有谁知道荧光分光光度计的原理?

荧光分光光度计原理及结构?~

基本原理
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光．
不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。
在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

基本结构
1. 光源：
为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。
2．激发单色器：
置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
3．发射单色器：
置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。
4． 样品室：
通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时，光源与检测器成直角安排；测量固体时，光源与检测器成锐角安排。
5． 检测器：
一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光．不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。

荧光分光光度计工作原理：
由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后，此光即为荧光物质的激发光，被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光，经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上，由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪，激发光单色器和荧光单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制，当测绘荧光发射光谱时，将激发光单色器的光栅，固定在最适当的激发光波长处，而让荧光单色器凸轮转动，将各波长的荧光强度讯号输出至记录仪上，所记录的光谱即发射光谱（emission spectrum），简称荧光光谱。
当测绘荧光激发光谱时，将荧光单色器的光栅固定在最适当的荧光波长处，只让激发光单色口的凸轮转动，将各波长的激发光的强度讯号输出至记录仪，所记录的光谱即激发光谱（emission spectrum）。
当进行样品溶液的定量分析时，将激发光单色器固定在所选择的激发光波长处，将荧光单色器调节至所选择的荧光波长处，由记录仪得出的信号是样品溶液的荧光强度。

荧光分光光度计工作原理：
由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后，此光即为荧光物质的激发光，被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光，经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上，由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪，激发光单色器和荧光单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制，当测绘荧光发射光谱时，将激发光单色器的光栅，固定在最适当的激发光波长处，而让荧光单色器凸轮转动，将各波长的荧光强度讯号输出至记录仪上，所记录的光谱即发射光谱（emission spectrum），简称荧光光谱。
当测绘荧光激发光谱时，将荧光单色器的光栅固定在最适当的荧光波长处，只让激发光单色口的凸轮转动，将各波长的激发光的强度讯号输出至记录仪，所记录的光谱即激发光谱（emission spectrum）。
当进行样品溶液的定量分析时，将激发光单色器固定在所选择的激发光波长处，将荧光单色器调节至所选择的荧光波长处，由记录仪得出的信号是样品溶液的荧光强度。更多的可以咨询科邦实验室

光的本质是一种电磁波，具有不同的波长。可见光的波长范围在400～700nm。紫外光的波长范围在200～400nm范围。有色物质可以选择性地吸收一部分可见光区光地能量而呈现不同颜色，某些物质却能选择性地吸收紫外光的能路。物质吸收由光源发出地某些波长可形成特定的吸收光谱。由于物质的吸收光谱与物质的分子结构有关，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，所以可以利用物质的特定吸收光谱对其进行定性和定量分析。分光光度法是利用各种物质所具有的这种吸收特性所建立的分析方法。

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东风区17731049674： 有谁知道荧光分光光度计的原理? - ？
端骨冠心： 荧光分光光度计工作原理: 由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激发光,被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍...

东风区17731049674： 荧光分光光度计与紫外分光光度计有何区别?用荧光分光度法的检测方法可以用紫外分光光度计检测吗? - ？
端骨冠心：[答案] 两种仪器的原理完全不同. 荧光分光光度计由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来. 紫外分光光度计是根据...

东风区17731049674： 荧光光度法原理xiangxide - ？
端骨冠心：[答案] 利用荧光光度计测定环境中某些物质的方法叫荧光光度法. 而荧光分光光度计是给与一个激发波长后,到达激发态,再发射光,所以检测的是物质发射的光,检测信号与发射器不在一条线上. 分光是指利用光的色散原理采用分光计选择荧光所标示的物...

东风区17731049674： 荧光分光光度计 - ？
端骨冠心： 它的光路有两套分光系统,分别的激发和发射光分光系统,光传播方向是互垂直的.绘制谱图方法:1.激发波长不变,以发射波长进行扫描;2.发射波长不变,以激发波长进行扫描.要到最佳激发波长和发射波长,都要做这两种扫描.

东风区17731049674： 怎样正确使用原子荧光分光光度计及注意事项 - ？
端骨冠心： 原子荧光光度计利用硼氢化钾或硼氢化钠作为还原剂,将样品溶液中的待分析元素还原为挥发性共价气态氢化物(或原子蒸汽),然后借助载气将其导入原子化器,在氩—氢火焰中原子化而形成基态原子. 原子荧光分光光度计的使用注意事项:...

东风区17731049674： 荧光分析法是以什么定律为基础的 - ？
端骨冠心： 答:荧光分光光度计是以朗伯比尔定律为基础进行定性定量分析的仪器. 使用荧光分光光度计,主要用于荧光定量分析法,定量的基础依据是朗伯比尔定律.

东风区17731049674： 分析说明荧光分光光度计与普通的分光光度计在结构上有哪些不同 - ？
端骨冠心： 结构没多大不同,只是荧光的可测范围大些.

东风区17731049674： 分光光度计的原理哪位大侠知道啊?最好详细一点. - ？
端骨冠心： 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的,即让单色光分别通过被测试样和标准溶液,二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率.http://www.yq001.com/article-77.html

东风区17731049674： 荧光分光光度计和紫外分光光度计的区别 - ？
端骨冠心： 1)荧光分光光度计有两个单色器,而紫外只有一个单色器2)荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外是成一条直线的.除了以上两点之外还有两点区别:3)荧光分光光度计是以氘灯做为光源,而紫外是以氢灯或氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源4)荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面,而紫外仅为两面为光学面.

东风区17731049674： 电致发光光谱原理及用什么仪器检测? - ？
端骨冠心： 电致化学发光检测仪应用领域: 药物、氨基酸、多肽、蛋白质及核酸检测分析 蛋白质与药物、核酸相互作用研究. 荧光分光光度计能测定:FS-2型FS-2型荧光分光光度计荧光是荧光分子受到较短波长光的激发而发出较长波长荧光的一种现象...