神经纤维瘤,有必要做免疫组化检查吗
[导读]检查时可见肿瘤呈粉红色或灰白色,基底广平不易活动或带蒂,质较硬,需借病理检查以确诊。神经纤维瘤又称神经膜瘤,神经瘤、神经周围纤维瘤、雪旺细胞瘤,神经周围纤维母细胞瘤。本病名目繁多,反映了对其来源有不同看法,归纳起来不外以下几类:第一类:神经膜瘤或雪展开
免疫组化的概念
是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
[编辑本段]●免疫组化的分类
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自影法等。
[编辑本段]●免疫组化实验所用的组织和细胞标本
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
[编辑本段]●免疫组化实验所用的抗体
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
●免疫组化常用的染色方法
根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。
[编辑本段]●免疫组化操作步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行
2. 缓冲液洗 3min/2 次。
3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。
4. 缓冲液洗 5min/2 次。
5. 滴加 Ultra V Block , 在室温下孵育 5 分钟以封闭非特异性的背景染色。
(注:孵育不要超过 10 分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有 5 - 10% 正常羊血清,这一步可以省略。)
6. 缓冲液洗 5min/2 次。
7. 滴加一抗工作液 37 ℃孵育 1 - 2 小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定)
8. 缓冲液洗 5min/2 次。
9 . 滴加 Primary Antibody Enhancer( 增强子 ) , 在室温下孵育 20 分钟。
10 .缓冲液洗 5min/2 次。
11 .滴加 HRP Polymer( 酶标二抗 ) ,在室温下孵育 30 分钟。
(注: HRP Polymer 对光敏感,应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。)
12 .缓冲液洗 5min/2 次。
13 .向 1ml DAB Plus Substrate ( 或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen (或 AEC Plus Chromogen ) , 混匀后滴加到切片上,孵育 3 - 15 分钟。(具体时间由染色深浅决定。)
14 .自来水充分冲洗 , 复染,脱水 , 透明 , 封片。
二.免疫组化 ( 三步法 ) 操作步骤 :
( 1 )、石蜡切片脱蜡至水。
( 2 )、 3%H 2 O 2 室温孵育 5-10 分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。
( 3 )、蒸馏水冲洗, PBS 浸泡 5 分钟 x2 (如需抗原修复,可在此步后进行)。
( 4 )、 5-10% 正常山羊血清( PBS 稀释)封闭,室温孵育 10 分钟,倾去血清,勿洗。滴加 一抗 工作液, 37 ℃ 孵育 1-2 小时或 4 ℃ 过夜。
( 5 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。
( 6 )、滴加适量 生物素标记二抗 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
( 7 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。
( 8 )、滴加适量的 辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素 工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分钟。
( 9 )、 PBS 冲洗, 5 分钟 x3 次。
( 10 )、显色剂显色 3-15 分钟( DAB 或 NBT/BCIP )
( 11 )、自来水充分冲洗,复染,脱水,透明,封片。
三. 冰冻切片免疫组化染色步骤:
冰冻切片 4-8um ,室温放置 30 分钟后,入 4 ℃丙酮固定 10分钟,PBS洗,5分钟x3,用过氧化氢孵育5-10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。
[编辑本段]●免疫组化实验结果的判定和分析
从实验结果而言,免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结果的描述与分析,图片的确定与选取,相关数据的提供,上述工作是免疫组化工作的重点内容,只有严格的实验设计,标准的实验操作,专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求,这点对于形式为腹水,上清,培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在实验开始前由双方明确,一般而言,客户方实验前应提出需要什么样的结果与分析,例如是简要还是详细的描述实验结果,需要实验数据否,图片的数量与规格等。如果为双盲试验或有第三方参与,则事先申明。
[编辑本段]●免疫组化在临床工作的意义
近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难肿瘤得到了明确诊断。在常规肿瘤病理诊断中,5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化肿瘤的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。
免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:
(1)恶性肿瘤的诊断与鉴别诊断;
(2)确定转移性恶性肿瘤的原发部位;
(3)对某类肿瘤进行进一步的病理分型;
(4)软组织肿瘤的治疗一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行免疫组化研究对软组织肿瘤的诊断是不可缺少的;
(5)发现微小转移灶,有助于临床治疗方案的确定,包括手术范围的确定。
(6)为临床提供治疗方案的选择。
纤维瘤怎么治疗
由于纤维瘤有一定的恶变可能或纤维瘤较大,会产生一定的压迫症状,因此在纤维瘤诊断明确以后,建议患者选择时间将肿物切除,以免纤维瘤发展成恶性或因过度长大,产生局部压迫症状。对于纤维瘤的诊断,大多是通过超声明确肿物的位置和性质,并且在手术或穿刺下对肿物进行病理活检。纤维瘤在治疗的时候,一定要...
