常用荧光二抗颜色
1. 青色：例如荧光素同型免疫球蛋白（FITC）标记的抗体，其激发波长大约在488纳米。
2. 绿色：如吗啡钴胺（Cy2）和荧光异硫氰酸铵（FITC）标记的抗体，激发波长也在488纳米左右。
3. 红色：包括荧光素异硫氰酸物（Rhodamine）和吩咐若汞（PE）标记的抗体，激发波长介于532纳米至568纳米之间。
4. 紫色：例如高亲合力荧光素异硫氰酸物（Alexa Fluor 488）和银箔铂染料（APC）标记的抗体，激发波长在650纳米至660纳米之间。
在生物学和医学研究中，荧光二抗是一种关键的实验技术，它通过不同的共轭荧光染料使靶分子可视化，便于检测和分析。
免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗?
又带有可以被检测出的标记（如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗，提高了通用性。一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体，即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。
western二抗用不用避光
不用，除非是荧光二抗，因为荧光在可见光下长时间保存容易淬灭，造成检测信号低。一般带有酶标记的二抗对光都不敏感，主要是对温度和反复冻融比较敏感。不用避光，分装低温冻存就可以了。
蛋白荧光标记方法原理是什么?
间接标记：在间接标记方法中，首先使用特异性抗体与目标蛋白结合，形成抗原-抗体复合物。然后，荧光染料（例如荧光标记的二抗）与这个抗原-抗体复合物结合，从而将荧光信号引入到目标蛋白上。这两种方法都能够实现蛋白的荧光标记，具体选择哪种方法取决于实验的需要和可用的试剂。无论是直接标记还是间接标记，...
western 一抗 用什么稀释
可以用加了脱脂奶粉的封闭液，也可以用TBST液。如果显色用的是红外荧光二抗，则只能用TBS液稀释。
免疫荧光染色的一抗,二抗分别用什么稀释?
培养液成分太多了。而且固定之后细胞都死了，用培养液没什么意义，只要保证其pH等条件适合就好了。抗体说明书上都会有推荐的稀释倍数。上网查一下，有很多protocol。一般一比几百到一万都有，依抗体而定。可以4度过夜，这样染色效果好。二抗一般较便宜，一般1：50到1：200多。
如何选择荧光二抗?
【一抗的种属来源】二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为...
请教免疫荧光双标中荧光二抗的选择是否合适
一般来说,选择合适的二抗需要从下面几个方面考虑：1.二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源;2.二抗需与一抗的类别或亚类相匹配.这通常是针对单克隆抗体而言.多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体;3.一般来说,不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系,来源于山羊的二抗与...
冰冻切片免疫荧光实验步骤?
2.冰冻切片8-10μm，推荐瑞沃德冷冻切片机，温度稳定，切片质量高。室温放置30分钟以上防脱片，-20℃保存。从冰箱拿出的冰冻切片在室温放置30分钟以上再进行免疫荧光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分钟。4.用2%BSA室温或37℃封闭1小时。5.一抗4℃孵育过夜。1xPBS洗3次，每次3-5分钟。6.二抗室温或37...
直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的异同
直接免疫荧光方法中获得的信号与间接方法相比可能较弱，因为直接方法中没有使用二抗进行信号放大。免疫荧光多个二抗结合一抗可使信号放大。2、直接免疫荧光和间接免疫荧光染色方法的相同之处：免疫荧光 (IF) 或细胞成像技术使用抗体将荧光染料（也称为荧光素或荧光物）标记到特异性目标抗原上，所用荧光染料...
免疫荧光标记为什么不直接标记一抗而标记二抗
二抗能起到信号放大的作用，如果仅仅依赖一抗，可能抗体需要量以及光亮强度都会受局限。即，一抗负责准确识别靶标分子，二抗负责信号放大。典型实验结果如下图：
僪胖复方： 常用荧光二抗的颜色主要有青色、绿色、红色、紫色等,具体如下:青色:如荧光素同型免疫球蛋白(FITC)等标记的一些抗体,激发波长在488纳米左右.绿色:如吗啡钴胺(Cy2)和荧光异硫氰酸铵(FITC)标记的一些抗体,激发波长在488纳米左右.红色:如荧光素异硫氰酸物(Rhodamine)和吩咐若汞(PE)等标记的一些抗体,激发波长在532纳米至568纳米之间.紫色:如高亲合力荧光素异硫氰酸物(Alexa Fluor 488)和银箔铂染料(APC)标记的一些抗体,激发波长在650纳米至660纳米之间.荧光二抗是生物学和医学研究中常用的实验技术之一,它可以通过多种颜色的共轭荧光染料将靶分子可视化,并使其易于检测和分析.
