BV2细胞用什么方法做转染
DEAE-葡聚糖法。
磷酸钙共沉淀转染。
电穿孔法。
脂质体法。
病毒介导的感染,病毒感染增强剂。
非脂质体转染 。
小胶质细胞 BV2作为中枢神经系统内的免疫细胞,既可通过吞噬脑组织中的病原体及有害颗粒对神经元起保护作用,又可在致炎因子的作用下,激活成反应性小胶质细胞,分泌炎性细胞因子对神经元起毒性作用,是治疗神经炎症及神经退行性疾病的一个重要靶点
BV2细胞用什么方法做转染悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯)
DXY721认为:
悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了。
其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进去的,转染率能有多少,转进去是否可以稳定表达目的蛋白等等。
我们也是用脂质体做悬浮细胞的转染,说明书上都有具体的操作过程,将脂质体和目的基因按比例混合,然后加到细胞悬液里就OK了,说的简单,实际上还是有一些细节要注意的,比如脂质体和目的基因混合的比例,转染的细胞数,细胞的代数,细胞的状态,有的还要求在转染的前一天传代一次,不过不要怕,这些在脂质体说明书上都有明确的说明,按照说明书做就可以了。
jinghuanlv认为:
悬浮细胞和贴壁细胞转染还是有很大不同的。
脂质体转染的原理基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。
我们实验室转染悬浮细胞是用的电穿孔法,目前为止,悬浮细胞转染的最好方法还是电转,我们实验室用的电转仪是Bio-Rad的,使用条件是电压250V,电容975uF,效果不错,不妨一用。
由于V2受体缺陷引起的肾性尿崩症,其相关的水孔蛋白是( )。
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流式细胞仪b3-r3-v2什么意思
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10X空间转录组之利用基因表达和形态学信息划分组织区域(3D表达域构建...
第一类使用传统的聚类方法,如k-means和Louvain算法。 根据 ST 技术的不同分辨率,这些方法仅限于点数少或稀疏,并且在组织切片中聚类结果可能不连续。 第二类利用单细胞 RNA-seq 定义的细胞类型特征来解卷积spot。 虽然这些integration方法很有吸引力, 但随着空间分辨率的提高,它们不适用于细胞或亚细胞水平分辨率的 ST...
垂体后叶素作用哪个受体
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红细胞产生丙二醛的具体步骤,以及需要的试剂
总RNA提取试剂盒步骤: 样品处理: a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。 b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。 丙二醛含量(nmol\/g)==(A532-A600)*V1*V*1.55*1\/10*W*V2 A为吸...
基因编辑治疗艾滋病的根本原理是什么?
研究人员更进一步于HIV-1传染的T细胞系之中试验了他们的CRISPR\/Cas9系统,结论找到即使展开细胞因子再次抑制,p24的表达亦遭明显刺激,因而除此之外采用6种gRNAs可更进一步减弱编辑效率。所以透过CRISPR\/Cas9系统靶往HIV-1调节基因或许是一种构建功能性医治的精确方法。
碳酸氢钠注射液漱口是治疗什么的? V2有什么作用?
碳酸氢钠注射液漱口主要是起到保持口腔卫生的作用,并不是治疗什么。Vb2能促进发育和细胞的再生;促进皮肤、指甲、毛发的正常生长;帮助消除口腔内、唇、舌的炎症;增进视力,减轻眼睛的疲劳等等。
发疯的数学题目 想了我一个下午 脑细胞死了若干个
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符合淋巴组织细胞性变型 用化疗可以有五年的存活率 中医也可以彻底痊愈 但肝脏转移就不可以
0v2什么意思
饱和度。ov2是混合静脉血血氧的饱和度,其中OV2表示的是饱和度为2,混合静脉血血氧饱和度既反映组织细胞水平的血液灌注、心排量和心输出量,也反映组织细胞的氧合程度。
幸珠罗库: DEAE-葡聚糖法.磷酸钙共沉淀转染.电穿孔法.脂质体法.病毒介导的感染,病毒感染增强剂.非脂质体转染 .
