快速筛选菌种前提条件
我认为两者都可以用构建基因文库的方法来筛选出其相关的基因。
基因文库的构建,大致可分为5个步骤:
(1)染色体DNA的片段化 从某菌株中提取其染色体DNA,将其切割成一定大小的片段,插入噬菌体载体后被包装成噬菌体颗粒。
(2)载体DNA的制备 选择适当的噬菌体载体用限制酶切开,得到左、右两臂,以便分别与染色体DNA片段的两端连接。
(3)体外连接与包装 将染色体DNA片段与载体DNA片段用T4 DNA连接酶连接。然后重组体DNA与噬菌体包装蛋白在体外进行包装。
(4)重组噬菌体感染大肠杆菌 将包装得到的重组噬菌体在大肠杆菌内经增殖并裂解宿主细胞,产生的溶菌产物组成重组噬菌体克隆库,即基因文库。
(5)基因文库的鉴定和扩增 对于文库的鉴定,可以随机挑选一定数量的克隆,用限制酶切、PCR或其他方法分析其重组体DNA来进行。
提高目标产物的产量生产效率和效益,提高目标产物的纯度,减少副产物,可有效降低产物分离成本。改良菌种性状,改善发酵过程。
改变和扩大菌种所利用的原料范围、提高菌种生长速率、保持菌株生产性状稳定、提高斜面孢子产量、改善对氧的摄取条件并降低需氧量及能耗、增强耐不良环境的能力(如耐高温、耐酸碱、耐自身所积累的过量代谢产物)、改善细胞透性以提高产物的分泌能力等。
快速筛选菌种前提条件
(1)染色体DNA的片段化 从某菌株中提取其染色体DNA,将其切割成一定大小的片段,插入噬菌体载体后被包装成噬菌体颗粒。(2)载体DNA的制备 选择适当的噬菌体载体用限制酶切开,得到左、右两臂,以便分别与染色体DNA片段的两端连接。(3)体外连接与包装 将染色体DNA片段与载体DNA片段用T4 DNA连接酶连接。
菌种阶梯筛选法的注意事项有哪些
注意如下:1、要挑选出现早,长势快,无病虫害,纯度高,菌龄适宜的优质菌种。2、做好蘑菇场和周围环境的卫生工作,蘑菇棚应安装纱门和纱窗,防止昆虫进入。3、培养物要新鲜且无霉变,消毒灭菌要彻底。
为什么说土壤是人类最丰富的“菌种资源库”如何从中筛选所需要的菌种...
【答案】:土壤是微生物生长和栖息的良好基地。土壤具有绝大多数微生物生活所需的各种条件,是自然界微生物生长繁殖的良好基地。其原因在于土壤含有丰富的动植物和微生物残体,可供微生物作为碳源、氮源和能源。土壤含有大量而全面的矿质元素,供微生物生命活动所需。土壤中的水分都可满足微生物对水分的需...
简述菌种选育方法
1、自然选育:未经过人工处理,主要利用了菌种的自然突变,筛选出理想菌种的方法便是自然选育。2、诱变育种:主要利用物理诱变剂(比如紫外线)来提高突变率,从而选出符合目的的突变株,也可以利用化学诱变剂(比如噬菌体)来选出合适的突变株。3、杂交育种:主要利用品种间的杂交并创造出突变,随后再选育...
菌种筛选的一般流程是什么
在筛选能利用烃类的菌时可用仅含烃类的培养基进行筛选。从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样,富集培养,纯种分离,性能测定。不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。
论述从环境中筛选目标菌中的方法,一种就可以,详细点
例如营养缺陷型和抗性突变菌株的筛选有它们的特殊性,营养缺陷型或抗性突变的性状就象一个高效分离的"筛子",以它为筛选的条件,可以大大加快筛选的进程并有效地防止漏筛。在现代的育种中,常有意以它们作为遗传标记选择亲本或在DNA中设置含这些遗传标记的片段,使菌种筛选工作更具方向性和预见性。本节还将简单介绍其它...
为什么说土壤是人类最丰富的菌种资源库?如何从中筛选出所需的菌种?
通气条件好可为好氧性微生物创造生活条件;通气条件差,处于厌氧状态时又成了厌氧性微生物发育的理想环境。土壤中的通气状况变化时,生活其间的微生物各类群之间的相对数量也起变化。土壤的 pH 值范围在 3.5–10.0 之 间,多数在 5.5–8.5 之间。而大多数微生物的适宜生长 pH 也在这一范围。即...
豆豉生产过程中选择优良菌种的条件
您要问的是豆豉生产过程中选择优良菌种的条件有哪些吗?如下:1、菌种来源:需要从传统发酵豆豉中筛选出发酵能力强、品质稳定的优良菌种。2、菌种纯度:确保菌种的纯度高,没有杂菌或其他有害微生物的污染。3、菌种稳定性:应具有较好的稳定性,能够在发酵过程中保持活性和功能。
土壤中菌落筛选的大致步骤是什么,因为对菌落筛选很不了解,要筛选土壤中...
