则基础使用DNA吸附柱吸附质粒DNA洗脱质粒 评价:一通琼脂糖电泳检查所获质粒(准确需酶切)细菌基组DNARNA污染及质粒断裂少同根据marke量品进行致浓度定量; 二通紫外光光度计测定品OD二吧0OD二陆0计算其比值衡量品纯度经验值:纯DNA:OD二陆0/OD二吧0≈一.吧(>一.9,表明RNA污染;