黎城县19721215417： 流式实验中二抗荧光标记具体显何种颜色? - ？
僪胖复方： 流式里二抗的颜色一般就红绿两种,要根据你机器的激发光波长来决定用哪种二抗了
黎城县19721215417： 荧光二抗标记用HRP、AP、FITC、生物素法各发什么颜色荧光? - ？
僪胖复方： 这四个不是一码事,HRP和AP是酶,二抗上挂了酶,要给相应的底物才能显色,显色方式可以通过发荧光也可以不发荧光(例如给予ECL底物,其中的H2O2和鲁米诺在HRP的作用下,能在黑暗中发出荧光;也可以给予双氧水和DAB,反应产生棕色不溶于水的物质);FITC为异硫氰酸荧光素,本身就是黄绿色荧光,二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察;生物素一般也是挂在二抗上的,利用卵白素分别连接生物素标记的第二抗体和生物标记的酶,由酶催化底物,生成终产物,这个终产物也是不溶于水的.
黎城县19721215417： 如何选择抗体 - ？
僪胖复方： 如何选择抗体 首先要分析试验的应用类型,一般抗体说明书都列出该抗体经试验验证过适用于何种分析类型,比如可以应用于WB,IHC,ICC 或者是 ELASA 分析等 其次是分析样本蛋白的结构性质,看待测样本蛋白的结构域以及提取或处理过程等 最后就是具体看样品的种属,抗体宿主的种类,荧光和化学发光标记等等
黎城县19721215417： 免疫学检验最常用的方法拜托各位了 3Q - ？
僪胖复方： 以下是几种常用的免疫学技术: 1.免疫荧光技术 免疫荧光技术是利用荧光素标记的抗体(或抗原)检测组织、 细胞或血清 中的相应抗原(或抗体)的方法.由于荧光抗体具有安全、 灵敏的特点,因此已 广泛应用在免疫荧光检测和流式细胞计...
黎城县19721215417： 免疫荧光的常见荧光 - ？
僪胖复方： 1)FITC 2)RB200 3)TRITC 4)镧系:Eu、Tb 5)PE 6)其它 常见荧光素的特性 1)FITC:黄色结晶粉末,吸收光:490~495nm,发射光:520~530nm,明亮的黄绿色荧光. 2)RB200:橘红色粉末,吸收光570nm,发射光595~600nm,橘红色荧...
黎城县19721215417： 如何选择二抗 - ？
僪胖复方： 首先确定你所选的检测蛋白的状态,比如有无标签,如6*HIS等.选择一抗就根据检测蛋白的状态来选,如果有蛋白带标签,就选针对标签的抗体. 如果没有标签,那么就要自己制备一抗. 二抗的选择则主要根据一抗的来源来选择,如果一抗是鼠源的,二抗一般就选用羊抗鼠的就可以了.
黎城县19721215417： 如何选择流式荧光 - ？
僪胖复方： 这个问题有点不好说,每个荧光都有自己在某个波长的最大吸收峰,原则上最大吸收峰差的越远补偿越小,FITC PE APC 最常用的三个荧光,一般一管染三种抗体就选这三个颜色,便宜,而且好染.如果再加的话可以选PE-cy7或APC-cy7,个人觉得可以,一管不宜染太多种抗体,到时候很难分析,补偿也大,结果不准确. 同时,建议你做原代细胞流式考虑染死亡细胞(7AAD).对了,最好不用Percy 5.5,不好染.高保真生物技术有限公司~实验整体外包服务商~~~
黎城县19721215417： ELISA里一抗和二抗的区别 - ？
僪胖复方： 二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体,在免疫学反应中,经常需要针对试验选择不同的二抗,艾美捷能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品.检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,同时在后继试验中也...
黎城县19721215417： 流式抗体如何选择? - ？
僪胖复方： 第一看清楚抗的是你的目标蛋白质没错,目标蛋白的物种不要搞错了,有些抗体对好几个物种的目标蛋白有反应,对你的实验有没有影响.第二抗体的物种是小鼠,大鼠,兔子还是什么.虽然现在荧光都标记好了,一般不需要二抗.但最好还是...