真菌为10-4,细菌为10-8,放线菌为10-6,倒平板获得单菌落。将单菌落转接斜面培养,镜检菌体的纯度,若不纯,再次进行稀释分离倒平板获得单菌落,如此重复,直至获得单菌落。然后经初筛、复筛(透明圈法、变色圈、生长圈、抑制圈),菌种鉴定。若要进行发酵生产,还需进行生产性能试验、毒性试验 ...
理想的工业发酵菌种应具备什么条件?
1.能在廉价原料制成的培养基上生长,且生成的目的产物产量高、已与回收 2.生长较快,发酵周期短 3.培养条件易于控制 4.抗噬菌体及杂菌污染的能力强 5.菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定 6.对放大设备的适应性强 7.菌种不是病原菌,不产生任何有害的生物活性物质和毒素。
江窦维沃: 分离筛选新菌种的方法如下:(1)准备工作做好菌种筛选、分离前的准备工作,包括玻璃 器皿灭菌、培养基配制、无菌室消毒杀菌等所有相关工作.具体细 节参见相关专...
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 在筛选菌株时,各个量都是怎么确定的(如:培养基量,温度,时间等) - ?
江窦维沃: 我想你要问的是做筛选时的培养条件.这个没有特定的要求,一般用的是常用的培养条件,30℃左右,时间的话看菌体生长速度,有些几个小时就行,有的要一两天,所以要过6h,4h,3h,2h....越往后观察频率越高. 如果你做得时平板,那培养基的量一般就是把平板地面铺平即可,5-7ml的样子
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 菌种筛选 耐酸产蛋白酶菌种 - ?
江窦维沃: 初筛1:用选择性培养基,把PH调低,则耐酸的才能活,另外,把N源去掉,加入酪素(酪蛋白),其他营养成分照基础培养基就行了,这样,产蛋白酶的菌种能将酪素分解成酪氨酸,就有可利用的N源,不产蛋白酶的菌种不能利用酪素,则没有N源,最后耐酸又产蛋白酶的菌种成为优势菌,挑出,换培养基.初筛2:初筛1所得菌种用透明圈法(蛋白酶水解酪素产生透明圈,直径越大,酶活越高,具体步骤自己找)挑出蛋白酶活力高的菌种,接入摇瓶培养 复筛:初筛2所得菌以福林试剂法测酶活(以Folin染色,测吸光度,具体步骤自己找),酶活最高者为最终菌种
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 如何筛选细菌 酵母菌 放线菌 - ?
江窦维沃: 三种菌生长所需营养、环境条件、生长因子不同,可用不同的培养基进行筛选 细菌 肉膏蛋白胨 放线菌 高氏1号 酵母菌 马丁 霉菌 豆芽汁
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 如何从土壤中筛选菌株 - ?
江窦维沃: 首先你要明确你希望筛选的菌株是哪一类,土壤中的菌株有很多种,生活特性不同,菌种特性也是大不相同的.并且,你还要明确你删选的菌株将来是要做什么的.不同的菌株有不同的筛选方法以及培养方法和保存方法.
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 菌种的选育方法有哪些? ?
江窦维沃: 我们通过对微生物遗传变异的研究,在掌握其基本规律的基 础上,可以从中选育出符合生产需要的优良菌种.目前,主要有 以下菌种的选育方法:1.生产育种生产中,...
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 菌种筛选的一般流程是什么 ?
江窦维沃: 菌种筛选指将从自然界或实验室保藏的菌株中用不同方法选出具有特殊性能的菌株,如筛选抗生菌时可用能对其产生拮抗作用的菌作为筛选对象进行筛选,在筛选能利用烃类的菌时可用仅含烃类的培养基进行筛选.从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样,富集培养,纯种分离,性能测定.不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定.(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环... - ?
江窦维沃:[答案] (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,培养噬盐菌的菌样应从海滩等高盐环境中采集样品.(2)纯化微生物时需要使用选择培养基,对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以...
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 以下是从自然菌群中筛选理想菌种的主要步骤,请回答:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定→菌种保藏(1)在寻找目的菌株时,要根据它对___的... - ?
江窦维沃:[答案] (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化.培养嗜盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集. (2)筛选目的菌株时可以通过选择培养增加目的菌株的浓度,以确保能够从样品中分...
阿克塞哈萨克族自治县18269583528: 产酸菌如何筛选 - ?
江窦维沃: 1、查找乳酸菌的筛选培养基配方(特别是乳酸菌的最适生长pH,一定要严格控制,能筛掉好多杂菌) 2、取粪便 3、将粪便稀释至多个稀释度,再涂平板至筛选培养基,长出来的就是疑似目标菌株,一般会有多个不同菌种,分别挑取后纯培养 4、翻阅细菌分类手册,看乳酸菌菌落特点和显微特点,又可以筛掉很多杂菌 5、剩下的几株菌就是目标菌 注意:不推荐你做菌种分类鉴定实验,太繁杂,工作量极大,初学者太容易出错 顶多顶多做一下vp实验,产酸产气实验和血清实验 至于浙大阿米巴先生说的测16sRNA,GC含量之类的,想都不用想,大学没那个设备,你也没那个技术,而且成本高,导师不会让你去浪费材料的,不要妄想能筛出新种来