高效液相色谱仪的定量分析原理是什么?
高效液相色谱仪定量分析是一种相对分析,是通过对已知含量的物质和待测样品在相同条件下进行分析,得到数据后进行对照计算,推算出含量的。
题中已经知道未知含量物质的峰面积后,还无法得到含量,如果需要得到绝对含量数据,还需要将一个已知含量的样品(标准样品)在同一条件下进行一次分析,得到相同物质组份的峰面积。
然后根据双方面积比例计算出待测样品的绝对含量;如果是相对含量(待测组份在总样品量中的比例),也需要通过一个知道相对含量的标准样品来对照计算。
扩展资料:
储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数。
在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。
根据分离机制的不同,HPLC原理可分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法及分子排阻色谱法。
固定相为液体,根据被分离的组分在流动相和固定相中的溶解度不同而分离。依固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法和反相色谱法。
正相色谱法采用极性固定相,流动相为相对非极性的疏水性溶剂,常用于分离中等极性和极性较强的化合物;反相色谱法一般用非极性固定相,流动相为水或缓冲溶液,适用于分离非极性和极性较弱的化合物。
参考资料来源:百度百科--高效液相色谱仪
高效液相色谱原理
液相色谱仪是一款以用户为核心的智能化的色谱仪,具有常规HPLC的基本性能,并扩展了更多智能化的功能,能很好的满足用户的各类不同的应用要求,使用户能更加轻松的使用,并获得准确的分析数据。一、原理:高效液相色谱法的原理是在原始的经典色谱法基础上面引用气象色谐的理论,色谱柱则是用特殊的方式用小...
岛津高效液相色谱仪液相验证中最小检测浓度的具体操作步骤怎么做...
cL=2Ni*c*V\/20H 式中:cL——最小检测浓度,g\/mL;Ni——噪声峰高,Au(或V);c——样品浓度,g\/mL;H——样品峰高,Au(或V)。V——进样体积,μL 按标准就是以上,当然也可以用其他你更关注的样品 朋友可以到行业内专业的网站进行交流学习!分析测试百科网这块做得不错,气相、液相...
高效液相色谱法的计算公式
配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:A<[x]> 含量(mx)=mr×-Ar式中各符号意义同上 由于微量注射器不易精确控制进样量,当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时,以定量环进样为好。
如何监测反应的进行程度(薄层色谱,高效液+相色谱)
Rf 值测定:利用Rf值(移动距离与溶剂前行距离之比)来衡量斑点的移动程度。反应物和产物的Rf值可能不同,通过这种方式推测反应进度。高效液相色谱(HPLC):取样与进样:从反应混合物中取样,使用进样器将样品注入高效液相色谱仪中。分离和检测:样品混合物通过色谱柱,在不同条件下与固定相互作用,不...
高效液相色谱仪做有关物质的检验时自身对照为何峰面积不成比例?_百 ...
HPLC自身对照法做有关物质是最常用的方法,峰面积不成比例是指你的自身对照主峰与供试品主峰间的比例吗?这种情况也很多见,主要看供试品浓度的设计是否超载,如果浓度过大,造成超载则跟自身对照不成线性,但是这并不影响你的定量计算,因为自身对照法的优点就是缩小了对照与杂质见的线性范围,也就是说自身...
40%吡唑醚菌酯丙环唑用液相色谱怎样检测
2、色谱条件设置:选择液相色谱仪,设置色谱柱和检测波长。一般采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),色谱柱为C18柱,检测波长为254nm。3、样品分离:将样品溶液注入色谱仪中,通过流动相与固定相的相互作用,将吡唑醚菌酯丙环唑分离出来。4、定量检测:根据色谱图峰面积大小计算吡唑醚菌酯丙环唑的含量。
茶叶香精的检测方法
2. 气相色谱法:这种方法是通过将茶叶香精中的挥发性成分分离出来,然后通过气相色谱仪进行定量分析。这种方法的优点是结果准确、灵敏度高,但设备复杂,操作难度大。3. 高效液相色谱法:这种方法是通过将茶叶香精中的非挥发性成分分离出来,然后通过高效液相色谱仪进行定量分析。这种方法的优点是结果准确、...