神经纤维瘤可以健身
你好,神经纤维瘤患者是可以做运动的,因为患者处在运动状态时,每小时分泌的干扰素跟平时相比,会增加一倍以上,干扰素可以抑制并杀死肿瘤细胞。一、患者可到室外、公园等空气清新处活动。宜选择动作缓慢柔和、肌肉协调放松、全身能得到活动的运动,如步行、打太极拳、慢跑等,也可选择做一些扩胸、伸腰、...
运动可以治疗神经纤维瘤
神经纤维瘤疾病的发生对我们有很大的影响,所以在平时的日常生活当中,面对神经纤维瘤这个疾病的出现,大家一定要引起高度重视,及时的去配合治疗,并且注意多多做一些有氧运动,这样对于治疗神经纤维瘤是非常有帮助的。怎么治疗神经纤维瘤病效果好?神经纤维瘤是遗传疾病,西医目前无法彻底治愈,而且神经性纤维...
我身上长有许多神经系纤维瘤,大的直径有3公分大,我去了很多医院都说没...
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坚持锻炼有助于神经纤维瘤患者康复
神经纤维瘤患者进行科学适量的体育锻炼,具有非常重要的意义。一方面,患者在锻炼中可使紧张的心情放松下来,从而鼓起战胜疾病的信心。另一方面,合适的锻炼能改善体质、增强肌体的抵抗力,使患者从身、心两方面得到改善,对巩固疗效、促进身体康复有着重要的作用,那么神经纤维瘤患者适合做哪些运动呢? ...
神经纤维瘤的重要治疗,管用么?
多发性神经纤维瘤:肿瘤为多发性,多者达数百个,可在全身各处生长。大小不一,小的如豆粒, 乳头大小,大的如鸡蛋,生长缓慢。大的多突出于体表,也可成片、成块的生长,使皮肤和皮下层肥厚、下垂、起褶呈橡皮状。肿瘤柔软,无触痛,皮肤常有程度不一的色素沉着。此病大多自幼年已发生,可能有...
...不碰没事,手一碰就酸疼,在门诊看了,叫神经纤维瘤,要手术治疗,下_百 ...
回答:病情分析: 您可以先试着保守治疗一下的。必要时才考虑手术治疗。 指导意见: 蜈蚣、全虫、甲珠,焙熟粉碎为面用鸡蛋调和,放油不放盐炒熟后空腹服用。
神经纤维瘤病怎么治
(1)神经纤维瘤的病人有时对手术的耐受性较差,应加注意。(2)肢体上巨大的肿瘤可经常发生破溃,导致感染化脓,成为最后截肢的适应证。(3)皮瓣移植术后要妥善包扎固定,尽量使受区组织少变形活动,以保证移植的皮瓣与创面紧密贴附。4.中医治疗 中医治则:法宜中和气血,通经活络,软坚内消。方药:丹参...
做神经纤维瘤手术,要几岁才能做,要去广州什么医院做手术?
神经纤维瘤,是个良性的肿瘤,这个是生长在神经处的,这个需要看是单发的,还是多发的,是具体长在那个部位的,有没有家属史等的,指导意见:如果是单发的,同时是周围神经处的,目前有15岁是可以做了的,多发的,和家族性的,这个治疗相对麻烦些,一般是治疗比较明显的,这个在广州推荐省医,或者是中山医附一。 抢首赞 ...
神经纤维瘤该怎么治,请帮帮我??
其特点是多系统、多器官受累而以中枢神经系统最为明显,可引起多种肿瘤如错构瘤、神经纤维瘤、脑膜瘤及胶质瘤等;多灶性是其最常见的病理特点。.对症治疗:如抗癫痫、止痛剂; 2.手术治疗:适于皮损严重妨碍美容,或肿瘤太大影响功能,或有疼痛并疑恶变等。必要时进行神经外科手术,切除疼痛的病源。
错伟速克: 1.染色体检查常染色体17q、22q异常.基因分析可确定NFⅠ和NFⅡ突变类型.2.免疫组化神经纤维瘤根据其主要细胞类型而有不同的抗原表达.S-100蛋白及4型胶原对神经鞘细胞呈阳性表达,表皮膜抗原对神经衣细胞呈阳性表达,对成纤维细胞和神经鞘细胞呈阳性表达,神经丝和髓展开
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