荧光分光光度计基本原理
荧光分光光度计的基本原理是基于物质的荧光现象。首先,仪器通过高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光,这些光线经过滤光片的筛选,照射到样品池中,激发样品中的荧光物质。这些物质在吸收激发光后,会从基态跃迁到不稳定的激发态,随后在返回基态的过程中,部分能量以荧光的形式释放出来。
荧光的产生与物质的分子结构密切相关,不同物质的激发态能级分布各异,导致它们的荧光发射光谱具有独特的特征。通过测量和分析这些荧光特征,我们可以定性地识别不同类型的物质,这是荧光分光光度计在物质鉴定中的重要应用。
在溶液中,当荧光物质的浓度较低时,荧光强度与物质浓度之间存在良好的线性关系,即荧光强度IF与浓度C成正比,IF=KC。利用这个关系,荧光分光光度计可以进行定量分析,类似于紫外-可见分光光度法,常采用绘制标准曲线的方法来实现准确的浓度测量。通过这种技术,我们可以精确地评估样品中荧光物质的含量。
扩展资料
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
紫外可见分光光度法原理
紫外可见分光光度法原理如下:紫外可见分光光度计基本工作原理和红外光谱仪相似,利用一定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质,引起分子中价电子的跃迁,它将有选择地被吸收。一组吸收随波长而变化的光谱,反映了试样的特征。关于紫外-可见分光光度法的介绍如下:紫外-可见分光光度法是在190~800nm波长...
分光光度计的校正原理
不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的380~780nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红、橙、黄、绿、蓝、靛、紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。原理:分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过...
分光光度计的构成按顺序是
分光光度计的基本构造主要由五大部件组成,依次是光源、单色器、吸收池(比色皿)、检测器和信号显示系统。
紫外分光光度计原理
紫外分光光度计的组成:各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。1、光源 在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光...
原子吸收分光光度计工作原理
原子吸收分光光度计的灵敏、准确、简便等特点,现已广泛用于冶金、地质、采矿、石油、轻工、农业、医药、卫生、食品及环境监测等方面的常量及微痕量元素分析。原子吸收光谱仪和原子吸收分光光度计有3点不同:一、两者的原理不同:1、原子吸收光谱仪的原理:仪器从光源辐射出具有待测元素特征谱线的光,...
721型分光光度计的构造是什么?
T = I\/Io lg(Io\/I)=εcb 式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),ε为吸收系数,b为溶液的光径长度,c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。721型分光光度计的构造 721型分光光度计允许的...
原子吸收分光光度计.紫外分光光度计和红外的基本原理是什么
1.原子吸收是利用原子或者离子外层电子对特定波长的光可以吸收,从而发生能级跃迁的原理。因为不同原子或者离子的不同的电子跃迁要吸收特定波长的光,所以发射光经过分光以后形成的单色光如果被吸收,则溶液中含有特定的原子或者离子。吸收的强度可以用来标定溶液的浓度。2.紫外分光光度计的原理利用分子轨道上...
3.原子吸收分光光度计与紫外-可见分光光度计中的单色器的作用有何不...
检测器:原子吸收分光光度计的检测器通常对特定波长的光有高灵敏度,以便准确地测量被样品吸收的光量。而紫外-可见分光光度计的检测器则需要在广泛的波长范围内有响应,以适应不同分子的吸收特性。三、单色器的角色 在两种设备中,单色器都扮演着关键的角色。它们的主要功能是从连续的光源中分离出单一...
分光光度计有什么作用?
分光光度计的基本原理及种类分光光度计是理化分析中最常用的仪器。它的基本原理是建立在光与物质相互作用的基础上,当光子和某一溶液中吸收辐射的物质分子相碰撞时,就发生吸收,测量其吸光度值的大小可反映某种物质存在的量的多少。光的吸收程度与浓度有一定的比例关系,这就是著名的比直定律。该定律成立...
紫外—可见分光光度计
经单色器分光后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,一束通过样品池。光度计能自动比较两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它转换成吸光度并作为波长的函数记录下来。双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和样品池,还能自动消除光源...
藩蓝甲磺: 荧光分光光度计工作原理: 由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激发光,被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍...
施秉县13647446802: 分光光度计的基本原理 - ?
藩蓝甲磺:[答案] 光度的基本定律(朗伯比尔定律):液层厚度相等时,颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例.举个简单的例子就是液体中加的颜料越多,液体颜色越深. 实际上不光是颜料有颜色,也不是所有颜色都是肉眼可见的,但溶液表现出不同颜色是因为溶液(...
施秉县13647446802: 荧光分光光度计与紫外分光光度计有何区别?用荧光分光度法的检测方法可以用紫外分光光度计检测吗? - ?
藩蓝甲磺:[答案] 两种仪器的原理完全不同. 荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来. 紫外分光光度计是根据...
施秉县13647446802: 分光光度计的工作原理? - ?
藩蓝甲磺:[答案] 分光光度计要测量的样品必须是均一的溶液,不能有沉淀,如果有沉淀的话就要摇匀.之于为什么这样做和可以做哪些测量、如何测量,下面详述: 分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器. 而分光光度法则是通过测定被测物质...
施秉县13647446802: 荧光光度法原理xiangxide - ?
藩蓝甲磺:[答案] 利用荧光光度计测定环境中某些物质的方法叫荧光光度法. 而荧光分光光度计是给与一个激发波长后,到达激发态,再发射光,所以检测的是物质发射的光,检测信号与发射器不在一条线上. 分光是指利用光的色散原理采用分光计选择荧光所标示的物...
施秉县13647446802: 分光光度计有什么作用? - ?
藩蓝甲磺: 分光光度计的基本原理及种类分光光度计是理化分析中最常用的仪器.它的基本原理是建立在光与物质相互作用的基础上,当光子和某一溶液中吸收辐射的物质分子相碰撞时,就发生吸收,测量其吸光度值的大小可反映某种物质存在的量的多少...
施秉县13647446802: 分光光度计的工作原理? - ?
藩蓝甲磺: 分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带. 所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收.在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减...
施秉县13647446802: 影响原子吸收测定准确度的因素有哪些 - ?
藩蓝甲磺: 影响荧光分光光度法定量测定的主要因素 1.激发光照射 有一些荧光物质若受到强光照射,会发生分解而导致F↓.所以,荧光分光光度计通常在激发光单色器后装配有光闸,在测定时才打开光闸让激发光照射样品池. 2.温度 温度↑,荧光效率下降...
施秉县13647446802: 722型分光光度计的设计原理是什么? - ?
藩蓝甲磺:[答案] 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的,各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓...
施秉县13647446802: 荧光分析法是以什么定律为基础的 - ?
藩蓝甲磺: 答:荧光分光光度计是以朗伯比尔定律为基础进行定性定量分析的仪器. 使用荧光分光光度计,主要用于荧光定量分析法,定量的基础依据是朗伯比尔定律.