青神县18599749926: 干细胞如何转染质粒 - ?
幸珠罗库: 最保险的方法当然是用慢病毒转染,全交给公司做,周期3个月左右,价格在2万以内.自己做就考验技术和人品了,要能问一些实验借到空白的病毒质和包装质粒,或者买英俊或热电的系统,然后自己构建转染质粒、包装,整个周期2到12个月(真的要看人品),成本如果有现成试剂与质粒应该在3000以内. 其实,其它常规转染方法也可以,就看你的细胞了,先试一下常规转染方法(脂质体2000、电转),不行再用慢病毒.
青神县18599749926: 悬浮细胞的转染怎么做 - ?
幸珠罗库: 悬浮细胞的转染方法:(以下内容转自生物帮资讯) DXY721认为: 悬浮细胞和贴壁细胞在转染过程中差别不大,主要差别在于转染后的筛选,当然如果你做的是瞬时转染就不存在筛选的问题了. 其实转染的过程很简单,问题是能不能转的进...
青神县18599749926: 我要做脂质体转染到3T3 - L1细胞看是否质粒会 表达. 但是3T3 - L1买来是一瓶的..没养过.. - ?
幸珠罗库: 你买来之后你自己要培养,满满的一瓶先分瓶吧,大概培养到细胞的对数生长期,或者汇合度大概在60%-70%左右的时候可以进行保种.保种之后最好复苏一管用来检验.你脂质体转染如果用的是lipofectimin2000的话,步骤网上一大把.我用过lipofectimin2000和vigrous的,步骤都可以再网上查到的.你转染后也要分为瞬时转染和稳定转染的.稳定转染需要用抗性进行筛选,希望转染的质粒和基因组进行重组结合.瞬时转染的话,大概在48小时的样子,效果会比较好,不过这个不同的细胞是不一样的,需要你自己摸索下了.
青神县18599749926: 大家好,我的质粒是6000多bp的,比较大,我想用它做基因转染,实验室有经验的都说太大了,不好转. - ?
幸珠罗库: 楼上这么鄙视的好心人~ 你是插入片段6K还是质粒大小6K 不过无所谓 都不算大 可以直接脂质体转染 病毒侵染是为了将质粒整合到细胞的基因组中 保证长期稳定表达 不会随着细胞分裂丢失 如果你不需要这种稳定表达 就直接转染好了 ps 病毒侵染哪有那么贵 你们实验室是没有建立这个系统么
青神县18599749926: 细胞不耐受无血清培养基,怎么做转染 - ?
幸珠罗库: 请问您培养的是什么类型的细胞呢?可以尝试用义翘的sinofection转染试剂,只要在制备DNA与转染试剂混合液的时候不用血清,细胞还是可以用有血清培养基的.
青神县18599749926: 脂质体转染一定需要专用的培养基吗 - ?
幸珠罗库: 推荐用无抗生素培养基做转染,而后用含有抗生素的培养基进行细胞株筛选以及优势细胞株表达环境的维持.
青神县18599749926: 转染细胞不表达怎么补救 - ?
幸珠罗库: ?靥逦猵Egfp-N1,pIERS 现在是平行做几个基因,转然后,只有空载体和一个基因可以看到绿色荧光,其余均没有,这会是什么原因呢?怎么补救啊? 答: 需要考虑的问题有: 1.你的细胞和转染的方法,是不是你的细胞本身就很难转染,有些...
青神县18599749926: 有没有做过hk - 2细胞转染得分 - ?
幸珠罗库: hk2细胞转染 转染步骤 仅供参考 实验步骤设计用来进行24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染,其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物. 转染前一天胰酶消化细胞并计数,细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长的培养基中.对于每...
青神县18599749926: 逆转录病毒 载体可以之间转染细胞么 - ?
幸珠罗库: 看文章里面有pMX-IRES-BSR做的逆转录病毒转染细胞过表达,可是这个病毒载体的图却不知道如何找到,也不知道这个使用什么酶切可以,希望能得到帮助,谢谢!