高效液相色谱法(HPLC)测茶叶中有效成分的含量
高效液相色谱仪操作步骤:1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3). 打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。4). 进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。5). 有一段时间没用,或者换了新的...
如何监测反应的进行程度(薄层色谱,高效液相色谱)
Rf 值测定:利用Rf值(移动距离与溶剂前行距离之比)来衡量斑点的移动程度。反应物和产物的Rf值可能不同,可以通过这种方式推测反应进度。高效液相色谱监测反应进程:取样和进样:从反应混合物中取样,使用自动进样器或手动注射器将样品注入到高效液相色谱仪中。分离和检测:样品混合物通过色谱柱,在不同...
高效液相色谱(HPLC)系统适用性试验是指哪些内容?进行该试验的目的是什么...
一、在高效液相色谱法系统适用性试验中,有常用的四个内容:分离度、柱效、重复性和拖尾因子。1、分离度(resolution,R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。2、柱效:色谱柱是色谱仪最重要的部件(心脏)。柱子内径一般为1~6...
许趴优泽:[答案] 转载自分析测试百科网:“高效液相色谱仪结构及原理”高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填...
江山市17790852020: 高效液相色谱法用于含量测定的原理是什么? - ?
许趴优泽:[答案] 原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比.即:A样品/A对照=C样品/C对照 C,为浓度,可以理解成C=质量(mg)*纯度(%)/稀释倍数(ml) 所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是...
江山市17790852020: 高效液相色谱的原理及分析方法 - ?
许趴优泽: 分析色谱图 手动进样步骤 配置好流动相,将滤嘴洗头放入流动相页面内,打开泵和检测器,快跑排除气泡,设置既定流速,稳定一段时间,让基线跑平,用液相针吸取称量融配脱气后的对照(含量已标定),打开定量环将液相针里的液体匀速...
江山市17790852020: 气 、液相色谱测试方法资料有谁有啊? - ?
许趴优泽: 高效液相色谱定量分析过程可分为样品的前处理、标准品的配制、进样、色谱分离、检测及数据处理等七个步骤.一 误差的主要来源随着现在市场销售仪器自动化程度的提高,进样、色谱分离、检测及数据处理等实验环节对实验结果产生的误...
江山市17790852020: 高效液相含量测定原理 - ?
许趴优泽: 使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析...
江山市17790852020: 反向高效液相色谱法 分离,定性和定量的 原理是什么 - ?
许趴优泽: 简单的说:色谱分离的原理就是物质在固定相和流动相之间的分配系数存在差异,经过多次反复吸附解吸或者溶解挥发,最后达到分离.液相色谱就是流动相是液体.反相指固定相的极性小于流动相的极性. 定性通过保留时间 定量通过峰面积 同一物质在相同色谱条件下保留时间一致,需要对照品比对定性. 同一物质的浓度与峰面积成正比例关系,所以根据对照品的浓度和峰面积,可以定量得出样品的浓度. 不够详细,就这些吧!
江山市17790852020: 高效液相色谱可以测分离出来的化合物纯度吗 - ?
许趴优泽: 能
江山市17790852020: 液相色谱原理 - ?
许趴优泽: 样品中的成分在流动相(液体)带动下,经色谱柱分离,待检测组分经过检测器是得到响应.待测组分流出色谱柱的时间作为定性依据,在检测器的响应值作为定量依据.
江山市17790852020: 气液相色谱原理? - ?
许趴优泽: 气相色谱定量分析原理气相色谱法是一种分离分析方法.操作时使用气相色谱仪,被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个...
江山市17790852020: 高效液相的工作原理及使用 - ?
许趴优泽: HPLC是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析.